癌基因c-myc和n-ras在妊娠滋养细胞疾病中表达的研究

为研究癌基因c-myc和n-ras在妊娠滋养细胞疾病(GTD)发生、发展中的作用,用地高辛标记的c-myc、n-ras裸核探针与54例石蜡包埋的GTD组织进行原位杂交.结果显示c-myc mRNA在葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌组织中阳性表达率分别为44.4%、55.6%和83.3%,绒癌c-myc阳性表达率高于葡萄胎(P＜0.05).n-ras mRNA在葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌组织中阳性表达率分别为88.9%、77.8%和44.4%,绒癌n-ras阳性表达率显著低于葡萄胎(P＜0.01)和侵蚀性葡萄胎(P＜0.05).Ⅲ～Ⅳ期妊娠滋养细胞瘤(GTT)组织中c-myc阳性表达率为90.9%,高于I期的45.5%(P＜0.05).c-myc和n-ras基因在GTT组织中共同表达率为47.2%.结果提示c-myc基因与GTD病变的发展及GTT临床分期有关,n-ras基因可能为GTT发生的早期事件,c-myc和n-ras基因在GTD癌变过程中起协同作用.     

原位杂交技术检测增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸对BIU-87细胞体外增殖的影响

运用原位杂交技术检测脂质体介导增殖细胞核抗原(PCNA)反义寡脱氧核苷酸抑制人膀胱癌细胞BIU-87PCNA mRNA的表达水平.结果表明脂质体介导PCNA反义寡脱氧核苷酸处理组中BIU-87细胞PCNA mRNA的表达水平明显低于对照组.结果提示脂质体介导PCNA反义寡脱氧核苷酸可抑制人膀胱癌细胞BIU-87体外增殖活性,其抑制作用可通过阻断PCNA蛋白表达来实现.     

肠道淋巴瘤与EB病毒相关性研究

目的：探讨EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV)感染在肠道淋巴瘤发病中的意义。方法：采用EBV的DNA原位杂交及S－P法免疫组化技术（第一抗体为EBV、CD3、CD20、CD43、CD45、CD45RO、CD74等），观察24例肠道淋巴瘤患者（8例肠病相关T细胞淋巴瘤、16例黏膜相关淋巴组织B细胞淋巴瘤）EBV感染情况。以20例慢性结肠炎作为对照。结果：患者年龄21－92岁（平均52．8岁），男女之比为3．8：1。临床上均以腹痛、腹胀或便血就诊。组织病理学：T细胞淋巴瘤细胞多形性、核大，不规则，嗜血管性及大片坏死；B细胞淋巴瘤细胞中等大小，多呈圆形、椭圆形、胞质较少淡染，核稍大，核分裂象多见，可见“淋巴上皮病变”。24例淋巴瘤中检出（原位杂交及免疫组化）EBV－DNA 14例（检出率为58．3％），其中T细胞淋巴瘤EBV的检出率为75％，B细胞淋巴瘤EBV的检出率为50％（P＜0．01）。结论：肠道淋巴瘤的发生与EBV的感染有明显的相关性。     

用非同位素原位杂交组化在光镜和电镜水平观察前阿黑皮素mRNA在垂体的分布

用地高辛标记反意前阿黑皮素(pro-opiomelanocortin,POMC)cRNA探针原位杂交组化在光镜和电镜水平观察了POMC mRNA在大鼠垂体的分布,并比较了碱性磷酸酶(AKP)显色系统和辣根过氧化酶(HRP)显色系统在光镜水平上的敏感性.结果:POMC mRNA广泛地分布于垂体的中间叶和前叶.中间叶全部细胞均为POMC mRNA阳性.前叶中除前叶的腹侧缘和前叶与中间叶交界处阳性细胞较少外,都有较多的POMC mRNA阳性细胞分布.AKP显色系统比HRP显色系统敏感.在电镜水平,POMC mRNA主要分布于粗面内质网,少数分泌颗粒可能呈阳性反应,胞核未见阳性反应沉淀.文内还就阳性分泌颗粒在调节细胞合成功能方面可能起的作用进行了讨论.     

地高辛素标记探针原位杂交法检测肝组织中丙型肝炎…

以国外引进的含丙型肝炎病毒ｃＤＮＡ的质粒ＤＮＡ为模板，应用地高辛素作为标记物，经聚合酶链反应制备探针，建立原位杂交方法，对４１例石蜡包埋肝组织进行ＨＣＶ，ＲＮＡ测定。探针标记的ＨＣＶ基因片段位于５‘非编码区，其长度为２２１ｂｐ。结果：抗ＨＣＶ阳性组的ＨＣＶ ＲＮＡ阳性检出率为５６．５％，抗－ＨＣＶ阴性组为１６．７％。     

大鼠延髓内含前-原脑啡肽mRNA、甲硫氨酸-脑啡肽和亮氨酸-脑啡肽神经元的分布

应用原位杂交和免疫组织化学方法,对成年大鼠延髓内含前-原脑啡肽(PPE)mRNA和甲硫氨酸-脑啡肽(M-ENK)与亮氨酸-脑啡肽(L-ENK)免疫反应神经元进行观察。结果表明:含PPEmRNA的神经元胞体,多数分布在孤束核、腹外侧区以及两者之间的网状结构等形成的一条从背内侧到腹外侧区的弧形带内。M-ENK与L-ENK样免疫反应阳性结构(神经元胞体、纤维和终末)也主要密集分布在该带内。本结果对ENK(M-ENK和L-ENK)参与延髓内脏功能活动的调控过程,提供了进一步的形态学证据。     

Heymann肾炎致病原受体相关蛋白cDNA分子克隆及其mRNA在肾小球上皮细胞的表达

Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎是一种用于人类膜性肾病的自身免疫病模型。ｇｐ３３０糖蛋白和４４ｋＤ受体相关蛋白（ＲＡＰ组成Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎抗原复合物（ＨＮＡＣ），被证明是ＨＮ的主要致病原。本研究中，我们用ＲＴ－ＰＣＲ技术，克隆了ＲＡＰ基因，用Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ技术克隆了ＲＡＰ羧基端１１８个氨基酸的基因，ＤＮＡ序列分析克隆基因与ＲＡＰ相同，原位杂交发现ＲＡＰｍＲＮＡ在肾小球上皮细胞表达。     

补肾中药对老年大鼠脑组织中胆碱能M受体分布的影响

采用受体放射配基结合分析、原位杂交和放射自显影术等方法,研究胆碱能M受体、M1受体mRNA在脑组织中的分布,观察补肾中药对胆碱能M受体的含量、功能及分布的影响,探讨补肾中药延缓脑组织衰老的机理.结果显示:老年大鼠大脑皮层、海马、纹状体中M受体明显减少,放射自显影的灰度值降低,胆碱能M1受体mRNA在老年大鼠纹状体部位的表达减少,在其他部位的不明显.补肾中药明显增加老年大鼠胆碱能M受体的数量,对脑内胆碱能M1受体mRNA转录水平降低的部位有改善作用.补肾中药可通过改善胆碱能M1受体的mRNA表达、增加脑内胆碱能M1受体数量来延缓脑组织衰老.     

地塞米松对体外不同密度嗜酸性粒细胞凋亡及Fas mRNA表达的影响

哮喘患者低密度嗜酸性粒细胞(Eos)被认为是活化了的Eos。地塞米松(DM)对不同密度Eos凋亡的影响，研究很少。本研究用DM干预哮喘豚鼠体外不同密度的Eos，以原位杂交方法观察Fas mRNA的表达，TUNEL法检测Eos凋亡，以了解DM促进不同密度Eos凋亡的机制。     

青年及老年大鼠下丘脑弓状核阿黑皮素原mRNA的表达

目的：观察青年和老年期大鼠下丘脑弓状核阿黑皮素原mRNA（POMC mRNA）的表达水平。方法应用原位杂交技术显示POMCmRNA和用计算机图像分析观察杂交信号的强弱及阳性细胞的面积,结果：与青年组相比,老年组下丘脑弓状核及其附近区域POMCmRNA阳性神经元的灰度下降,POMCmRNA阳性神经元的数目无明显变化,结论：老年期POMCmRNA阳性神经元相应的mRNA表达水平下降可能是下丘脑的POMC基因衍生肽表达水平下降的原因之一。