基因芯片对PMA激活的血管内皮细胞早期反应基因的研究

目的 :用基因芯片研究 PMA激活的血管内皮细胞的早期反应基因 (imm ediate early response gene,ERG)。方法 :以包含 40 96条人类基因的 DNA芯片检测血管内皮细胞受代谢增强剂 PMA(phorbol myristate acetate)激活后早期的基因表达谱 ,并从中筛查出 ERG。结果 :血管内皮细胞受 PMA作用 6 h后 ,17条基因上调 ,11条下调。数据处理聚类分析表明 17条上调基因中多数 (13/ 17)属蛋白质磷酸酶和转录调控因子基因 ,而下调基因中多数 (9/ 11)为细胞分裂相关基因。结论 :证明PMA激活的人血管内皮细胞早期反应基因主要是转录调控因子和蛋白质磷酸酶基因。     

Effect of advanced glycosylation end products on activity of protein kinase C in human peripheral blood mononuclear cells

Objectives To investigate the effect of advanced glycosylation end products (AGEs) on the a ctivity of protein kinase C (PKC) in human peripheral blood mononuclear cells (P BMC) and to observe whether aminoguanidine (AG) can influence the effect of AGEs .Methods After PBMC were isolated from human peripheral blood and incubated with differen t concentrations of AGEs-BSA for various periods, total PKC activity in PBMC wa s determined by measuring the incorporation of (32)P from ［γ-(32) P］ ATP into a special substrate using Promega PKC assay kit.Results AGEs-BSA increased the total PKC activity in PBMC from 83.43±6.57 pmol/min/ mg protein to 116.8±13.82 pmol/min/mg protein with a peak at 15 min. AGEs -BSA also increased the total PKC activity in a concentration-dependent manner fro m 83.1±6.4 pmol/min/mg protein (control) to 119.1±13.3 pmol/min/mg prote in (control vs AGEs-BSA 400 mg/L, P<0.01).Furthermore, AGEs-BSA induc ed an elevation of PKC activity in a glycosylating time-related manner, from 80 .9±8.2 (control) to 118.3±11.5 pmol/min/mg protein (glycosylation for 12 wk, P<0.01).The total PKC activity stimulated by AGEs-BSA pretreated wi th AG (100, 200 mg/L) was markedly lower than that of AGEs-BSA group not pretr eated with AG (P<0.05, P<0.01).Conclusions AGEs-BSA increased the total PKC activity in PBMC in a concentration and incuba tion time dependent manner. The ability of AGEs-BSA to stimulate PKC activity was markedly decreased by pretreatment of AGEs-BSA with AG.     

Role of p38 protein kinase in heat-induced Raw cells apoptosis

Ａｆｔｅｒｃｅｌｌｓａｒｅｅｘｐｏｓｅｄｔｏａｓｔｒｅｓｓｉｎｇａｇｅｎｔ,ｃｅｌｌｄｅａｔｈｃａｎｂｅｏｂｓｅｒｖｅｄａｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ,ｎｅｃｒｏｓｉｓａｎｄｍｉｔｏｔｉｃｄｅａｔｈＡｐｏｐｔｏｓｉｓｏｒｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃｃｅｌｌｄｅａｔｈ,ｉｓｕｎｄｅｒｇｅｎｅｔｉｃｃｏｎｔｒｏｌａｎｄｉｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｌｙｂｙｃｅｌｌｓｈｒｉｎｋａｇｅ,ｍａｒｇｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｈｒｏｍａｔｉｎａｎｄｎｕｃｌｅａｒｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎＧｅｎｏｍｉｃＤＮＡ…     

大肠肿瘤中细胞核形态参数和p53、PCNA表达的定量研究

目的 研究大肠肿瘤中细胞核形态参数和ｐ５３、ＰＣＮＡ定量表达的关系。方法 应用免疫组化和图像分析技术对４０例腺瘤、８０例腺癌及１５例正常粘膜细胞核形态参数和ｐ５３、ＰＣＮＡ含量进行研究。结果 腺瘤及腺癌中核面积、核周长、核平均直径均大于正常粘膜（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）,腺癌组ｐ５３及ＰＣＮＡ相对含量均高于腺瘤组（Ｐ〈０．０５）。ＰＣＮＡ表达与大肠癌的差分化有关（Ｐ〈０．０５）。核面积及核平均     

蛋白激酶C在缺血预处理大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的表达

目的 探讨蛋白激酶Ｃ在缺血预处理大鼠肾脏因再灌注损伤中的作用。方法 将大鼠随要分组,观察大鼠肾脏病理组织学变化,用免疫组织化学方法检测不没灌注时间蛋白激酶Ｃ水平。结果 预处理后缺血再灌注组病理组织学肾小管评分均低于缺血再灌注,而预处理后缺血再灌注组和对照组之间无显性差异;预处理后缺血再灌注组蛋白激酶Ｃ的表达高于缺血再灌注组,并且在再灌注２小时和６小时时,预处理后缺血再灌注组中的表达高于对照组。结     

脑胶质瘤p16基因转染对细胞生长及放射敏感性的影响

目的　探索p16基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用及p16基因与肿瘤细胞放射敏感性间的关系。方法　将外源野生型p16基因导入胶质瘤细胞株U251、C6,筛选阳性克隆。同时以空载体质粒pCDNA3为对照,免疫组化检测p16基因表达,用MTT法测定细胞生长曲线及肿瘤杀伤率。结果　转染p16基因的U251、C6细胞有外源p16基因的整合及表达,克隆形成率减少,生长速度明显减慢,对辐射的敏感性增强。结论　导入外源野生型p16基因可抑制胶质瘤细胞恶性增殖,提高胶质瘤细胞对辐射的敏感性。     

子宫内膜癌中p53基因第6,第7外显子突变及其临床意义

目的 检测人子宫内膜癌中抑癌基因ｐ５３基因突变的情况并探讨其与病理特征的关系。方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性酶切片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ）技术检测４０例子宫内膜癌中ｐ５３基因第６、第７外显子的突变。结果 检出突变例,突变与病理学分级有关,与临床分期、绝经情况、组织学类型无关。结论 ｐ５３基因突变可能是了宫骨膜癌性的原因之一。     

血浆标本对Array蛋白分析仪检测结果的影响观察

目的 :研究血浆标本在ArraySystem 18种蛋白成份测定的影响。方法 :采用肝素抗凝管和一次性塑料试管对同一样本采血 ,使用同一仪器和同一试剂检测 18种蛋白含量 ,并对PAB、APA、APB、CRP、ASO 5种蛋白成分进行预处理后再行比较检测结果的差异性。结果 :血浆和血清标本的IgG、IgA、IgM、C3、C4、KAP、LAM、ALB、TRF、AAG、HPT、CER、RF的结果经配对计量资料统计处理无显著差异 (P >0 0 5 ) ,相关系数 (r)均在 0 970 0以上。而PAB、APA、APB、CRP、ASO血浆和血清检测结果有差异性 (P <0 0 1) ;但将血浆预处理后再测定其结果和血清相比无差异性 (P >0 0 5 ) ,相关系数 (r)均在 0 980 0以上。结论 :大多数蛋白测定项目可以使用血浆 ,少数特定蛋白测定项目也可将血浆行预处理后上ArraySystem进行蛋白测定。     

PSP57不是增生和癌变前列腺组织PSP94 mRNA可变剪切特有的产物

目的：比较人正常,增生和癌变前列腺组织中ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７ｍＲＮＡ的表达情况。方法：提取事故死亡的正常成年人前列腺组织及手术得到的增生和前列腺癌组织总ＲＮＡ,进行ＲＴ－ＰＣＲ,其产物分别以ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７共有的外显子及ＰＳＰ９４外显子Ⅲ作探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析;ＲＴ－ＰＣＲ产物经克隆后进行序列测定。结果：三种前列腺组织中均有ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７ｍＲＮＡ的表达;人     

肾癌组织中GST-π和p53的表达及其相关性研究

探讨胎盘型谷胱甘肽S -转移酶 (GST -π)和 p5 3蛋白在肾癌中表达的临床病理意义和相关性。方法 :应用LSAB免疫组化法对 43例肾癌GST -π和 p5 3蛋白的表达进行研究。结果 :肾癌中GST -π和p5 3蛋白的阳性率分别为 6 0 .47%和 32 .5 6 %。GST -π表达与肿瘤分化程度明显相关 ,高中分化肾癌阳性率明显高于低分化者(P <0 .0 5 )。GST -π与p5 3蛋白表达呈明显正相关 (r =0 .375 ,P <0 .0 5 ) ,p5 3蛋白阳性者中GST -π阳性率高于p5 3蛋白阴性者。结论 :GST -π异常表达可能与肾癌的发生、发展及其化疗耐药性有关。检测GST -π表达对预测肾癌多药耐药、化疗疗效有一定的价值。