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61.
采用人胎盘血为原料,利用Sephadex G-200,DEAE-Sephadex A-50层析,Sepharose 4B反相免疫亲和层析技术,获得妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)纯品,经8.0%聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳、双向免疫扩散证明,所提取的PAPP-A纯品为单一成分。免疫家兔获得抗血清,其效价在1:16以上。 相似文献
62.
将合链霉亲和亲-蛋白A(Streptavidin-proteinA)融合蛋白基因的表达质粒pTSAPA导入大肠杆菌BL21(DE3),成功地表达了该融合蛋白,经SIJS-PAGE及免疫印迹等方法证实该蛋白既具有IgG的结合活性,又具生物素结合活性。 相似文献
63.
目的以B7-H1为靶点,研制肿瘤免疫治疗蛋白疫苗。方法将人B7-H1胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达。Ni2+-NTA亲和层析纯化蛋白,Westernblot鉴定。用纯化的rhB7-H1IgV蛋白免疫昆明小鼠,经ELISA、流式细胞术、免疫组化技术和CDC试验测定融合蛋白及其抗血清的生物学活性。结果所构建的pQE-30-TT-B7-H1IgV表达载体,能稳定表达rhB7-H1IgV蛋白,经纯化后免疫昆明小鼠,可获得高滴度抗B7-H1抗血清。经流式细胞术和免疫组化检测显示,其抗血清可与HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞结合,且在CDC试验中,可依赖补体杀伤HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞。结论rhB7-H1IgV融合蛋白不仅可引发小鼠体液免疫应答,而且其抗体还能与表达B7-H1的肿瘤细胞相结合,并介导补体依赖的体外杀伤作用。 相似文献
64.
蛋白质在超滤过程中的膜污染和膜清洗 总被引:9,自引:0,他引:9
本文选用四种不同的膜清洗剂对牛血清蛋白溶液超滤后污染的三种超滤膜进行研究,结果表明:在蛋白质的等电点取得在不同PH值下蛋白质对膜污染的最佳清洗效果,清洗效率与蛋白质的所荷电荷有关。采用适宜的清洗过程将会延长膜使用寿命和增强超滤膜性能。 相似文献
65.
目的 研究Vero细胞蛋白的过敏原性。方法 取不同剂量Vero细胞宿主细胞蛋白和裂解蛋白致敏豚鼠 ,隔日 1次 ,共 3次 ,每组 3只 ,以牛血清及生理盐水分别为阳性及阴性对照 ,末次致敏后 2 1d攻击 ,并观察攻击后的反应。结果 攻击后 30min ,10 0ng 只以上剂量组均出现过敏反应 ,且反应强度与剂量呈正相关。 2 4h各剂量组过敏反应的恢复情况各不相同。结论 Vero细胞宿主细胞蛋白及裂解蛋白均可以引起过敏反应 ,裂解蛋白的反应强度高于宿主细胞蛋白。 相似文献
66.
重组人白细胞介素-10在大肠杆菌中的表达及生物学活性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的在大肠杆菌中表达重组人白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10),并检测其生物学活性。方法将IL-10基因重组到质粒pET11c中,转化BL21(DE),提取质粒,经酶切鉴定和测序分析;在25℃用低浓度的IPTG诱导表达,对包涵体IL-10稀释复性;经ELISA检测其含量,MC/9细胞增殖法检测其生物学活性。结果工程菌IL-10/pET11c/BL21诱导表达的目的蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,Westernblot鉴定证实为IL-10蛋白,两种形式的IL-10均具有一定的生物学活性。结论已成功地在大肠杆菌中表达了IL-10,为进一步纯化和制备IL-10的基因工程药物打下了基础。 相似文献
67.
68.
69.
人血浆蛋白C的纯化与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立人血浆蛋白C的纯化与鉴定方法。方法 利用DEAE SephadexA 5 0代替氯化钡 ,对血浆进行预处理 ,再经DEAE SepharoseFF离子交换和肝素 SepharoseCL 6B亲和层析进行分离纯化 ,用活化的部分凝血活酶时间 (APTT)测定组分活性 ,非还原型SDS PAGE测定其相对分子质量 ,Westernblot鉴定其特异性。结果获得相对分子质量为 6 2 0 0 0的蛋白条带 ,此条带可与人蛋白C单克隆抗体发生特异性反应。结论 已成功地从血浆中分离到蛋白C ,为其规模化生产奠定了基础。 相似文献
70.
二乙烯基苯改性煤沥青的流变行为 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了二乙烯基苯(DVB)改性煤沥青的流变行为.采用SEM和EDAX对改性前后沥青的形貌和组成进行分析,采用旋转黏度计测试改性沥青的流变性能.研究表明:改性沥青中出现分布均匀的微纤;随着改性沥青中甲苯可溶物含量的减少,其黏性流动活化能变大;改性沥青的剪切速率越高,改性沥青的表现黏度越小. 相似文献