cDNA-AFLP和cDNA-SRAP技术在植物基因差异表达上的应用及其分析比较

对cDNA-AFLP和cDNA-SRAP技术在植物上的应用研究进行了介绍,指出cDNA-AFLP和cDNA-SRAP技术已逐渐成为基因表达研究的重要工具,是构建转录图谱、定位目标性状位点、研究差异基因表达等研究的主要手段,具有广泛广阔的应用前景.但是cDNA-AFLP和cDNA-SRAP技术均具有一定的缺限,主要表现在获得的差异片段还不够全面丰富.cDNA-AFLP可以扩增到扩增较多的带,但试验程序比较繁琐、昂贵而且耗时较长、操作较困难;而cDNA-SRAP相对比较简便、便宜而耗时较短,较易操作.因而将cDNA-AFLP与cDNA-SRAP技术结合起来,可望得到更全面丰富的差异片段,从而在植物基因差异表达、新基因发现、抗逆性分子机理研究等方面发挥更大的作用.     

油葵的组织培养和试管内开花

1　植物名称　向日葵 (Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓａｎｎｕｓ)品种油葵 ,采自南宁市葵花世界游乐园。2　材料类别　种子胚 ,带芽茎段。3　培养条件　培养基 :( 1 ) 1 /2ＭＳ +ＮＡＡ 0 .2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ;( 2 )ＭＳ + 6 ＢＡ 2 .0～ 5 .0 ;( 3)ＭＳ +ＫＴ 0 .2 +ＣＨ 2 0 0 ;( 4 )ＭＳ +ＫＴ 5～ 1 0。以上培养基均含 3%蔗糖 ,0 .5 %琼脂粉 ,ｐＨ 5 .8,培养温度为 2 5℃左右 ,光照 1 6ｈ·ｄ- 1 ,光照度 1 5 0 0ｌｘ。4　生长与分化情况4.1　无菌苗的培养　将油葵带芽茎段和去壳种子 ,以 75 %乙醇浸泡 30ｓ,再用 0 .1 %的ＨｇＣｌ2 灭菌…     

水溶性羟丙基甲壳素的合成及性能研究

本文研究了水溶性羟丙基甲壳素的合成工艺,确定了甲壳素羟丙基化的条件,并用ＩＲ、ＮＭＲ对化合物进行了结构表征。     

酶膜生物反应器及其应用

酶膜生物反应器是生物反应器的种类之一。它是由高分子膜与酶相结合构成的,是膜科学技术与生物技术相结合的产物,最早是由维塔尔(Weetal)于1966年提出。众所周知,酶是一种具有催化功能的蛋白质,它与一般的化学催化剂相比,具有专一性、效率高和反应条件温和等优点,但是酶也有很多弱点,如较脆弱、易变性失活、使用寿命短及水溶性酶在反应后不易分离,不能重复使用等,因此,已往的惯例是把价格昂贵的酶只用一次即被抛弃,这即不合理又是一种浪     

电视-显微成像系统在植物形态解剖学实验教学中的应用

介绍电视—显微成像系统在植物形态解剖学实验教学中的应用;并将其与计算机、数码投影仪、刻录机、影碟机等仪器进行组合应用,不仅提高了植物形态解剖学教学效果,而且提高了学生的综合素质。     

C-myc-siRNA通过调控ROS诱导子宫内膜癌细胞凋亡

为探讨原癌基因C-myc-siRNA对子宫内膜癌细胞凋亡的影响,本研究利用细胞计数盒(cell counting Kit-8, CCK-8)法分别检测C-myc-siRNA转染组和空载体转染组(Vector-NC)的子宫内膜癌细胞活力;蛋白免疫印迹法(Western blotting)分别检测C-myc-siRNA转染组和空载体转染组(Vector-NC)的子宫内膜癌细胞凋亡蛋白Bax以及抗凋亡蛋白Bcl-2的变化;流式细胞仪分别检测C-myc-siRNA转染组和空载体转染组(Vector-NC)活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)的变化;蛋白免疫印迹法(Western blotting)分别检测预处理NAC (ROS抑制剂)后,C-myc-siRNA转染组和空载体转染组(Vector-NC)的子宫内膜癌细胞凋亡相关蛋白Bax以及Bcl-2的变化。结果表明:C-myc-siRNA转染子宫内膜癌细胞后,促凋亡相关蛋白Bax的表达显著高于空载体转染组,且抗凋亡相关蛋白Bcl-2的表达明显低于空载体转染组(p<0.05);C-myc-siRNA转染子宫内膜癌细胞后,细胞ROS水平明显增加(p<0.05);NAC预处理显著减弱C-myc-siRNA对子宫内膜癌细胞凋亡的促进作用(p<0.05)。本研究结论表明,C-myc-siRNA能够通过调控ROS诱导子宫内膜癌细胞凋亡。     

微生物转化法生产度洛西汀中间体手性醇菌株的鉴定

【目的】获得以DKTP为底物合成度洛西汀关键中间体手性醇(S)-DHTP的菌株。【方法】采用常规及改进的微生物转化法从土壤中进行筛选。【结果】筛选获得一株菌株,能够将底物DKTP对映选择性地还原为(S)-DHTP,且具有较高的转化率(>90%)和几乎绝对的对映体过量值(e.e.>99%),改进的筛选方法更为简便高效。形态学特征和26S rDNA序列分析综合判断,该菌株属于红酵母属,命名为红酵母Rhodotorula sp.507。【结论】供试菌株能够高效地、不对称地生物还原DKTP成度洛西汀前体物(S)-DHTP,使大量获得度洛西汀前体原料变得经济可行。     

葛根淀粉合成关键酶活性动态及其与块根产量和淀粉积累的相关性研究

为探讨葛根发育过程中淀粉合成关键酶活性与块根产量和淀粉积累的关系,以初步揭示其内在的生理机制。该研究以‘桂葛1号’粉葛和‘桂葛8号’野葛为材料,采取生理测定法对农艺性状、直链和支链淀粉的含量、淀粉合成关键酶活性等进行测定,并对葛根发育过程中淀粉合成关键酶活性、农艺性状和淀粉含量动态变化的关系进行相关性分析。结果表明：(1)块根发育过程中,两品种葛根腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)、可溶性淀粉合成酶(SSS)、束缚性结合淀粉合成酶(GBSS)和淀粉分支酶(SBE)的活性呈现先增大后降低的单峰曲线变化,与直链淀粉、支链淀粉和总淀粉含量由缓慢增长到快速增长后趋于稳定的变化趋势基本一致,即在块根形成期至膨大期逐渐增长,至膨大后期达到最大,之后迅速下降,至成熟期缓慢下降,并维持在较高水平。(2)‘桂葛8号’的淀粉含量和产量显著高于‘桂葛1号’,其酶活性也均显著高于‘桂葛1号’。(3)葛块根的根长、根粗、单株重、干物质含量、产量表现为“缓慢-快速-稳定”的变化趋势,淀粉含量表现出类似变化。(4)相关性分析结果显示,4个淀粉合成关键酶活性与块根直链淀粉、支链淀粉及总淀粉含量、根长均呈显著或...     

膜片钳与植物膜生物学研究

膜片钳技术（ｐａｔｃｈｃｌａｍｐｔｅｃｈｎｉｑｕｅ,ＰＣ）是原西德马普所ＥｒｗｉｎＮｅｈｅｒ和ＢｅｒｔＳａｋｍａｎｎ于１９７６年发明的,他们首先将此技术应用于神经细胞的乙酰胆碱受体通道的研究,由于他们对这一技术及其在医学研究中的应用作出了杰出贡献,...     

花生类受体蛋白激酶基因AhBAK1的克隆及原核表达

BAK1是富含亮氨酸重复序列型类受体蛋白激酶,参与调控植物先天免疫反应过程中的程序性细胞死亡过程。实验室已有的花生铝胁迫转录组数据揭示AhBAK1为铝胁迫响应基因。为研究其在花生抗铝机制中的作用,该文分析了铝胁迫下AhBAK1在花生耐铝品种‘99-1507’和铝敏感品种‘中花2号’(‘ZH2’)根尖中的转录变化,采用RT-PCR技术进行扩增AhBAK1的完整CDS序列,并对序列特征进行了分析。结果表明:AhBAK1显著响应铝处理,且在‘99-1507’中有着更强的诱导表达; AhBAK1包括625个氨基酸残基,属富亮氨酸重复区类受体激酶,具跨膜域和蛋白激酶催化结构域,不存在信号肽,预测定位于细胞质膜;我们进一步构建了含有AhBAK1激酶域的pGEX-6p-1-AhBAK1-CD重组质粒,体外诱导表达出约70kD可溶性蛋白,经凝胶亲和层析纯化,最终得到基于蛋白印迹实验(Western Blot)验证正确的重组蛋白。为进一步研究AhBAK1的生物学功能和生化功能奠定了基础。