B型肉毒毒素重链抗原表位的预测及表位合成肽抗原性的检测

目的:预测B型肉毒毒素蛋白抗原表位,研究表位合成肽的生物学活性。方法:利用生物信息学,结合Anthwine分析软件及网络平台,预测B型肉毒毒素蛋白重链的B细胞抗原表位。人工合成4条(P1,P2,P3,P4)表位多肽,与抗B型肉毒毒素类毒素的马血清反应;采用腹腔注射的方式用合成肽免疫BALB/c小鼠,检测免疫血清与合成肽的结合;对免疫小鼠腹腔注射B型肉毒毒素。结果:合成的多肽能与抗B型肉毒毒素的类毒素的马血清结合;多肽免疫小鼠后能产生针对多肽的抗体,其中P1、P3、P4产生的抗体对受毒素攻击的小鼠具有保护作用。结论:成功预测了抗原表位,合成的表位多肽具有较好的抗原性。     

青蛤生长的初步研究

本文报导了对青蛤生长的观察和研究，作者描述了青蛤壳长与壳高的关系；壳长和体重的关系；体重（Ｗ·ｇ）和壳长（Ｌ·ｃｍ）的关系式为Ｗ＝０．２８１６×Ｌ￣（３．０６２）；青蛤生长７—１１月快，１—３月几乎不生长；青蛤生长与潮位关系是低潮位快，高潮位慢。此外还研究了水流、底质、放养密度和个体大小等因子对青蛤生长的影响。     

鼠源抗B型肉毒毒素单链抗体噬菌体文库的构建筛选及抗体免疫学活性的初步研究

B型肉毒毒素重链C-端片段(BoNTB/Hc)经金属螯和层析法纯化后免疫Balb/c小鼠,从其脾淋巴细胞中提取总RNA,反转录成cDNA,用抗体可变区混合引物进行全套抗体重、轻链可变区基因的扩增,体外随机装配成单链抗体(scFv)。将其克隆至pCANTAB5E中,构建单链抗体噬菌体抗体库。结果表明经过4轮"吸附-洗脱-扩增"的富集过程,筛选获得高亲和力的克隆。序列测定符合抗体可变区结构特点。     

嗜盐微生物在环境修复中的研究进展

人类活动产生的污染物,使一些天然盐环境遭受不同程度的污染,或者使环境受到污染物与高盐的双重污染。在高盐条件下,非嗜盐微生物的代谢会受到抑制,其生物修复效率明显降低,甚至丧失修复能力。嗜盐微生物则能够在高盐环境中栖息繁殖,凸显其修复被污染高盐环境的生物学效率和广阔的应用前景。就嗜盐微生物降解石油烃、芳香烃衍生物和有机磷等污染物的研究进展进行了综述和讨论。     

角质酶在生物可降解聚酯聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯降解中的应用

随着废弃塑料带来的环境污染越来越严重,生物可降解聚酯已成为大众关注的焦点。聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯[poly(butylene adipate-co-terephthalate),PBAT]是脂肪族和芳香族共聚形成的生物可降解聚酯,兼具两者的优异性能。针对PBAT在自然条件下对降解环境要求严格且降解周期长的不足之处,本研究探究了角质酶在PBAT降解中的应用和对苯二甲酸-丁二醇酯(butylene terephthalate,BT)含量对PBAT生物降解性的影响,以实现对PBAT降解速率的提升。选取5种不同来源的聚酯降解酶对PBAT进行降解应用并比较出降解效果最优的酶,并测定了含有不同BT含量的PBAT聚酯的降解效率。结果表明,角质酶ICCG为降解效果最好的酶,且BT含量越高PBAT的降解率越低。此外,还确定了角质酶ICCG对高BT含量的PBAT(H)降解的最适温度、最适缓冲液类型、最适pH、最适E/S(enzyme to substrate)和最适底物浓度比分别为75℃、Tris-HCl、9.0、0.4%和1.0%。本研究结果可为角质酶在PBAT降解中的应用提供一定的理论依据和实验...     

一种基于定量PCR的CRISPR/Cas9基因编辑作物快速检测方法的研究

基因编辑技术自诞生以来,在作物育种、基因功能分析中得到了广泛的应用,其中CRISPR/Cas9系统是目前使用最多的基因编辑技术。基于荧光定量PCR技术,针对编辑位点设计特异性探针,结合基因组快速提取方法和成熟的水稻内参基因PLD引物,对自行研发的CRISPR/Cas9系统编辑水稻的Os11N3基因进行检测,并通过合成质粒模拟不同突变情况对该方法的特异性进行了验证。研究所建立的体系可在节约时间和成本的同时获取满足qPCR检测所需的基因组,能够区分1 bp基因编辑突变体与野生型,具有良好的特异性和灵敏度。检测方法可为作物育种筛选节省时间和成本,为基因编辑产品检测监管提供技术支持。     

基于植物DNA条形码rbcLa序列的日本条螽食谱分析

日本条螽Ducetia japonica广泛分布于我国绝大部分区域,并在城区绿地大量发生。据此假设其食物谱可能具有较高的物种多样性,但目前对其在自然环境下取食的植物种类仍缺乏了解。本研究对来自河北保定城区绿地和城郊荒地两种生境共计75头日本条螽肠道内容物进行DNA提取、rbcLa基因片段扩增及测序,并利用BOLD和NCBI数据库进行分类鉴定。结果显示：日本条螽在野外至少取食10科、13种植物。在城区绿地和城郊荒地两种生境中,取食频率最高的植物分别是卫矛科冬青卫矛Euonymus japonicus(47.37%)和大麻科葎草Humulus scandens(81.08%)。只有1条rbcLa基因序列未鉴定至种级水平,表明利用植物DNA条形码rbcLa基因序列可对植食性昆虫取食的植物种类进行快速鉴定。同时,研究结果也初步证实日本条螽的食物谱包含较高的物种多样性,为城市绿地螽斯类鸣虫保护和繁育提供依据。     

AQP1在阿霉素肾病大鼠器官水肿中作用研究

目的：探究阿霉素肾病是否引起除肾脏外的器官水肿,以及水通道蛋白1(Aquaporin 1,AQP1)的表达变化在器官水肿形成中的作用。方法：将20只SD大鼠随机分为模型组和对照组。模型组予尾静脉注射盐酸阿霉素（6.0 mg/kg）造模,对照组注射等量生理盐水。造模6周后处死,记录体重和心、肝、脾、肺重量,应用HE染色法对心、肝、脾、肺组织进行病理学观察,使用IHC法检测AQP1在心、肝、脾、肺组织的分布,使用Western blot法和RT-PCR法检测各器官组织中AQP1的蛋白和m RNA表达水平。结果：与对照组相比,阿霉素肾病大鼠尿蛋白显著升高（P<0.01）,体重显著降低（P<0.05）,肺系数显著升高（P<0.05）,但心、肝、脾重量没有显著变化。心、肝、肺均出现不同程度的水肿和病理损伤,脾表现出血液充盈不足;免疫组化结果显示AQP1分布于肝脏胆管细胞、心脏肌细胞膜及微血管内皮细胞、脾血红细胞、肺毛细血管内皮细胞。Western blot和RT-PCR结果显示模型组心脏AQP1蛋白和m RNA表达水平均显著增高（P<0.05）,肝脏AQP1蛋白表达水平有...     

基因工程菌在活性污泥中的衰减及其影响因素

在间歇实验和连续运行的反应器中,考察了基因工程菌细胞密度在活性污泥中的衰减,进行了动力学模型拟合,求得模型参数,并分析了影响衰减的因素.结果表明,在间歇实验和连续运行反应器中,细胞密度在活性污泥中均呈现初期快速衰减而后趋于稳定的趋势.其衰减动力学可以用Logistic模型和Gompertz模型拟合,两个模型的拟合都有很好的相关性和显著性,拟合优度没有差异.在不同的条件下,间歇实验拟合得到的参数取值范围是：Logistic模型衰减系数r′=0.5～0.6 h^-1,稳定细胞密度K′=10⁴～10⁵ cfu·ml^-1;Gompertz模型初始衰减系数b=0.6～1.2 h^-1,比衰减系数a=0.02～0.09 h^-1.初始投加密度对衰减速率影响不大,但是显著影响稳定细胞密度.污泥浓度和温度对衰减速率和稳定密度均有显著影响. 污泥浓度越大,衰减越快,稳定密度越大;而温度越低,衰减越快,稳定密度也会越低.营养条件和微型动物捕食也是影响衰减的重要因素.基因工程菌在连续运行的膜生物反应器和活性污泥反应器中的细胞密度衰减,也可以用Logistic模型拟合,其参数在间歇实验的取值范围内.