用两株McAb及BA—ELISA法检测肺癌患者血清中肺癌相关抗原

肿瘤患者血清中肿瘤相关抗原含量甚微,通常需要高度敏感的测定系统方能进行检测.生物素-亲和素系统(BSA)是近年来建立的一种生物反应放大系统,由于BSA亲合力高、特异性强反应迅速,故自70年代后期引入免疫技术以来,大大改善和丰富了免疫学试验,成为新的检测系统.本实验用生物素标记两株抗人肺癌McAb——Lc86aE4和Lc86aC5,建立了BA-ELISA方法,并对肺癌患者血清中肺癌相关抗原(lung carcinoma associated antigen,LAA)进行了检测,证实BA-ELISA法具有特异、敏感及重复性好等优点.     

ELISA法检测可溶性人类白细胞抗原—I及广东人参考值的测定

OBJECTIVE: To explore a method for quantitative detection of soluble human leukocyte antigen class I(HLA-I) antigens, with the assistance of which we attempt to define the reference value of the antigen in the population of Guangdong Province. METHODS: Sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was employed with W6/32 monoclonal antibody serving as the solid phase antibody and beta2 microglobulin antibody as the first antibody. HRP-labeled second antibody and the substrate were added for enzyme-catalyzed coloring. On the basis of the standard curve obtained by sHLA-I standard reagent in serial dilution, the concentration of sHLA-I antigens in the samples of 60 normal subjects from the population of Guangdong province was detected. RESULTS: The sensitivity of this assay was 2.84 ng/ml with variation coefficients of 5.80% within the same batch and 9.00% between batches. The recovery rate ranged from 98.57% to 100.15%. The level of sHLA-I antigens in normal individuals was 699.54+/-360.10 ng/ml. CONCLUSION: Sandwich ELISA is sensitive, specific and stable in the detection of sHLA-I.     

大黄(庶/虫)虫丸对难治性肾病综合征Ⅷ因子抗原及纤维蛋白原的影响

目的:探讨大黄(庶/虫)虫丸对特发性膜性肾炎(MGN)肾病综合征(NS)Ⅷ因子抗原(ⅧR:Ag)、纤维蛋白原(Fbg)的作用.方法:选择MGN-NS患者60例,用美国IL公司生产ACT-200自动凝血机检测ⅧR:Ag、Fbg的变化.并随机分为治疗组和对照组,治疗组用大黄(庶/虫)虫丸,对照组用潘生丁干预治疗.观察大黄(庶/虫)虫丸对MGN-NS患者血ⅧR:Ag、Fbg的影响.结果:实验组ⅧR:Ag、Fbg水平较正常对照组显著增高(P＜0.001),ⅧR:Ag、Fbg与BUN呈显著正相关(P＜0.001),Fbg与白蛋白(ALB)呈显著负相关(P＜0.01).经用大黄(庶/虫)虫丸治疗后,MGN-NS患者血ⅧR:Ag、Fbg显著降低(P＜0.01,P＜0.05),明显优于潘生丁(P＜0.05).结论:大黄(庶/虫)虫丸能显著降低MGN-NS患者ⅧR:Ag、Fbg含量,改善高凝状态.     

日本血吸虫成虫67kD蛋白的分离与鉴定

目的 :分离日本血吸虫感染及免疫血清识别的成虫抗原 (AWA)中的特异蛋白带 ,为血吸虫病免疫诊断提供新的抗原分子。方法 :免疫印迹法分析AWA的特异蛋白带 ,电泳层析法分离靶抗原。结果 :获得了感染血清和免疫血清识别的 6 7kD蛋白。结论 :电泳层析法是一种分离血吸虫抗原的有效方法     

游离和前列腺特异性抗原相互关系及临床应用

目的　评价总前列腺特异性抗原 (tPSA)、游离前列腺特异性抗原 (fPSA)及百分率 (f/tPSA % )检测前列腺癌 (PCa)的相关性及临床价值。方法　用酶免法测定 35例PCa及 73例良性前列腺增生 (BPH)患者血清tPSA水平 ,4tPSA <10ng/ml患者另测其fPSA ,计算f/tPSA(% )。 结果　血清tPSA <4、4～ 10、>10ng/ml者发现PCa的比例组间相比均有统计学意义。 4～ 10ng/ml组 ,PCa和BPH者f/tPSA(% )分别是 9.1± 4.8、16 .4± 6 .1,差别有显著意义 (P <0 .0 1)。结论　tPSA仍是PCa筛查的有效瘤标 ,tPSA低水平时 ,f/tPSA(% )检测PCa则更为灵敏精确。     

斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗原蛋白组成及活性成份

采用8M尿素和简化方法分离、提取斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗 原(PsAWU),并对该抗原和水溶性抗原(PsAWA)的血清学特性进行了分析比较,结果表明PsAIVU的敏感性高于PsAWA,初步证明具一定的特异性,是一种可实际应用的新型抗原。为进一步分析两种抗原,对其蛋白组成及活性成份进行了初步研究。 氨基酸组成的分析 两种抗原浓度均为1 mg/ml,用稀盐酸加热处理后,以氨基酸分析仪(Beckman公司)进行测定。结果表明两种抗原的氨基酸种类基本一致,但绝大     

钙粘附蛋白在子宫内膜及蜕膜的表达

目的：分析钙粘附蛋白（cadherin)在月经周期各阶段子宫内膜和蜕膜中的表达及其免疫组化染色特点。方法：应用特异性单克隆抗体，SABC免疫组化技术，采用微波缓冲液抗原修复和复合消化液修复法，检测45例月经周期不同阶段的子宫及早期妊娠蜕膜中上皮型钙粘附蛋白（E－cadherin)的表达。结果：子宫内膜腺上皮各阶段均见E－cadherin的表达，但在植入窗期表达最高，分泌晚期及早孕蜕膜表达降低。间质细胞仅在早孕蜕膜有少量表达。微波修复法阳性率明显较复合消化液法高。结论：钙粘附蛋白在子宫内膜植入窗期表达增高可能与胚泡粘附及植入过程有重要关系。检测该抗原宜采用微波抗原修复法。     

紫外线照射前后日本血吸虫尾蚴抗原的初步分析

目的：探讨日本血吸虫尾蚴经紫外线（UV）照射后抗原成分的改变。方法：日本血吸虫尾蚴经UV（400uW/cm^2)照射1min后，取其可溶性抗原经照射尾蚴抗原（UVCA）与未经照射的尾蚴可溶性抗原（NCA）同步进行SDS－PAGE和免疫印迹试验。结果：经UV照射后，日本血吸虫尾缦新出现了Mr212000和82000抗原带，Mr116000,26000和16000抗原带浓度明显升高，NCA的M，67000分子仅能被UVCA免疫猪血清识别，而不能被感染猪血清识别，Mr79000和94000与免疫猪血清的反应也明显强于感染猪血清，结论：UV照射后新出现或含量增加的抗原成分以及仅免疫猪血清所别的抗原分子可能是照射尾蚴激发高度保护性免疫的主要因素。