Gasdermin基因家族在胃癌中的表达及功能的生物信息学分析

背景与目的 Gasdermin（GSDM）家族由6个重要分子组成,主要负责调控细胞焦亡等多种生物学过程。近来不断有研究表明GSDM家族的表达失调参与多种癌症进程,然而GSDM家族成员在胃癌中的表达、预后、功能和潜在机制研究尚待阐明。本研究旨在通过生物信息学方法系统性的分析GSDM基因家族各成员在胃癌中的作用。方法 使用ONCOMINE、GEPIA2、UALCAN、Kaplan-Meier Plotter、cBioPortal、TIMER 2.0、DiseaseMeth等多个数据库对GSDM家族分子在胃癌患者中的表达差异、预后价值、功能富集、基因改变、免疫浸润相关性、甲基化改变等方面进行了综合分析。结果 GSDM家族中仅DFNA5在胃癌中明显高表达,表达水平较正常组织升高2.479倍。DFNA5在TNM 2、3、4期的表达明显升高,同时在肿瘤分级2、3级的表达明显升高。GSDM家族中仅DFNA5在胃癌中有预后价值,高表达的DFNA5提示较差的总生存期。GSDM家族中GSDMD的基因变异率最高（19%）,GSDMA、GSDMB、GSDMC次之（14%）,DFNA5（8%）和PJVK最低（6%）。在胃癌中筛选出186个GSDM相关的共表达基因,这些分子可能通过炎症细胞凋亡、趋化因子反应、急性炎症反应相关的信号通路参与胃癌进程。多数GSDM家族成员的表达与CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞、B细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、树突细胞的浸润存在不同程度的显著正相关,仅PJVK在巨噬细胞和树突细胞浸润中呈负相关。GSDMA、GSDMD在胃癌组织中处于低甲基化水平。结论 GSDM家族成员在胃癌中存在表达及功能紊乱。GSDM家族特别是DFNA5分子可能成为胃癌诊断和预后评估的重要肿瘤标志物,为开发新的胃癌治疗靶点提供思路。     

肿瘤突变负荷在胃癌中的应用研究进展

胃癌属于临床上常见的恶性肿瘤疾病之一,具有高发病率以及高致死率。近年来,免疫检查点抑制剂（ICI）在胃癌的免疫治疗中取得了重大进展。然而整体单药有效率仍较低,也常伴随不同程度的免疫相关不良反应。因此,亟需寻找准确可靠的生物标志物筛选免疫治疗的潜在获益患者。以肿瘤基因变异数目为特征的肿瘤突变负荷（TMB）显示出与ICI疗效的相关性,笔者就TMB与胃癌临床病理关系、免疫治疗效果预测及其他生物标志物关系进行综述。     

中性粒细胞胞外诱捕网与胰腺疾病的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）是近年来研究的热点,是中性粒细胞杀灭病原体的一种新的免疫机制。越来越多的研究表明,NETs参与了心血管疾病、胆结石的形成、炎症、肿瘤等疾病的病理生理过程。研究显示,NETs是急性胆源性胰腺炎（ABP）的发病机制之一、是急性胰腺炎（AP）病情进展的重要因素,也是促进胰腺癌细胞的增殖、转移、以及参与胰腺癌患者静脉血栓的形成的关键因素,笔者对此加以综述。     

铜绿假单胞菌注射液治疗甲状腺乳头状癌颈侧区淋巴结清扫术后淋巴漏的临床观察

背景与目的 淋巴漏为颈部淋巴结清扫术后常见并发症,传统治疗方法作用相对有限,而铜绿假单胞菌注射液处理创面可较好促进局部炎症反应以闭合漏点,因此本研究分析铜绿假单胞菌注射液对甲状腺乳头状癌（PTC）颈侧区淋巴结清扫术后淋巴漏患者引流量的影响及安全性,以明确铜绿假单胞菌注射液的应用价值。方法 回顾性分析2019年1月—2020年1月郑州大学第一附属医院甲状腺外科行颈侧区淋巴结清扫术后出现淋巴漏的69例PTC患者资料,依据淋巴漏治疗方式不同将其分为对照组（37例,术中常规双侧留置负压引流）、观察组（32例,在对照组治疗的基础上,术后第4、6天,通过引流管注入2支铜绿假单胞菌注射液）,比较两组术后引流量、体温变化,记录其引流时间及不良反应发生率。结果 两组术后第1、2、3天引流量比较差异无统计学意义（均P>0.05）,观察组术后第4、5、6天引流量低于对照组［（310.79±32.16）mL vs.（338.64±34.55）mL、（157.82±16.43）mL vs.（325.43±33.96）mL、（87.34±8.59）mL vs.（333.68±34.59）mL,均P<0.05］;观察组术后第6、7 天体温高于对照组［（37.78±3.77）℃ vs.（35.96±3.60）℃、（37.65±3.72）℃ vs.（35.79±3.68）℃,均P<0.05］,其他时点两组体温差异均无统计学意义（均P>0.05）;观察组引流时间明显短于对照组［（6.17±0.63）d vs.（7.28±0.75）d,P<0.01］;观察组部分患者术后2周内出现局部发热、寒战不良反应,予以物理降温后均恢复正常,观察组术后不良反应发生率高与对照组（12.50% vs. 8.11%）,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论 铜绿假单胞菌注射液治疗PTC患者颈侧区淋巴结清扫术后淋巴漏患者临床效果较好,可降低引流量,缩短引流时间,部分患者可能有体温升高、发热等现象,经对症处理后均可缓解,不影响治疗。     

三阴性乳腺癌细胞脂肪非典型钙黏蛋白4表达下调的生物学作用及机制

背景与目的 三阴性乳腺癌（TNBC）容易发生侵袭转移,恶性程度极高。笔者团队前期研究发现脂肪非典型钙黏蛋白4（FAT4）在TNBC组织中呈低表达且与预后相关,进而本研究进一步探讨FAT4对TNBC细胞生物学行为的影响,及其相关机制。方法 用qRT-PCR及Western blot检测正常人乳腺上皮细胞系（MCF-10A）及不同TNBC细胞系（BT-549、MDA-MB-231、MDA-MB-468、MDA-MB-436）中FAT4的表达水平。选择其中合适的TNBC细胞系,分别转染FAT4-shRNA（FAT4敲低组）、阴性对照序列（阴性对照组）,以未处理的TNBC细胞为空白对照组,分别采用CCK-8实验、流式细胞术、Transwell小室实验检测细胞增殖能力、凋亡率、侵袭与转移能力的变化,并用Western blot检细胞中Hippo信号通路下游靶点YAP及上皮间质转化（EMT）相关蛋白的变化。结果 与正常人乳腺上皮细胞比较,各TNBC细胞系中FAT4的mRNA与蛋白表达量均不同程度的降低（均P<0.05）。功能实验选用BT-549细胞和MDA-MB-436细胞。无论在BT-549细胞或MDA-MB-436细胞中,与空白对照组比较,FAT4敲低组在转染后24、48、72 h的增殖能力均明显升高、凋亡率明显降低、侵袭与转移能力明显增强（均P<0.05）;YAP蛋白表达量无明显变化（P>0.05）,但磷酸化YAP（p-YAP）表达量明显降低,上皮标志物E-cadherin水平明显降低,而间质标志物N-cadherin水平明显升高（均P<0.05）;阴性对照组与空白对照组间以上指标差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 FAT4表达水平在TNBC细胞中普遍降低,FAT4表达的降低能增强TNBC细胞增殖和侵袭迁移能力、减少TNBC细胞凋亡,其机制可能与FAT4降低后Hippo信号通路下游的YAP蛋白磷酸化减少,从而促进EMT进程有关。     

Spinal metastases treated with bipolar radiofrequency ablation with increased (> 70 °C) target temperature: Pain management and local tumor control

PurposeTo investigate the safety and clinical efficacy of bipolar radiofrequency ablation (b-RFA) with increased (> 70 °C) target temperature for the treatment of spine metastases with the intent of achieving pain relief or local tumor control.Materials and methodsThirty-one patients with a total of 37 metastases who were treated with b-RFA with increased temperature and vertebroplasty from January 2016 to May 2019 were retrospectively included. There were 20 women and 11 men with a mean age of 62.4 ± 10.5 (SD) years (range: 40–78 years). Patients and metastases characteristics, procedure details and clinical outcomes were analyzed.ResultsMetastases were predominantly located in lumbar (22/37; 59.5%) or thoracic spine (13/37; 35.1%). Mean target temperature was 88.4 ± 3.5 (SD) °C (range: 70–90 °C). Technical success was 100% (37/37 metastases). One (1/37; 2.7%) major complication unrelated to b-RFA was reported. One (1/37; 2.7%) metastasis was lost to follow-up. Favorable outcome was noted in patients receiving b-RFA for pain management (16/20 metastases; 80%; mean follow-up, 3.4 ± 2.9 [SD] months) or with oligometastatic/oligoprogressive disease (6/6 metastases; 100%; mean follow-up, 5.0 ± 4.6 [SD] months). In patients receiving b-RFA to prevent complications, favorable outcome was noted in 6/10 metastases (60%; mean follow-up, 3.8 ± 4.8 [SD] months).ConclusionsB-RFA with increased target temperature has an excellent safety profile and results in high rates of pain relief and local metastasis control in patients with oligometastatic/oligoprogressive disease. Suboptimal results are achieved in patients receiving b-RFA to prevent complications related to the growth of the index tumor.     

桥粒斑蛋白II在肿瘤组织中的表达

桥粒斑蛋白ＩＩ（ＤＰＩＩ）是一种新的上皮和上皮性肿瘤标记物。我们应用针对石蜡切片的抗ＤＰＩＩ单抗和抗细胞角蛋白（ＣＫ）单抗对２ｌ７例肿瘤作了免疫组织化学ＡＢＣ法染色的研究，结果：在１６３例上皮性肿瘤和双向分化的肿瘤中，１４７例表达ＤＰＩＩ，占９０．７％，９２例表达ＣＫ，占５６．４％。ＣＫ阳性染色全部位于细胞浆内，ＤＰＩＩ阳性染色则同时分布在细胞交界面上和细胞浆中。其他５４例不含桥粒的肿瘤均无ＤＰＩＩ和ＣＫ表达。结果表明，ＤＰＩＩ单抗是有用的含桥粒肿瘤的免疫组化探针。因ＤＰＩＩ不存在于一切含桥粒肿瘤，故在鉴别上皮性肿瘤时，ＤＰＩＩ单抗尚需与其他上皮标记物的抗体合并使用。     

富集CD34~ 细胞作干细胞移植的临床初步探索

目的　观察富集CD34 的造血干 /祖细胞做肿瘤患者同种异基因造血干细胞移植 (Allo HSCT)和自体移植的临床疗效。观察输注纯化CD34 细胞患者的预后情况。方法　采用磁分选临床型细胞富集仪将表面包被有CD34单抗的磁性微球体系与细胞共同培养 ,特异性结合CD34 细胞。在磁场作用下分别收集CD34 和CD34-组分。完成 2 0例患者CD34 细胞体外纯化富集。其中HLA半相合移植 5例 ,自体移植 15例。结果　纯化后CD34 细胞纯度达 97%以上 ,移植CD34 细胞中位数 5 .72 (0 .15～ 12 .0 )× 10 6,CD34 细胞中位数 3.73(2 .6～ 6 .8)× 10 4 ;CD34-细胞 (CD3、CD4、CD8、CD19)对数去除率 (Log,下同 )为 1.99～ 5 .0。 19例患者移植后随访 11个月 (中位数 ,1～ 2 0 ) ,总体生存13/ 19(例 )。本院 11例中 ,总体生存为 8/ 11(例 ) ,其中HLA半相合 1/ 3(例 ) ,自体移植 7/ 8(例 )。移植后造血重建迅速 ,随访 18个月以上无病生存者 3例中 1例为同种异基因HLA半相合亲属移植 ,2例为肿瘤自体移植。 1例父子间HLA半相合移植 ,白细胞恢复 >1× 10 9/L ,血小板 >2 0× 10 9/L(均为移植后第 13天 )。仅有短暂的I度移植物抗宿主疾病。 2例自体移植病例白细胞恢复 >1× 10 9/L(8～ 2 6d) ,血小板恢复 >2 0× 10 9/L(2 2～ 35d)。结论     

乳腺及甲状腺病变针吸细胞学AgNOR诊断价值的研究

目的 探讨核仁组成区嗜银颗粒的计数对于区别乳腺及甲状腺良恶性病变的诊断价值。方法 采用针吸细胞技术对乳腺及甲状腺病变穿刺标本进行核心仁组成区嗜银颗粒定量分析研究。结果 ４３例不同类型乳腺癌,嗜银颗粒平均值４．４０（Ｐ〈０．０１）,１２例乳腺上皮良性增生,平均值２．９０,４５例不同类型甲状腺癌,嗜银颗粒平均值３．５０（Ｐ〈０．０１）,１０例甲状腺上皮良性增生,平均值１．７７,良,恶性肿瘤细嗜银颗粒的     

The effect of TGFβ1 on murine tumor growth following direct intratumoral injection of plasmid DNA

In order to investigate TGFβ1 gene expression and its effect on murine tumor growth following direct intratumoral injection of naked plasmid DNA encoding human TGFβ1, LM₃ murine lung adenocarcinoma cells were inoculated subcutaneously to T₇₃₉ mice and grew to tumor nodules in 2 weeks. Multiple direct intratumoral injection of plasmid DNA, PMAMneo- TGFβ1, were given and compared with saline or vector plasmid administration groups. The growth of tumor was observed till the 8th week when the mice were killed for Northern blot analysis and histopathological study of tumoral tissue. The results showed that the growth of tumor was boosted in the TGFβ1 gene treated mice as compared with the control groups, whereas there was no significant difference in the metastatic behavior. Northern blot showed efficient expression of TGFβ1 mRNA in the treated group. The present study indicated that TGFβ1 may stimulate tumor growthin vivo through certain mechanisms. And direct intra-tumoral injection of nude plasmid DNA may be a promising gene transfer strategyin vivo. This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 39370761).