活性氧与心肌细胞凋亡

活性氧 (reactiveoxygenspecies ,ROS)是生理性氧的代谢物 ,是广泛存在于体内的生理活性物质。它主要在线粒体呼吸链部位由单电子传递给氧而产生[1] 。它在许多生理生化过程中发挥着重要作用 ,同时 ,它还作为信号分子在器官、组织的发生、生长过程中起作用。然而它的大量产生、积聚会干扰细胞代谢 ,并能启动和诱导细胞程序性死亡的发生。心肌细胞的程序性死亡在心脏疾病的细胞丢失过程中发挥着重要作用 ,而多数心肌细胞凋亡通路都与活性氧密切联系在一起。活性氧诱导p5 3基因在心肌细胞的表达增加 ,P5 3蛋白又影响bcl 2蛋白家族凋亡调控系…     

异丙酚对神经元缺氧损伤的保护及其作用机制

目的　研究异丙酚对离体大鼠海马神经元缺氧损伤的保护作用及其机制。方法　以原代培养的大鼠海马神经元作为研究对象 ,建立缺氧、H2 O2 和谷氨酸损伤模型 ,用MTT法测定神经元存活率。采用激光扫描共聚焦显微镜动态监测缺氧前后 ,单个海马神经元内Ca2 + 浓度和线粒体膜电位 (△Ψm)的变化。用电子自旋共振技术测定异丙酚对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用。结果　 6～ 4 8mg·L-1浓度的异丙酚可明显降低神经元缺氧损伤时的细胞死亡率 (P <0 0 1) ,作用程度均呈剂量相关 (r =0 89,P <0 0 5 ) ;2 4～ 4 8mg·L-1浓度的异丙酚可明显降低H2 O2 损伤时的细胞死亡率 (P <0 0 1) ;12～ 4 8mg·L-1浓度的异丙酚可明显降低谷氨酸损伤时的细胞死亡率 (P <0 0 1)。 3～ 4 8mg·L-1异丙酚对缺氧诱发的细胞内钙离子超载有抑制作用(P <0 0 5 ) ;12、4 8mg·L-1异丙酚能减缓缺氧引起的△Ψm降低 (P <0 0 1)。 12、4 8mg·L-1异丙酚对羟基自由基的清除率分别为 17 1%和 2 1 1% ,但对超氧阴离子自由基无清除作用。结论　异丙酚对离体培养的大鼠海马神经元缺氧性损伤具有保护作用 ,其作用机制部分与异丙酚抑制缺氧引起的 [Ca2 + ]i 异常升高、抑制线粒体膜电位的下降和清除羟基自由基有关     

肾切除5／6大鼠肾小管线粒体自由基与肾病理的相关性研究

研究表明，无论何种病因进入终末期肾病阶段时，肾组织都具有相同的病理变化，这说明不同肾病所致CRF的发展存在着共同的病理性机制：CRF的发展即是肾硬化的发展，包括肾小球硬化和小管间质纤维化，综合前人研究和实验研究结果，均可以得出以下这样结论：(1)5／6肾切除大鼠的CRF模型是一种“肾小管高代谢”的模型。(2)CRF“肾小管高代谢”的机理是小管细胞线粒体超负荷，小管细胞线粒体超负荷时产生过量的自由基反过来损伤了线粒体，从而导致小管细胞损伤、凋亡，甚至坏死和肾脏功能减退。(3)通过抑制高代谢的肾小管或提高线粒体氧化磷酸化效率和有效清除产生的自由基，能有效减缓肾硬化和CRF的进程。     

肺癌患者全线粒体DNA体细胞性突变检测

目的　检测肺癌患者线粒体DNA体细胞性突变并探讨它在肿瘤发生中的作用。方法　利用时相温度梯度凝胶电泳对 16例肺癌患者的肿瘤及相应癌旁组织全线粒体DNA进行突变筛查 ,然后直接测序明确突变并进行分析。结果　在 10例 ( 62 .5 % )患者中发现 2 9个体细胞性突变 ,其中 2个位于rRNA区( 6.90 % ) ,10个位于mRNA区 ( 3 4.48% ) ,17个位于高变D环区 ( 5 8.62 % )。检测到 2例肿瘤和 3例癌旁组织具有常见的 4977bp缺失突变。除np3 0 3～ 3 0 9位点具有长度不稳定外 ,未发现其它微卫星区域不稳定。结论　肺癌患者的线粒体DNA存在高频率的体细胞性突变。     

茶多酚诱导膀胱癌EJ细胞株凋亡与细胞内钙离子变化的相关性

目的：探讨茶多酚对膀胱癌EJ细胞株抑制增殖的分子机理。方法：采用流式细胞术、噻唑蓝(MTT)比色法和激光共聚焦成像技术，分别测定膀胱癌EJ细胞株的凋亡状态、细胞的周期变化、线粒体功能及细胞内离子钙浓度水平变化。用茶多酚处理EJ肿瘤细胞。结果：细胞的周期依浓度的改变而变化，浓度增加至20μg／ml发生明显的凋亡，OD值与浓度呈负相关性。细胞内钙离子浓度与时间、浓度的增加呈量效正相关。钙离子浓度逐渐升高亦呈现为时效、量效正相关性。结论：茶多酚能影响肿瘤细胞的增殖、凋亡过程。茶多酚诱导所致线粒体变化、细胞内钙离子超载可能在肿瘤凋亡中起着重要作用。     

氨基糖甙类抗生素致聋家系线粒体DNA1555^G点突变分析

目的 考察１５５５＾Ｇ点在糖甙类抗生素致聋的对应关系，建立相应的基因诊断方法提供依据。方法 收集了３个有明确氨基糖甙类抗生素应用史的母系遗传耳聋家系１３人（包括聋人和听力正常者）的外周静脉血标本，聚合酶链反应扩增线粒体ＤＮＡ，Ａｌｗ２６Ｉ限制性内切酶分析、ＤＮＡ斑点杂交和ＤＮＡ序列分析检测１５５５＾Ｇ点突变。结果 家系１和３的７份样品均为１５５５＾Ｇ点突变阳性，家系２的６份样品为１５５５＾Ｇ点突变     

人类颞骨火棉胶切片中线粒体DNA的扩增及重组测序

目的应用分子生物学技术建立人类颞骨火棉胶切片中的ＤＮＡ分析方法。方法采用多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）配合不同的引物、扩增方式及酶切技术检测长期保存的７例（９侧）颞骨火棉胶切片中微量线粒体ＤＮＡ的片段缺失及点突变，ｐＧＥＭＴ载体进行扩增片段的重组与克隆。结果９侧颞骨ＤＮＡ提取液中均可见正常的１３５ｂｐ扩增片段，巢式ＰＣＲ检出其中２例生前患老年聋者（各查１侧）有线粒体ＤＮＡ大片段缺失，测序结果证实扩增的准确性。结论分子生物学技术在颞骨切片研究中的应用对于提高其回顾性研究水平有重要意义，目前可在耳科疾病的研究中发现相关的基因突变或病原体。     

细胞器相关凋亡途径研究进展

细胞凋亡是一个由基因调节的重要的主动过程.细胞内各组分在这一过程中相互协调,组成了精细的调控系统.细胞核和线粒体是近年发现与凋亡密切相关的细胞器.进一步的研究发现,在一定条件下,内质网、溶酶体,高尔基体和内涵体等也与凋亡活动有关.     

川芎嗪对大鼠脊髓损伤后线粒体功能的保护作用

目的探讨川芎嗪对大鼠脊髓损伤(SCI)后线粒体损伤的保护作用及其机制.方法采用Allen'sWD技术制备SCI动物模型,将30只大鼠随机分为假手术组、对照组和治疗组(川芎嗪组),假手术组不损伤脊髓,作为正常对照;对照组于造模前60min和造模后即刻经尾静脉注射生理盐水20mg/kg;治疗组在相同时相注射等量川芎嗪注射液;测定SOD和PLA2活性、MDA浓度及Ca2 -Mg2 -ATP酶活性.结果对照组脊髓线粒体膜PLA2活性、MDA浓度在伤后早期显著升高,SOD活性、Ca2-Mg2 -ATP酶活性明显降低,与假手术组比较差异有显著性;预先应用川芎嗪注射液后,能够明显抑制线粒体 MDA的生成,降低 PLA2活性,提高 SOD活性,并能防止线粒体 Ca2-Mg2 -ATP酶活性的降低.结论川芎嗪能拮抗 SCI后线粒体膜酶的活性变化,其机理可能是提高氧自由基清除能力和抑制脂质过氧化反应.     

葡多酚对胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的　观察葡多酚 (GPC)对氧化损伤引发的胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响。方法　在体外培养的胸腺细胞中加入不同浓度的GPC和培养液中浓度为 12 5 μmol L的H2 O2 ,共同培养 2h ,采用流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位水平。结果　氧化损伤组细胞凋亡率为 (2 9 5 3± 3 8) % ,线粒体膜电位为 2 7 2 4± 2 2 (D值 ) ,5 0mg LGPC保护组则分别为 (8 6 1± 1 2 ) %和 87 5 5± 4 7(D值 ) ,两组间的差异均有显著性 (P <0 0 5 )。结论　GPC可有效抑制氧自由基引发的胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的下降 ,对胸腺细胞的氧化损伤有良好防护作用