肝细胞癌患者血清外泌体mRNA表达谱及临床意义分析

背景与目的:外泌体是包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡,其中肿瘤细胞分泌的外泌体中的mRNA携带了大量肿瘤细胞遗传信息,因此对外泌体中特异性mRNA的分析,有望找到肿瘤诊断的新型分子标志物和治疗靶点。本研究通过高通量筛选与生物信息学方法探讨肝细胞癌(HCC)患者血清外泌体mRNA的表达特征及其潜在功能。方法:采集3例HCC患者及3例正常人的静脉血,用外泌体提取试剂盒提取血清外泌体,用Magen试剂盒提取外泌体RNA,对血清外泌体mRNA进行纯化、行反转录形成cDNA、PCR扩增、测序,最后将对所得数据质量进行评价后与参考数据进行比对,分析得到差异表达外泌体mRNA,并采用GO和KEGG通路富集分析对差异基因进行功能与通路注释。结果:与正常人比较,HCC患者有397个外泌体mRNA表达上调,192个外泌体mRNA表达下调;其中,NRGN、PF4、RGS18等17个基因表达明显上调,CXCL8、MORF4L2、SYCP1等14个基因显明显下调。GO富集分析显示,表达上调的外泌体mRNA的靶基因与蛋白质结合、蛋白质异二聚化活性、免疫系统过程的调节、胞外囊泡、细胞外细胞器、应激反应等有关,表达下调的外泌体mRNA的靶基因与嗅觉受体活性、细胞因子活性、CXCR趋化因子受体结合、中间丝、中间丝状细胞骨架等有关;KEGG通路分析显示,在上调的外泌体mRNA中,30条通路被显著富集,在下调的外泌体mRNA中9条通路被显著富集,其中,在上调的外泌体mRNA中,血小板激活、Rap 1信号通路、吞噬体、病毒致癌、肌动蛋白细胞骨架的调节与抗原处理和呈递等是最丰富和最有意义的通路;在下调的外泌体mRNA中,基础转录因子和细胞因子-细胞因子受体相互作用分别是最丰富和最有意义的通路。结论:HCC患者与正常人的血清外泌体mRNA表达特征存在较大差异,其与HCC发生、发展、转移可能密切相关,这为寻找新的诊断标志物及治疗靶点提供了依据。     

增强CT评价肝细胞癌凋亡相关蛋白表达的价值探讨

目的:探讨增强CT评价肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中凋亡相关蛋白fas,bax,bc1-2表达的价值。方法:对38例共40个经病理证实且行动、静脉双期CT增强扫描的HCC病灶进行分析,用免疫组化SP法检测癌组织中第Ⅷ因子相关抗原(FactorⅧrelated antigen,FⅧRA),fas,bax,bc1-2和bc1-x1的表达情况,并结合其病理分级将CT增强表现特征与免疫组化的结果进行对照分析。结果:fas,bax,bc1-2和bc1-x1的阳性表达率分别为20%(8/40)、25%(10/40)、27.5%(11/40)和50%(20/40),bax和bc1-2,以及bc1-2和bc1-x1之间分别具有一定的相关性(P<0.05)。bc1-x1的表达与CT显示的病灶大小、以及病理分级具有一定的关系(P<0.05),病理分级与CT显示的边界类型以及瘤内的液化坏死有关(P<0.05)。结论:fas,bax,bc1-2和bc1-x1等蛋白在HCC组织中呈现不同程度的表达,通过CT反映调亡相关蛋白表达的价值有限。     

肝细胞核因子-κB异常激活与肝细胞癌变

核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）是具有和某些基因上启动子区固定核苷酸序列结合而启动该基因转录的蛋白质。NF-κB是具有多向性调节作用的核转录因子，可调控多种基因（免疫、炎症反应、病毒和原癌基因）的转录表达。激活的NF-κB参与癌症的启动、发生及发展过程，在炎症性相关的肝癌（HCC）发生发展中呈高表达，在肝细胞炎症与癌变间起桥梁作用，其中包括肝脏免疫炎症反应相关基因、肝炎病毒相关基因和原癌基因的转录表达。在肝癌组织中异常激活，可抑制细胞凋亡，促进肝细胞存活，与肝癌的发生发展密切相关。     

腺病毒介导MDA-7/IL-24选择性杀伤肝癌 细胞HepG2的研究

目的 ：观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用，为肝癌的基因治疗提供理论基础。 方法 ：将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度;4甲基偶氮唑蓝染色法（MTT）及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用;Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检测2种细胞的凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期。 结果 ：复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2和正常细胞L02中的高效表达;细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白的表达; MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞生长并可促进肝癌细胞的凋亡;MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞于G2/M期，能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无阻滞作用和毒性作用。结论 ：复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达，促使细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡，选择性地杀伤肝癌细胞HepG2，而对正常肝细胞L02无任何毒性作用。     

外科治疗ⅢA期N2非小细胞肺癌的预后分析及临床意义

目的 探讨影响ⅢA期N2非小细胞肺癌（NSCLC）预后的因素，并分析经手术治疗不同亚组病人的生存率差异。方法 分析1997年1月至2000年1月146例手术治疗的ⅢA期N2 NSCLC病人的可能影响预后因素：病理类型、肿瘤位置、肿瘤大小、手术方式、临床N2情况，N2转移组数及个数、术后辅助治疗等，并用Kaplan-Meier曲线及Logr ank检验生存率差异，Cox单因素、多因素分析各因素对生存率的影响。结果 ⅢA期N2 NSCLC病人的3年和5年生存率分别为19．86％和14．56％。单因素分析示肿瘤位置、临床N2情况、N2转移组数及个数是影响生存率的因素；多因素分析示肿瘤大小、临床N2情况，N2转移组数和肿瘤位置影响预后。右肺下叶肿瘤单组或单个N2转移，预后最好。结论 纵隔N2转移淋巴结的大小、个数和组数是影响术后生存率主要因素。手术前未发现N2转移（mN2），有1组N2转移（N2h），N2转移数少于4个者手术治疗效果好。右肺下叶肿瘤发生单组N2淋巴结转移预后好。     

进展期胃印戒细胞癌患者的临床病理特点与预后

目的研究进展期胃印戒细胞癌患者的临床病理特点及预后.方法对571例进展期胃癌患者的临床病理特点及术后5年生存率进行回顾性分析.结果进展期胃印戒细胞癌75例,多见于中老年女性（70.0%）,胃中部多发（46.7%）.肿瘤大小、淋巴结转移、肝脏转移、腹膜转移等方面与进展期胃非印戒细胞癌相比差异无统计学意义（P＞0.05）;大体分型以BorrmannⅢ型、Ⅳ型多见（P＜0.01）,且浸润深度T3、T4比胃非印戒细胞癌多见（P＜0.01）;行根治性手术后5年生存率为44%,与其他类型进展期胃癌根治性手术后5年生存率相比差异无统计学意义（P＞0.05）.结论进展期胃印戒细胞癌与其他组织学类型的胃癌相比恶性程度无差异.     

不同病理类型原发性甲状旁腺功能亢进症临床表现的比较分析

目的 分析不同病理类型甲状旁腺功能亢进（PHPT）的临床表现特点。方法 回顾性分析1958-2005年北京协和医院收治经手术病理证实的280例PHPT患者的临床资料。按病理类型分为甲状旁腺腺瘤组208例，甲状旁腺增生组52例及甲状旁腺腺癌组20例。结果 腺癌组中男性高于另外2组（P〈0．05）。增生及腺癌组中骨畸形、骨软化比例较低，增生组骨吸收、病理性骨折比例低于腺瘤组；胃肠道症状、多饮多尿及泌尿系统病变在腺癌组中高于另外2组（P均〈0．05）。血总钙（TCa）、血游离钙离子（ICa）及24h尿Ca在腺癌组显著高于腺瘤组及增生组（P均〈0．01），在腺瘤组与增生组间差异无统计学意义（P〉0．05）。出现高钙危象的比例在腺癌组显著高于另外2组（P〈0．01）。腺癌组病灶重量高于增生组，腺瘤组病灶直径小于增生组（P均〈0．05）。结论 在本组病例中，腺癌组男性比例较高，泌尿系统病变更为多见，出现高钙危象的比例显著增高，术后复发的比例较高。增生组骨骼系统病变相对较轻，其病变甲状旁腺重量低于腺癌与腺瘤组。     

脉络丛癌

目的介绍脉络丛癌的临床病理和免疫组织化学特征。方法对1例脉络丛癌患者的临床表现、组织形态学和免疫组织化学染色结果进行分析，并结合文献对其诊断与鉴别诊断要点进行探讨。结果脉络丛癌在组织病理学上主要呈现由柱状上皮围绕毛细血管、纤维组织所形成的乳头样结构；肿瘤细胞呈异型性，可见核分裂象。免疫组织化学检测细胞角蛋白表达阳性，胶质纤维酸性蛋白、S-100蛋白以及波形蛋白呈灶性阳性反应，上皮细胞膜抗原、突触素、神经元特异性烯醇化酶以及神经微丝等均呈阴性反应；Ki-67标记指数〉20％；过碘酸雪夫染色阴性。结论脉络丛癌的诊断主要依靠组织病理学和免疫组织化学标记物检测结果，须与乳头型室管膜瘤、转移癌及乳头型脑膜瘤相鉴别。     

氧化砷对小鼠腹水型肝癌细胞的作用

目的 :研究氧化砷对移植性腹水型肝癌细胞的抗癌作用。方法 :肝癌细胞 (1 8× 10 7)接种入小鼠腹腔。对照组注射NS(0 8mL) ,余组用氧化砷 (1,2 ,3μmol/L)腹腔注射 ,每日 1次 ,共 10日。结果 :第 10天腹水细胞计数 ,1,2和 3μmol/L组瘤细胞锐减 (P <0 0 5 ) ,但第 16天腹水肿瘤细胞急骤增加。结论 :氧化砷对腹水肿瘤细胞有暂时抑制作用。     

全去带乙状结肠原位可控膀胱术25例随访报告

目的：探讨全去带乙状结肠原位可控膀胱术的临床效果。方法：对25例施行该术式术后患者的可控性、尿动力、血清电解质、肾功能、生活质量等进行随访观察。结果：25例随访2－15个月，平均11．3个月。白天完全自控排尿25例（100％）；夜间完全自控排尿24例（96．0％），1例偶有遗尿；贮尿囊容量220－370ml，平均320ml；贮尿囊内压力1．86－3．92kPa，平均2.44kPa。IVU及贮尿囊造影示单侧贮尿囊输尿管反流2例（8．0％），无肾积水；膀胱镜检查2例（8．0％）贮尿囊内出现细沙样结石，1例（4．0％）贮尿囊后尿道吻合口狭窄，经尿道直视内切开术治愈。15例（60．0％）男性患者保留性功能，肾功能正常，1例（4．0％）出现一过性高氯血症。结论：全去带乙状结肠原位可控膀胱术手术成功率高，疗效可靠，患者生活质量高，是一种较理想的尿路分流术，值得推广。