丙型肝炎

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A与干扰素的应答耐受；HCVNS5A-B片段的表达及在酶活性研究中的应用；稳定表达丙型肝炎病毒复合多表位基因P815细胞克隆的建立；稳定表达丙型肝炎病毒单链丝氨酸蛋白酶的HepG2细胞克隆的建立；蛋白对HCV／HBVDNA疫苗的免疫增强作用；慢性丙型肝炎干扰素治疗后复发患的干扰素再治疗；     

乙型肝炎病毒X蛋白基因型特异性功能差异

目的研究B、C基因型乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）功能差异。方法B、C基因型乙型肝炎病毒X基因真核表达载体（分别为pcDNA3．1－XB及pcDNA3．1－XC）及空白载体pcDNA3．1／Hygro（－）以脂质体2000分别转染Chang细胞，转染细胞2d后以流式细胞仪检测凋亡率；转染细胞以潮霉素筛选，14d后形成的抗性细胞集落以冷甲醇固定、Gimsa染色并计数；各载体与指示载体pCMVβ共转染细胞，转染2d后裂解细胞并检测胞内β-半乳糖苷酶的活性。所有数据均以配对t检验进行分析。结果各载体转染Chang细胞后细胞的凋亡率为pcDNA3．1-XC〉pcDNA3．1-XB〉pcDNA3．1／Hygro（-），形成的抗潮霉素细胞集落数为pcDNA3．1／Hygro（-）〉pcDNA3．1-XB〉pcDNA3．1-XC，细胞内β-半乳糖苷酶活性为pcDNA3．1-XB＋pCMVβ〉pcDNA3．1-XC＋pCMVβ〉pcDNA3．1／Hygro（-）＋pCMVβ。结论B基因型HBx反式激活能力高于C基因型HBx，而抗细胞增殖及致细胞凋亡能力都低于C基因型HBx，HBx这些功能差异可能与R、C基因型乙型肝炎病毒致病性差异有关。     

试析69组方药或疗法对HBV—M的影响

乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)的检测是目前诊断乙型病毒性肝炎的客观依据,也是判定病情转归、药物疗效的一个重要指标。近年来,由于乙型肝炎的发病率高,各地都对其治疗进行探索,但总的特点是单项论述多,综合评议少,为此笔者汇集了69组治疗乙型肝炎的方药和疗法,以其对HBV-M的影响为客观指标进行分析,供参考。 一、方法     

肝毒清对HBV转染细胞表达功能的抑制

以乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）转染细胞作为模型，观察了纯草药方肝毒清对２．２．１５细胞分泌ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和Ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）的影响，并以抗病毒药物无环鸟苷为对照。提示草药肝毒清在体外有一定的抗病毒作用。     

直接酶标法检测肝组织中丙型肝炎病毒抗原（HCAg—NS3）的研究

以单克隆抗－ＨＣＶ－ＮＳ３直接酶标法对石蜡包埋肝组织中丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＡｇ－ＮＳ３）进行测定，该抗体系应用基因重组表达丙肝抗原（ＨＣＶ－ＮＳ３区－Ｃ３３－Ｃ）免疫小鼠并通过细胞融合术后获得，４９例病毒性肝炎患者肝组织测定结果，抗－ＨＣＶ阳性组的ＨＣＡｇ－ＮＳ３检出率５１．９％（１４／２７），抗－ＨＣＶ阴性组为１３．６％（３／２２），两组有显著性差异（Ｐ〈０．０１），以慢性重症肝炎和肝硬化患者     

福州市乙肝病毒基因型和基因亚型的分布及其与前C、C基因启动子变异的关系

目的 研究福州市乙肝病毒基因型和亚型分布及其与T1762/A1764、A1896变异的关系,为完善预防、诊断、治疗病毒感染的策略和方法提供科学依据. 方法 应用型特异性引物PCR法检测HBsAg阳性血清的基因型,应用PCR-RFLP方法检测基因亚型、T1762/A1764变异和A1896变异. 结果 282份HBsAg阳性血清样品中103份未能成功分型,其余179份样品中B基因型122份(68.2%),C基因型54份(30.2%),B C型3份(1.7%),未检测到其他基因型.随机选取的100份B基因型样品中,Ba亚型71份(71.0%),Bj亚型8份(8.0%),未能分亚型者21份(21.0%).54份C基因型样品中Ce亚型 31份(57.4%),Cs亚型 14份(25.9%),Ce Cs 1份(1.9%),未能分亚型者8份(14.8%).T1762/A1764变异标本9份(8.7%),Ce亚型变异率最高(29.2%),Ba亚型次之(3.3%),Cs和Bj亚型未检测到变异株,T1762/A1764变异在不同基因型和亚型间的分布差异有统计学意义(P＜0.05).A1896变异标本10份(10.0%),Ba亚型变异率最高(14.0%),Cs亚型次之(10.0%),Ce亚型最低(4.0%),不同基因型和亚型中的变异差异无统计学意义(P＞0.05).HBeAg阳性和阴性样品中的基因型和亚型分布差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 福州市乙肝病毒以B、C基因型为主,Ba、Ce亚型占优势,HBV各基因型和亚型发生T1762/A1764、A1896变异的模式不同.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎90例

目的:观察拉米夫定对血清HBsAg、HBeAg、HBV DNA阳性的慢性乙型肝炎患者的疗效。方法:180例HBsAg、HBeAg、HBV DNA阳性的慢性乙型肝炎患者随机分成对照组(90例)和治疗组(90例)。对照组采用一般保肝、降酶综合治疗;治疗组在对照组综合治疗基础上每日口服拉米夫定100mg,疗程1年。结果:对照组、治疗组患者ALT复常率分别为77例(85.6％)、79例(87.8％),两组差异无显著性意义(P>0.05)。对照组7例(7.8％)血清HBV DNA阴转,5例(5.6％)血清HBeAg阴转,2例(2.2％)出现HBeAg/抗-HBe血清转换;治疗组78例(86.7％)血清HBV DNA阴转,64例(71.1％)血清HBeAg阴转,44例(48.9％)出现HBeAg/抗-HBe血清转换;两组差异有非常显著性意义(P<0.005～P<0.001)。结论:拉米夫定能有效抑制HBV DNA复制,促使患者HBeAg转阴、HBBeAg/抗-HBe血清转换;但也有部分病例治疗无效和出现YMDD病毒变异。     

Polymorphisms of microsomal triglyceride transfer protein in different hepatitis B virus-infected patients

AIM： To identify the two polymorphisms of microsomal triglyceride transfer protein （MTP） gene in the Chinese population and to explore their correlation with both hepatitis B virus （HBV） self-limited infection and persistent infection.
METHODS： A total of 316 subjects with self-limited HBV infection and 316 patients with persistent HBV infection （195 subjects without familial history）, matched with age and sex, from the Chinese Han population were enrolled in this study. Polymorphisms of MTP at the promoter region -493 and at H297Q were determined by the allele specific polymerase chain reaction （PCR）.
RESULTS： The ratio of males to females was 2.13：1 for each group and the average age in the self-limited and chronic infection groups was 38.36 and 38.28 years, respectively. None of the allelic distributions deviated significantly from that predicted by the Hardy-Weinberg equilibrium. There was a linkage disequilibrium between H297Q and -493G/T （D＇ = 0.77）. As the χ^2 test was used, the genotype distribution of MTP-493G/T demonstrated a significant difference between the self-limited infection group and the entire chronic group or the chronic patients with no family history （χ^2 = 8.543, P = 0.015 and χ^2 = 7.199, P = 0.019）. The allele distribution at the MTP-493 position also demonstrated a significant difference between the study groups without family history （χ^2 = 6.212, P = 0.013）. The T allele emerged as a possible protective factor which may influence the outcomes of HBV infection （OR： 0.59; 95% CI： 0.389-0.897）. CONCLUSION： The polymorphism of the MTP gene, T allele at -493, may be involved in determining the HBV infection outcomes, of which the mechanism needs to be further investigated.     

丙型肝炎病毒核心蛋白细胞内信号传导途径的探讨

目的：研究丙型肝炎病毒核心蛋白致病作用的细胞内信号传导途径（STPs)。方法：在前期工作已证实HCV核心蛋白激活NF－κB介导的细胞内STPs这一结论的基础上，对核心蛋白活化NF－κB的机制和作用位点进行了测定。用0．4μg pCXN2-core与pNF-κB共转染Hela细胞3h后分别加入5mmol IKKβ的抑制剂乙酰水杨酸和25μmol消炎痛（作为对照）各0．5ml，继续转染33h，测定荧光素酶比活性，以此检测乙酰水杨酸对NF－κB介导的STPs的抑制作用。以pCXN2-core转染Cos-7细胞36h，收获细胞溶解液，用Western印迹分析检测IκBα表达，确定IκBα的降解情况。用pCXN2-core、pMEKKΔ（表达非活性MEKK的质粒）、pNF-κB共转Hela细胞36h，测定荧光素酶比活性，确定HCV核心蛋白是否通过MEKK活化NF－κB介导的STPs。结果：（1）HCV核心蛋白活化NF－κB介导的STPs被乙酰水杨酸抑制；（2）pCXN2-core转染后的细胞溶 解液中IκBα的量较pCXN2转染后的少；（3）HCV核心蛋白活化NF－κB介导的STPs的作用不被MEKKΔ阻断。结论：（1）乙酰水杨酸通过抑制KK的IκBα磷酸化作用，抑制IκB降解，阻断NF－κB的活化，表明核心蛋白作用位点可能在IKK或其上游某个部位；（2）在表达HCV核心蛋白的细胞存在IκBα降解的增加，造成NF－κB的活化；（3）核心蛋白的作用位点处于MEKK作用点下游。（4）HCV核心蛋白可能的细胞内信号传导途径是：HCV核心蛋白直接作用于IKK→IKK磷酸化IκBα→IκBα降解→NF－κB脱离抑制从胞浆转入胞核，与DNA结合发挥作用。     

DHBV诱发鸭急性肝坏死发病机制的实验研究

ＤＨＢＶ诱发鸭急性肝坏死发病机制的实验研究谢青，郭清，周霞秋，李惠英，朴文姬，谷瑞瑛，丁长囡，李定国鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）与人乙型肝炎病毒同属嗜肝ＤＮＡ病毒科，它们具有类似的生物性、免疫原性和致病性。在大肠杆菌内毒素ＬＰＳ（Ｏ５５Ｂ５）的诱导下，...