背联体贝尾棘虫大核摘除、移位后的调节现象

人工背联体贝尾棘虫是两个正常贝尾棘虫以背部相联接的联体,它具有两个能进行摄食的口,有两套大核和小核。由于背联体两测的细胞质大小相似,无性生殖是同步发生的,所以具有正常的生殖能力(Tchang and Pang,1979)。我们在这种“背联体”的培养中观察到它的大核的多种调节现象(Tchang and Pang,1979),认为这是细胞核质关系协调和平衡的例证。我们考虑,如果在人为干扰的情况下,这种“背联体”又会发生什么变化呢?本文报告对人工背联体贝尾棘虫进行摘除大核和将大核移位所引起的变化过程,从中探讨细胞核质关系及其作用问题。     

去Ｎ端信号肽和Ｃ端跨膜区猪卵透明带—３β蛋白在原核系统表达的研究

猪卵透明带（Zona pellucida,ZP)由生物化学和免疫学性质截然不同的三种糖蛋白（pZP１、pZP3α和pZP3β）组成由于抗pZP3β抗体能在体外与人ＺＰ发生交叉反应,因此pZP3β一直被认为是研制抗受精避孕疫苗的潜在抗原之一,为了能在原核系统中获得无卵巢因子污染的pZP3β蛋白,本文采用ＰＣＲ方法删除了原cDNA中编码５′-和３′－端信号肽和跨膜区的ＤＮＡ顺序。扩增的pZP3β基因核心片段（pZP3β″）经ＤＮＡ测序验证后,通过引入其两端的ＥcoRⅠ和SalⅠ酶切位点被定向插入pＢＶ２２１质粒ＰＲＰＬ启动子下游的多克隆区。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：工程菌在热诱导后能特异地表达pZP3β蛋白,并能在蛋白印迹实验中被兔抗pZP IgGs识别。     

大别山地区两栖爬行动物区系调查

为掌握大别山地区两栖爬行动物资源现状,于2006年9月起至2013年6月通过53条样线对大别山地区进行实地考察。调查结果显示,在大别山地区共发现两栖爬行动物56种,隶属4目16科。其中两栖动物2目8科21种,爬行动物2目8科35种。大别山地区两栖、爬行动物的分布型主要为南中国型,动物区系类型则主要为华中型和华南型。黄喉拟水龟(Mauremys mutica)、黄脊游蛇(Coluber spinalis)、平鳞钝头蛇(Pareas boulengeri)、棕黑腹链蛇(Amphiesma sauteri)和福建颈斑蛇(Plagiopholis styani)为该地区的新纪录,大别山原矛头蝮(Protobothrops dabieshanensis)为近期在大别山地区发现的蛇类新种。东方蝾螈(Cynops orientalis)、中华大蟾蜍(Bufo gararizans)、泽陆蛙(Fejervarya multistriata)、黑斑侧褶蛙(Pelophylax nigromaculatus)、中国林蛙(Rana chensinensis)为两栖类的优势种,中国石龙子(Eumeces chinensis)、蝘蜓(Sphenomorphus indicus)、北草蜥(Takydromus septentrionalis)、赤链蛇(Dinodon rufozonatum)、王锦蛇(Elaphe carinata)、虎斑颈槽蛇(Rhabdophis tigrinus)和乌梢蛇(Zaocys dhumnades)为爬行类的优势种。鉴于大别山两栖爬行动物多样性的丰富度和动物区系的代表性,应加强对该地区两栖爬行动物的保护工作。     

广州海域环境质量评价

根据2003年8月至2004年8月的水质调查数据,运用水质质量单项标准指数法、综合指数WQI法和富营养化评价法,对广州海域环境质量进行评价.结果表明,广州海域主要污染物质为DIN、PO₄^3--P、油类、Cu和Pb,其年平均浓度分别为1.87 mg·L^-1、0.049 mg·L^-1、0.107 mg·L^-1、6.07 μg·L^-1和1.43 μg·L^-1.其中,DIN的污染情况最严重,所有监测站位DIN含量均超过四类海水水质标准,其平面分布呈现从湾内向湾外递减的特征.受珠江径流和陆源排污等的影响,广州海域大部分处于重度污染,且严重富营养化,其单项污染指数、综合污染指数和富营养化指数的平均值分别为2.22、6.80和48.44,表现为从湾内向湾外递减的趋势,高值区均出现在黄埔港至狮子洋海域.     

华南梅花鹿的分布和现状

华南梅花鹿(Cervus nippon kopschi) 亚种可能是现存梅花鹿亚种中最濒危的物种。目前主要分布于安徽皖南的泾县、旌德、黟县、宁国,江西的彭泽和浙江的临安等县。 分布的范围仍在不断缩小,种群被隔离,并逐步在分散。本文在野外调查的基础上对该亚种的现在分布区和栖息地的现状进行了分析和描述。由于目前缺乏对华南梅花鹿的生态学和生物学的研究,对该种群尚无有效的保护措施。迫切需要采取有力措施加强对野生梅花鹿的保护。     

基于XcmⅠ酶切的高效TA克隆载体的构建

目的：制备基于XcmⅠ酶切的高效TA克隆载体,并检测其克隆PCR产物的效果。方法：设计一对互补配对的寡核苷酸,经过变性及退火后插入质粒pUC19的多克隆位点,从而在该多克隆位点中引入2个XcmⅠ酶切位点,用XcmⅠ酶切后即获得含有3’突出T碱基的T载体;为了提高该T载体的克隆效率,优化了2个XcmⅠ酶切位点之间的碱基数目,排除了载体自连产生白色克隆的可能性,使假阳性大大减少;此外,为了便于完全酶切与未完全酶切载体的分离,在2个XcmⅠ之间插入了一段无关DNA片段。结果：改进得到的T载体可以有效克隆PCR产物,其阳性克隆率可达95％。结论：构建了基于XcmⅠ酶切的TA克隆载体,经过改进的T载体具有很高的克隆效率。     

沈阳市生态城市建设中的生态压力

应用生态足迹方法计算了沈阳市1991—2005年的生态压力,并对2006—2010年生态足迹做了预测。结果表明：沈阳市1991—2005年人均生态足迹需求为1.75 hm²,人均生态承载力为0.41 hm²,人均生态赤字为1.34 hm²,人均生态足迹的需求超出人均生态承载力3.24倍;在6大类生态生产性土地中,耕地足迹和能源足迹占沈阳市生态足迹总量的85%以上,二者的变化对生态足迹总需求有巨大影响。经预测,沈阳市生态足迹在2005年后将增长迅速,预计2010年达到人均5.11 hm²,是1991年的3.50倍、2000年的3.32倍、2005年的1.96倍。结合研究结果,就沈阳市建设生态城市、实现可持续发展提出了建议。     

马蔺根系响应Cd胁迫的miRNA高通量测序分析

为了解Cd胁迫下马蔺﹝Iris lactea var. chinensis ( Fisch.) Koidz.〕根系miRNA的表达模式,采用高通量测序法对100μmol·L-1 Cd胁迫0(CK)和24 h(Cd)后马蔺根系的sRNA文库(分别为CK和Cd文库)进行分析,筛选出显著差异表达的miRNA,并对这些miRNA的靶基因功能进行预测;在此基础上,采用qRT-PCR技术对部分miRNA及其靶基因的表达模式进行验证。结果表明：在CK和Cd文库中,未注释的sRNA序列较多,分别占各自sRNA特异序列总数的86.4%和80.5%;在已注释的sRNA序列中,miRNA所占比例最低(分别为0.3%和0.5%),而rRNA所占比例最高(分别为9.4%和11.8%);2个文库中的sRNA长度主要为21~24 nt,且均以21 nt为最多。从Cd胁迫下马蔺根系sRNA中共筛选出32个显著差异表达的miRNA,其中20个miRNA表达量下调(分别属于miR165、miR166、miR167、miR168、miR390和miR396家族),12个miRNA表达量上调。功能预测结果表明：这些miRNA靶基因的功能主要集中在生物学过程、细胞组分和分子功能3个方面;而从KEGG通路富集分析看,富集在核糖体、氨基酸生物合成和碳代谢3个通路上的差异表达miRNA的靶基因数分别为122、88和82个。 qRT-PCR验证结果表明：在CK和Cd文库间,11个差异表达miRNA及8个靶基因的相对表达量均有显著差异(P<0.05);其中,11个miRNA相对表达量的上调和下调趋势与上述筛选结果一致,并且miRNA相对表达量上调时,其靶基因的相对表达量下调,反之亦然,说明Cd胁迫条件下马蔺根系的miRNA负调控其靶基因的表达,并且这些靶基因主要参与编码转录因子、HD-ZIP蛋白和信号蛋白等过程。     

FLUTAX法显示纤毛虫微管胞器的改良

在参考Arregui等报道的方法的基础上,对紫杉醇荧光染色(FLUTAX)显示纤毛虫细胞微管胞器的流程进行了改进,对其中一些试剂的配方作了调整,改进了多聚赖氨酸涂布玻片、皂苷孵育、多聚甲醛固定和Triton X-100渗透等步骤。     

外周血甲状腺过氧化物酶mRNA与甲状腺乳头状癌转移风险的研究

目的:检测甲状腺乳头状癌(PTC)患者外周血甲状腺过氧化物酶(TPO)m RNA的表达水平,探讨其在预测PTC转移风险中的诊断价值。方法:以术后组织病理学为诊断标准,采用巢式逆转录-聚合酶链反应方法检测41例PTC患者术前外周血TPO m RNA表达阳性率,并分析其与患者临床病理学特征及转移风险的关系。结果:41例PTC患者均行全/近全甲状腺切除术联合颈部淋巴结清扫术,其中伴颈部淋巴结转移16例(39.0%),均无远处转移。将患者按照手术前血清TPO m RNA表达阳性与否分组,尽管2组间表达阳性率在性别、年龄、肿瘤最大径、肿瘤数目无显著差异(P0.05),但伴有颈部淋巴结转移患者的表达阳性率明显高于不伴转移者(68.8%vs 36.0%,P0.05)。对PTC患者进行术后TNM分期与复发危险度分层,TPO m RNA在不同术后分期的组间表达无显著差异(P0.05),但在中、高危组的表达阳性率明显高于低危组(68.8%、66.7%vs 31.8%,P0.05)。结论:外周血TPO m RNA表达水平可能有助于预测PTC转移的风险,有望成为甲状腺癌的分子标志物。