Typing of hepatitis B virus genomes by a simplified polymerase chain reaction

The amplification of hepatitis B virus (HBV) DNA sequences in sera for molecular epidemiology of HBV is an important application of the polymerase chain reaction (PCR) with regard to HBV. To simplify the PCR for this purpose, the optimal concentrations of SDS and detergents for carrying out the proteinase K digestion and the amplification of DNA by Taq polymerase were evaluated. It was found that by using 1% deoxycholic acid as detergent for the proteinase K step and diluting the digest 10 times before carrying out the PCR, the phenol extraction of DNA became superfluous. The sensitivity of this procedure equalled that of PCR after phenol extraction on comparable amounts of serum. Four pairs of oligonucleotide primers were compared for amplification of HBV DNA sequences in 48 sera previously subtyped with respect to hepatitis B surface antigen (HBsAg), and in eight sera with different genotypes of HBV, representing the subtypes of HBsAg P1 to P8, defined at an international meeting [Couroucé-Pauty et al.: "HBs Antigen Subtypes." Basel: Karger, 1976]. Two primer pairs, selected from conserved regions in the X and S genes of HBV, gave a positive PCR with sera harbouring all the eight different strains of HBV, resulting in DNA fragments consistent with the sizes deduced from genome sequence data. Two other primer pairs were selected in order to discriminate genotypes with regard to differences between d/y and w/r strains.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

Reactivation of precore variant hepatitis B virus in a child with severe aplastic anaemia

Reactivation of hepatitis B e antigen (HBeAg) negative chronic hepatitis B virus (HBV) infection due to selection of precore variant virus is an uncommon complication of previous hepatitis B infection, and virtually unrecognised in children and adolescents. A child who had received treatment with methylprednisolone and antilymphocyte globulin for severe aplastic anaemia developed high levels of detectable HBV DNA associated with hepatitis B e antibody (anti-HBe) positivity. HBV DNA was extracted, amplified and the core and precore regions sequenced from 2 samples. A mixture of wild-type and the precore variants A(1896) and A(1899) was detected in both samples, with the wild-type predominating in the second sample. Reinfection was excluded by phylogenetic analysis using Phylip and the neighbour-joining method. Precore variant Hepatitis B virus can be transmitted to children as a primary infection, and it is important that aggressive liver disease, particularly in the presence of the anti-HBe phenotype, be investigated. Further studies are needed to determine the frequency of these variants.     

HBV-DNA阳性育龄妇女HBV血清标志物、前S1抗原的检测分析

目的：探讨HBV—DNA阳性育龄妇女病毒复制与HBV标志物及前S1抗原的关系。方法：对1643例慢性乙型肝炎育龄妇女采用荧光定量PCR法检测血清HBV—DNA，酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBV标志物和前S1抗原。结果：HBV—DNA阳性育龄妇女432例。其中，HBsAg阴性者占19．44％，前S1抗原总阳性率55．09％，且随着HBV—DNA载量增加，前S1抗原阳性率也升高。结论：采用HBV—DNA、HBV标志物、前S1抗原联检，才能更准确提供育龄妇女HBV感染诊疗依据，有效控制HBV感染率。     

异基因造血干细胞移植后乙型病毒性肝炎防治新进展

 异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）是治愈恶性血液病的有效手段,但移植患者因接受感染乙型肝炎病毒（HBV）的移植物、免疫功能严重受损等原因,术后并发乙型病毒性肝炎的风险增加。恩替卡韦和替诺福韦是目前公认用于预防allo-HSCT后乙型病毒性肝炎的有效药物,显著减少移植后患者的肝损伤。移植后患者的免疫重建时间长且重建规律存在异质性,导致术后监测和预防性抗HBV治疗的最佳持续时间尚未能明确。本文对allo-HSCT后HBV再激活的发生机制、乙型病毒性肝炎的特点及防治的最新研究进展进行综述。     

动态研究HBV和AFB1诱发树鼠句肝细胞癌过程中一些基因的表达

目的：探讨人乙肝病毒(HBV)和黄曲霉毒素B,(AFB1)致肝细胞癌(HCC)及协同致HCC作用的机制。方法：将树鼩分为4组：A组：感染HBV加摄入AFB,;B组：只感染HBV;C组：只摄入AFB1;D组：作空白对照。然后定期行肝活检,用免疫组化、分子生物学等技术动态观察一些癌基因(蛋白)和抑癌基因的表达。结果：①A组谷胱苷肽转移酶(GGT)阳性灶个数及面积明显多于、大于B、C组;②A组P21蛋白检出率明显高于B和C组,A组6只P21蛋白阳性的树鼩到120周时全部发生了HCC;③实验后期,A组HBxAg检出率及HBVDNA整合率明显高于B组;④在诱癌过程中,IGF-Ⅱ表达率呈波动形,带癌肝的表达率显著高于无癌肝;⑤105周时,A、B、C组P53蛋白表达率显著高于D组;在A,C组检出P53异常带;⑥第45及105周时,A组c-fos表达率分别为23．1％和20％;C组为38．5％和15．4％,B,D两组均未检出;⑦H-c-myc基因：直到120周,无癌肝组织均未见异常;在肝癌组织中,A组有4例扩增,c组无异常;@CDK4基因：只有A组在第75周有1例扩增,该树鼩在第106周时发生了HCC。在HCC中,A组有25％出现CDK。扩增,C组未见异常。结论：再次证实HBV和AFB。有协同致HCC作用;AFB、有利于HBxAg的表达和HBVDNA的整合;CDK4、Kiras和P53基因的变异参与了HCC的发生和演进;P21和c-fos蛋白的过表达与P^53蛋白的失活,促进了HCC的发生和演进;CDK4和c-myc基因的改变与HBV的感染有一定的关联。     

重症乙肝患者肝、胰组织内HBsAg、HBcAg的检测及其与糖代谢异常关系的探讨

为探讨乙型肝炎病毒 (HBV)感染患者肝、胰组织中HBV检出情况及其与糖代谢异常之间的关系 ,采用免疫组化法对 2 2例重症HBV感染伴糖代谢异常患者的尸解肝、胰组织中HBsAg、HBcAg进行检测。同时用 2 2例空腹血糖正常的HBV感染者的尸解肝、胰组织作为对照。结果 :肝病伴糖代谢异常组与对照组胰腺组织内HBV检出例数有显著性差异 (P <0 .0 5)。提示 :乙型肝炎患者胰腺组织HBV感染可能是发生肝病伴糖代谢异常的原因之一。     

乙型肝炎病毒相关肾炎临床与病毒血清学特点关联研究

目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）感染与肾小球肾炎的关系,探讨HBV复制在HBV相关肾炎发病中的作用。方法 对338例经肾穿刺证实的肾炎患者的临床病理和病毒血清学特点进行分析。结果 HBV相关肾炎占肾炎总数的5．3％。在血HBsAg( )的肾炎患者中,HBV相关肾炎发病与HBeAg相关（P＜0．05）,与血清HBV DNA含量（bDNA)显著相关（P＜0．01）。分支链DNA（bDNA)阳性率明显高于HBeAg阳性率（P＜0．05）。结论 bDNA是反映HBV复制的最佳指标。HBV相关肾炎与体内HBV复制程度密切相关,HBV在体内大量复制,可能通过循环中的病毒抗原沉积于肾脏和肾脏中该抗原原位表达而致病。     

乙肝病毒感染患者胆囊胆汁成分改变及其临床意义

目的：探讨乙肝病毒感染与胆石形成的关系。方法：收集38例乙肝病毒感染患者和35例非乙肝病毒感染者的胆囊内胆汁,对其胆红素、胆汁脂类、钙离子进行检测。结果：乙肝病毒感染患者胆囊胆汁的非结合性胆红素、钙离子明显高于对照组（P＜0.01,P＜0.05）,总胆汁酸、胆固醇明显低于对照组（P＜0.01）。结论：乙肝病毒感染患者胆囊胆汁成分改变与胆石症发病率增高有密切关系。     

江苏省2005-2019年接受抗病毒治疗的HIV/AIDS合并HBV感染情况分析

目的 分析2005-2019年江苏省抗病毒治疗的HIV/AIDS的HBV感染情况。方法 采用回顾性资料分析,研究对象来源于中国疾病预防控制信息系统艾滋病防治基本信息系统江苏省2005-2019年HIV/AIDS首次入组抗病毒治疗数据库,采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。分析不同特征HIV/AIDS的HBsAg检测率和HBsAg阳性率的差异及其影响因素,单因素分析采用χ²检验,多因素分析采用非条件logistic回归模型。结果 2005-2019年江苏省首次入组抗病毒治疗的HIV/AIDS共29 288例,总体HBsAg检测率为49.8%（14 594/29 288）,2005-2019年HBsAg检测率由0.0%（0/80）增加到75.2%（3 448/4 586）,呈逐年上升趋势。进行HBsAg检测的HIV/AIDS中,江苏省籍占81.6%（11 915/14 594）,男女性别比7.34：1（12 845：1 749）,年龄（38.5±13.8）岁,汉族占96.1%（14 023/14 594）,已婚/同居占48.9%（7 131/14 594）。男男性传播和异性性传播感染途径占97.9%（14 294/14 594）。logistic回归分析结果显示,HBsAg检测率的影响因素中,2015年及以后入组、外省户籍、已婚/同居、大专及以上文化程度、注射吸毒感染途径的人群HBsAg检测率较高。HIV/AIDS的HBsAg阳性率为8.6%（95%CI：8.2%~9.1%）,HBsAg阳性率在2016年之前均>10.0%,自2016年以后稳定在6.7%~8.2%。HBsAg阳性率的影响因素中,2015年及以后入组、女性、年龄>59岁、大专及以上学历人群的HBsAg阳性率较低,而45~59岁年龄组和少数民族人群的HBsAg阳性率较高。结论 2005-2019年江苏省首次入组抗病毒治疗的HIV/AIDS中,HBsAg检测率总体不高,合并HBV感染高于一般人群,需要加强其HBsAg相关检测工作。     

我国HIV感染者合并感染HBV现况

目的通过文献回顾,了解我国HIV感染者中HBV感染的流行特征。方法通过对2010-2019年文献检索、文献筛选、质量评价等过程,收集我国有关HIV感染者合并感染HBV的研究文献,对符合纳入标准的文献提取相关数据后进行Meta分析。结果共纳入27项研究,合并样本量为69816例;我国HIV感染者的HBV合并感染率为11.29%,西部地区(10.73%)和南部地区(14.18%)的合并感染率较高,北部地区(6.36%)最低;血液或血液制品传播、注射吸毒传播、同性性传播、异性性传播、传播途径不详和母婴传播的HIV感染者的HBV合并感染率分别为11.22%、12.76%、9.58%、11.32%、10.34%和2.87%。在HIV各种传播途径中,经母婴传播的HIV感染者的HBV合并感染率最低;南部地区男性HIV感染者的HBV感染率是女性的1.29倍。结论我国HIV感染者的HBV感染率明显高于普通人群的HBV感染率;应加强HIV/HBV共感染者的预防控制。