人表皮生长因子在大肠杆菌中的融合表达与活性分析

人表皮生长因子在大肠杆菌中的融合表达与活性分析赵忠良路凡陈南春柴玉波陈苏民（第四军医大学生物化学与分子生物学教研室西安７１００３３）关键词人表皮生长因子基因表达融合蛋白大肠杆菌中图号Ｑ７７４表皮生长因子为一小分子多肽生长因子，能促进多种上皮细胞的分化...     

膀胱肿瘤组织中端粒酶催化亚基和c-myc的表达

目的 研究膀胱肿瘤组织中端粒酶催化亚基(hTERT)和c-myc间的表达及关系。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对27例膀胱肿瘤组织、16例癌旁组织和16例正常膀胱粘膜同时测定hTERT和c-myc表达,分析两指标在3种组织的表达差异和相关性。结果 TCC组织hTERT和c-myc的表达阳性率分别为100.0％(27/27)和66.7％(18/27);癌旁组织两指标的阳性率均为 37.5％,而正常膀胱粘膜分别为 0和 25.0％;hTERT和c-myc两指标在膀胱肿瘤组织中的阳性表达有相关性(P<0.01)。结论 hTERT较c-myc作为TCC的诊断指标更灵敏和特异;两指标在TCC中的阳性表达具有相关性。     

环氧化酶-2基因启动子甲基化及表达与胃黏膜病变的关系

目的 探讨环氧化酶2(COX-2)基因启动子区甲基化水平和蛋白表达与胃黏膜病变的关系,并对其相关的影响因素进行研究.方法 以1201例患有不同胃黏膜病变的高危人群为研究对象,采用免疫组织化学方法榆测COX-2表达,用亚硫酸氢钠-变性高效液相色谱(DHPLC)对COX-2启动子甲基化率进行定量分析,采用13C尿素呼气实验(13C-UBT)对幽门螺旋杆菌(H priori)感染状况进行测定.结果 COX-2甲基化率中位数随胃黏膜病变的加重逐渐升高,在浅表性胃炎和慢性萎缩性胃炎(SG/CAG)、肠上皮化生(IM)及不确定性异型增生和异璎增生(Ind DYS/DYS)病变中分别为10.6%、11.8%、13.8%,各病变组之间差异有统计学意义(X2=8.312,P=0.016).分层分析显示,在H pylori感染阴性病例中,COX-2甲基化率仍随病变加重明显升高,在SG/CAG、IM、Ind DYS/DYS病变中其中位数分别为8.8%、10.6%、14.1%(X2=6.629,P=0.036).进一步分析发现,COX-2甲基化率随着COX-2表达强度的增强而降低,由COX-2弱阳性表达的13.3%降至强阳性表达的7.6%(X2=10.400,P=0.015).结论 COX-2启动子甲基化水平与胃黏膜病变程度及H pylori感染状况密切相关,并与COX-2表达强度呈负相关,说明COX-2启动子区异常甲基化可能在胃黏膜病变的演变过程中起重要作用.     

脑膜瘤中细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白表达的临床研究

目的　通过对脑膜瘤组织中凋亡程度以及脑膜瘤组织中凋亡相关基因的蛋白表达进行研究 ,探讨不同病理分级脑膜瘤中凋亡强弱程度以及凋亡相关蛋白表达的高低。方法　采用原位末端转移酶标记法 (TUNEL)检测脑膜瘤组织中的凋亡变化 ,采用免疫组化检测凋亡相关基因p5 3、Caspases - 3、bcl- 2蛋白表达。结果　经统计检验 ,凋亡在良性脑膜瘤与不典型性及恶性脑膜瘤间差别有显著意义 (P <0 .0 5 ) ,不典型性与恶性脑膜瘤间无显著差别(P >0 .0 5 )。Caspases - 3、p5 3蛋白表达随恶性度上升而上升 (P <0 .0 5 ) ,bcl- 2的蛋白表达与病理级别无关联 (P>0 .0 5 )。良性脑膜瘤各亚型间凋亡程度无差别 (P >0 .0 5 )并与性别无关 (P >0 .0 5 ) ,p5 3、Caspases- 3、bcl- 2在良性脑膜瘤各亚型间表达无差别。结论　脑膜瘤组织中存在凋亡 ,并且随肿瘤病理类型的恶化而加强 ,p5 3、Caspases- 3蛋白表达与凋亡程度相一致 ,bcl- 2蛋白表达则与凋亡无明显关系 ,良性脑膜瘤各亚型间凋亡无显著差别 ,凋亡表现也与性别无关 ,bcl- 2、p5 3、Caspases- 3的蛋白表达无明显关联     

人睫状神经营养因子基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

人睫状神经营养因子（ＣｉｌｉａｒＮｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃＦａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）是一种能促进包括交感神经、副交感神经及感觉神经元在内的各种外周神经元和中枢神经元生长及分化的神经生长营养因子，它能特异地促进有丝分裂后的神经元的分化，并具有支持神经元存活的营养作用，因而它有可能成为治疗帕金森氏病、早老性痴呆和肌萎缩性侧索硬化等神经性疾病的有效药物［１］。本文通过反转录ＰＣＲ获得ＣＮＴＦ的ｃＤＮＡ基因，并构建了重组表达质粒，在大肠杆菌中获得了高效表达，为临床应用奠定了基础。１　材料和方法１．１　菌株和…     

正常人及胃癌患者胃蛋白酶原C基因多态性研究

以ＰＧＣ３０１为探讨，对１０例胃癌组织及１１例正常人体组织基因组ＤＮＡ中胃蛋白酶原Ｃ基因的ＥｃｏＲ Ｉ限制性片段长度多态性作了观察分析。发现在正常人体有三种常见等位片段，分别为２０ｋｂ、５．７ｋｂ及３．６ｋｂ；一种稀有片段，３．５ｋｂ。在胃癌患者，未发现与正常人体不同的等位片段。但是，稀有片段及稀有杂交带型的出现频率高于正常组。这一结果对深入探讨胃蛋白酶原Ｃ基因稀有片段及稀有杂交带型对胃癌的诊断价