细胞周期蛋白与白血病

细胞增殖周期调控异常与肿瘤细胞的恶性增殖关系密切，细胞周期蛋白作为一种调节细胞周期活动的重要蛋白，与白血病的发生发展有一定关系，其中细胞周期蛋白A、B1、D、E与白血病关系较密切。对细胞周期蛋白在白血病中作用的研究，有助于判断预后，并可为多靶点治疗白血病提供理论依据及技术基础。     

p53及细胞周期素D1在子宫内膜癌中的表达及意义

目的　探讨 p5 3及细胞周期素D1(cyclinD1)在子宫内膜癌中的表达及其临床意义。方法　 1998～2 0 0 2年采用免疫组化LSAB法检测 4 2例子宫内膜癌中 p5 3、cyclinD1的表达。结果　 4 2例子宫内膜癌中 19例p5 3表达阳性 ,占 4 5 2 % ,p5 3与子宫内膜癌的细胞分级、肌层浸润深度有关 ( P<0 0 5 )。 17例子宫内膜癌cyclinD1表达阳性 ,占 4 0 5 % ,cyclinD1与子宫内膜癌的细胞分级、临床分期、淋巴结转移有关 (P <0 0 5 )。p5 3、cyclinD1协同表达 15例 ,均为晚期或低分化癌。结论　p5 3、cyclinD1作为细胞周期调节因子参与子宫内膜癌的发生、发展 ,其协同作用促进子宫内膜癌的发展、且预后不良     

LHRH拮抗剂Cetrorelix对子宫内膜癌细胞生长周期的影响及其机理

目的 :研究LHRH拮抗剂Cetrorelix对子宫内膜癌细胞生长周期及周期相关蛋白的影响 ,探讨其抑制内膜癌细胞生长的机理。方法 :用流式细胞仪细胞周期分析及Westernblotting蛋白分析法 ,研究在Cetrorelix的作用下子宫内膜癌细胞系HEC 1A细胞生长周期及相关周期蛋白的改变。结果 :1 0 -5mol/LCetrorelix可导致HEC 1A细胞生长停滞于G2 /M期 ,而与G2 /M期停滞相关的p5 3 ,磷酸化p5 3 (phospho p5 3 ) (丝氨酸 3 92 )及磷酸化cdc2 (phospho cdc2 ) (酪氨酸 1 5 )蛋白水平均显著增高。结论 :Cetrorelix抑制内膜癌细胞增殖作用的机理是结合细胞表面受体后引起一系列抑制性信号传递 ,导致细胞周期停滞于G2 /M期 ,主要表现为G2 期停滞。其中p5 3激活及cdc2磷酸化失活是引起细胞周期停滞的重要因素     

细胞周期素D1与p53蛋白在卵巢上皮性肿瘤的表达及意义

目的　探讨细胞周期素D1(CyclinD1)与 p5 3蛋白在卵巢上皮性肿瘤的表达及意义。 方法　 1990～1995年应用免疫组化法对 4 0例恶性卵巢上皮性肿瘤及 2 0例良性卵巢上皮性肿瘤组织进行CyclinD1与 p5 3蛋白检测。结果　良性卵巢上皮性肿瘤CyclinD1阳性表达为 10 0 % ,而恶性卵巢上皮性肿瘤CyclinD1阳性表达为37 5 %。良性卵巢上皮性肿瘤p5 3阳性表达为 15 0 % ,恶性卵巢上皮肿瘤 p5 3阳性表达为 4 7 5 %。CyclinD1在卵巢上皮癌G1与G2 、G3 中的阳性表达统计学差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,p5 3蛋白在早期卵巢上皮癌与晚期卵巢上皮癌组织中的阳性表达 ,统计学差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,p5 3蛋白的阳性表达在卵巢癌G1与G2 、G3 比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。CyclinD1过表达的细胞同时也有 p5 3的过表达。 结论　CyclinD1与 p5 3蛋白在卵巢上皮性肿瘤的共同表达可能是促进卵巢上皮性肿瘤发展的因素。     

Effect of lonizing Radiation on the Expression of p16,CyclinD1 and CDK4 in Mouse Thymocytes and Splenocytes

OBJECTIVE: To investigate the effect of ionizing radiation on the expression of p16, CyclinD1, and CDK4 in mouse thymocytes and splenocytes. METHODS: Fluorescent staining and flow cytometry analysis were employed for the measurement of protein expression. RESULTS: In time course experiments, it was found that the expression of p16 protein was significantly increased at 8, 24, and 48 h for thymocytes (P < 0.05, P < 0.01, and P < 0.05, respectively) and at 24 h for splenocytes (P < 0.05) after whole body irradiation (WBI) with 2.0 Gy X-rays. However, the expression of CDK4 protein was significantly decreased from 8 h to 24 h for thymocytes (P < 0.05-P < 0.01) and from 8 h to 72 h for splenocytes (P < 0.05-P < 0.01). In dose effect experiments, it was found that the expression of p16 protein in thymocytes and splenocytes was significantly increased at 24 h after WBI with 1.0, 2.0, and 4.0 Gy (P < 0.05-P < 0.01), whereas the expression of CDK4 protein was significantly decreased with 2.0 Gy for thymocytes (P < 0.05) and 0.5-6.0 Gy for splenocytes (P < 0.05-P < 0.01). Results also showed that the expression of CyclinD1 protein decreased markedly in both thymocytes and splenocytes after exposure. CONCLUSION: The results indicate that the expression of p16 protein in thymocytes and splenocytes can be induced by ionizing radiation, and the p16-CyclinD1/CDK4 pathway may play an important role for G1 arrest of thymocytes induced by X-rays.     

Dynein抑制剂对卵母细胞体外成熟及cyclinB1 mRNA水平的影响

背景与目的 :胞浆Dynein(动力蛋白)做为微管负极方向的马达蛋白在细胞增殖进程中发挥重要作用。本实验采用原钒酸钠特异抑制Dynein生物活性后,观察卵母细胞体外培养成熟率和cyclinB1基因转录水平变化 ,探讨Dynein功能异常对卵母细胞成熟分裂进程的影响及相关机制。材料与方法 :应用卵母细胞体外培养成熟技术、半定量RT_PCR和单细胞RT_PCR方法 ,分别检测加入Dynein抑制剂前后卵母细胞成熟率和cyclinB1基因转录水平的变化。结果 :12h量效实验结果证实 ,不同浓度原钒酸钠作用后 ,5μmol/L原钒酸钠即可明显降低小鼠卵母细胞成熟率 ,0～400μmol/L卵母细胞成熟率随着剂量的增加而显著减少 ;同时检测发现 ,50～500μmol/L原钒酸钠组卵母细胞cyclinB1mRNA表达呈剂量依赖性增加。时程结果表明 ,卵母细胞与400μmol/L原钒酸钠作用1h以上 ,卵母细胞成熟率明显减少 ;体外分别培养4h或8h后再放入含有原钒酸钠培养基中培养至12h ,仍可明显抑制卵母细胞第一极体排放。400μmol/L原钒酸钠作用后 ,卵母细胞内cyclinB1mRNA时程表达水平与对照组相比...     

金喜素诱导人肝癌HCC7721细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究

目的 :研究金喜素诱导人肝癌HCC772 1细胞的凋亡作用。方法 :采用MTT法测定金喜素对人肝癌HCC772 1细胞的杀伤作用 ;通过电镜观察细胞形态变化 ;琼脂糖凝胶电泳检测断裂DNA ;流式细胞仪分析DNA含量及细胞周期。结果 :经0 3 μmol/L金喜素处理 6、12、2 4及 3 6h ,HCC772 1细胞的存活率与对照组相比 ,逐渐降至 ( 83± 16) %、( 69± 10 ) %、( 5 2±13 ) %和 ( 3 0± 11) % ,低于对照组 ,P <0 0 5 ;靶细胞出现细胞固缩、染色质凝聚和边集 ;产生梯状DNA并检测到亚二倍体峰(凋亡峰 ) ;同时 ,G0 /G1期细胞增多 ,S期细胞减少。结论 :金喜素可抑制人肝癌HCC772 1细胞增殖 ,使细胞阻滞在G0 /G1期 ,进一步诱导细胞凋亡。     

EGCG干预LMP1激活的AP-1信号转导通路

目的　探讨EGCG对鼻咽癌细胞激活蛋白 1(AP 1)信号转导通路的干预作用 ,阐明在鼻咽癌细胞中茶多酚干预EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)活化的AP 1信号转导通路中靶分子的机制。方法　采用EB病毒阴性及阳性的鼻咽癌细胞系CNE1和CNE1 LMP1细胞。利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察EGCG对CNE1和CNE1 LMP1细胞的生存率的影响。采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对AP 1活性的作用。利用间接免疫荧光法观察EGCG对JNK核移位的影响 ,再分别提取CNE1和CNE1 LMP1的胞浆及胞核蛋白 ,Westernblot分析EGCG抑制JNK的核移位后 ,胞浆及胞核蛋白中JNK的变化。采用Westernblot分析EGCG对c Jun的磷酸化水平的影响。采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对cyclinD1启动子活性的影响 ,并用Westernblot分析EGCG对cyclinD1蛋白表达的作用。结果　EGCG对鼻咽癌细胞的抑制作用有剂量依赖性 ,并可抑制AP 1的活性。EGCG能抑制JNK的核移位 ,并抑制c Jun的磷酸化。EGCG对AP 1信号通路下游的靶基因cyclinD1的启动子活性及其蛋白表达都有抑制作用。结论　EGCG对信号转导通路上的AP 1、JNK、c Jun、cyclinD1多个靶点分子具有干预作用。LMP1是EB病毒这种编码的蛋白 ,因此 ,EGCG抑制与病毒相联系的信号转导通路 ,可能是EGCG抑制与病毒相关的肿瘤的分子机     

PDGF-B链基因三链形成寡核苷酸对C6胶质瘤细胞增殖和细胞周期的影响

目的观察PDGF-B链基因三链形成寡核苷酸(triplex-forming oligonucleotide,TFO)对C6胶质瘤细胞增殖和细胞周期的影响.方法应用免疫荧光流式细胞技术观察PDGF-B链基因TFO对C6胶质瘤细胞PDGF-B、PCNA表达的影响.应用流式细胞技术观察PDGF-B链基因TFO对C6胶质瘤细胞细胞周期的影响.结果 PDGF-B链基因TFO对C6胶质瘤细胞PDGF-B链基因、PCNA的表达有明显抑制作用,而且抑制作用存在浓度依赖性.PDGF-B链基因TFO能使C6胶质瘤细胞S期的百分率明显降低,阻止细胞由静止期(G0-G1期)进入(S期).结论 PDGF-B链基因TFO能够抑制C6胶质瘤细胞PDGF-B链基因的表达,阻碍细胞进入S期,降低细胞增殖能力.     

单纯加温与加温联用顺铂对人卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨单纯加温与联用顺铂(DDP)对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响.方法采用MTT法检测加温及加温联合DDP对卵巢癌DDP敏感细胞系skov3和DDP耐药细胞系SK-OV-3细胞增殖的抑制效应,分析加温与DDP在抑制卵巢癌细胞增殖中的相互作用;采用TUNEL和流式细胞术分析加温及加温联合DDP对卵巢癌细胞周期和凋亡的影响,探讨热化疗的作用机制.结果 42℃以上加温可显著抑制卵巢癌DDP敏感和耐药细胞系细胞增殖(P<0.001),且与加热温度和时间之间存在剂量效应关系.加热与DDP在抑制卵巢癌细胞增殖上表现为相加或协同作用,在skov3细胞系以相加作用(0.85≤q≤1.15)为主,而在SK-OV-3细胞系则主要表现为协同作用(q>1.15).加温可诱导卵巢癌细胞凋亡,并降低S期细胞比率和增加G0/G1期细胞比率.加温与DDP在诱导skov3细胞凋亡上表现为相加作用(0.85≤q≤1.15).41～42℃、30～90分钟加温与2.5 μg/ml DDP可协同诱导SK-OV-3细胞凋亡(q>1.15).结论热诱导肿瘤细胞凋亡并将细胞阻滞于G0/G1期是热疗杀伤卵巢癌细胞的重要机制.加温与DDP在诱导卵巢癌细胞凋亡和抑制细胞增殖等作用上具有相加或协同效应.