鹅细小病毒和番鸭细小病毒核酸疫苗重组质粒的构建及表达

将鹅细小病毒（GPV）和番鸭细小病毒（MPV）主要结构蛋白（VP2－VP3）基因克隆到核酸疫苗质粒pIRESlneo载体上,构建了核酸疫苗重组质粒pIGVP1和pIMVP,通过脂质体转染法分别将重组质粒到鹅胚成纤维细胞和番鸭胚成纤维细胞中,核酸疫苗重组质粒pIGVP1和pIMVP分别转染鹅胚成纤维细胞和番鸭成纤维细胞中,于转染后72h收取细胞,细胞裂解液裂解后,经Western blot检测其表达产物可出现特异性反应带,证明表达产物具有很好的反应原性。     

新鲜烟叶中12种多酚类化合物的UPLC-MS-MS分析

多酚类物质含量高低是衡量烟叶质量的重要指标,快速准确测定其含量可为烟叶质量评价和多酚代谢研究提供技术支持.本研究将25 mg新鲜烟叶冻干粉末样品经5 mL 50％甲醇超声20 min提取后离心,上清液经0.22 μm滤膜过滤后用超高效液相色谱-串联质谱仪(UPLC-MS-MS)在多反应监测(MRM)模式下分析.研究发现,咖啡酸、阿魏酸、莨菪亭和香豆素等4种低含量多酚化合物在0.05～5.00 μg/mL范围内线性良好;新绿原酸、莨菪苷、山奈酚、山奈酚苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷等5种中等含量多酚化合物在0.2～40.0 μg/mL范围内线性良好;绿原酸、隐绿原酸和芸香苷等3种高含量多酚化合物在5～200 μg/mL范围内线性良好.12种多酚的回收率在84.7％～102％,相对标准偏差(n=6)在1.9％～5.7％,定量限在0.5～8.0μg/g.研究结果表明,本方法具有灵敏度高、专一性好和结果准确等特点,适用于新鲜烟叶中12种多酚含量的高通量分析,可为新鲜烟叶代谢过程中多酚含量的变化研究提供有效分析手段.     

SRB-生物硫铁复合材料对废弃煤矿地下水的修复研究

酸性矿山废水（AMD）中含有高浓度的硫酸盐和金属离子,对矿山生态环境造成了严重的危害。硫酸盐还原菌（SRB）可以将SO42-还原为S2-,沉淀金属离子,并生成生物硫铁,其处理效率较高。文章利用农业废弃物秸秆制备SRB的缓释碳源,考察了不同形式的碳源条件下SRB对酸性矿山废水特征污染组分的处理效果,并结合SRB原位生成的生物硫铁包覆颗粒,制备得到SRB-生物硫铁复合材料,通过批量实验和动态柱实验考查SRB-生物硫铁复合材料对高浓度模拟废水和实际矿井水的处理效果。结果显示：在pH为5.5时,将秸秆渣作为游离SRB的碳源是可行的,但与秸秆渣相比,秸秆生物炭的处理效率明显更高,将秸秆生物炭与乳酸钠结合制备的SRB碳源,激活SRB的时间更短,12 h内对SO42-和Fe2+的去除率分别达到了59.25%和79.56%。在此实验范围内,随着生物炭投加量的增大,去除效率逐渐提高,在p H为4.5～6.5的范围内,体系初始p H对SRB反应体系的处理效果影响不大。SRB-碳源与生物硫铁包覆颗粒结合后对高浓度的SO42-和Fe2+模拟废水能保持高效且持久的反应活性。动态柱实验表明SRB-生物炭-生物硫铁...     

大气二氧化碳浓度升高对银杏叶片内源激素的影响

采用开顶箱系统,研究了银杏叶片内源激素脱落酸(ABA)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)和赤霉素(GA₃)对大气CO₂浓度升高(环境CO₂浓度+350 μmol·mol^-1,EC)的响应.结果表明,EC处理能使ABA含量降低,与对照(CK)相比, ABA含量最大降低63.0%(处理后120 d).EC处理使叶片IAA和ZR含量增加,而且随着处理时间的延长,差异均达显著水平;IAA含量在处理后100 d为CK的2倍,ZR含量在处理后80 d时为CK的2.5倍.EC处理使叶片GA₃峰值提前出现. (IAA+GA₃+ZR)/ABA比值随着银杏的生长逐渐降低,在处理后期(处理后40～120 d)明显高于CK,表明大气CO₂浓度升高可促进银杏的生长发育.     

内生菌对提高植物抗盐碱性的研究进展

土壤盐碱化是制约我国农作物产量的主要因素之一。如何增强农作物的抗盐碱特性,已成为我国农业持续高效发展的重大课题。植物内生菌存在于植物内部,在增强植物抗病、抗虫、抗旱等胁迫能力方面具有一定作用。内生菌与植物共生关系对植物的显著影响这一现象引起了国内外学者的广泛关注。主要综述植物内生菌的多样性,并从植物的ROS清除系统、细胞中渗透调节物质、矿质元素吸收以及光合作用等方面来说明内生菌对植物耐盐碱能力的影响。     

烟碱降解菌的选育及改善上部烟叶品质研究

从烟叶叶面和植烟土壤中分离到降解烟碱的微生物18株,经初筛和复筛得到降解烟碱活性较高的微生物菌Nic22。对该菌株产酶培养条件进行优化研究,实验表明:Nic22降解烟碱效果受到多种因素的影响,添加适量的精制淀粉和(NH4)2SO4作为外加碳氮源可明显促进烟碱的降解,适宜的摇瓶培养温度、pH和时间分别为30℃、6.0~7.0和9h。采用Nic22菌株所产酶液对上部烟叶进行处理试验,卷烟评吸结果表明:上部烟叶经酶液处理可明显减轻杂气和刺激性,抽吸品质得到显著提高。     

基于学科前沿案例的“食品酶学和酶工程”教学改革与实践

食品酶学与酶工程是食品类专业的一门重要专业课程,内容涵盖酶学基础理论、酶工程技术以及酶在食品工业中的应用。针对当前教学内容与学科前沿存在知识差距,本课程精心挖掘学科前沿案例,不断调整优化课程内容,让学生所学能够与时俱进。以学科前沿案例的主题讨论为切入点,探索了成果导向教学(outcome-basededucation,OBE)理念下的问题导向学习(problem-based learning,PBL)教学模式,强化师生互动和生生互动,提高学生的积极性和参与度。构建多元化考核方式,侧重评价学生的学习过程中的表现。课程教学改革实现夯实基础知识和拓展学科前沿的双管齐下,培养了学生分析问题、设计解决方案、团队协作等方面能力,可为食品酶学与酶工程及相关课程的教学改革提供启发与思考。     

重组猪溶素的生物学活性分析

摘要：【目的】 通过研究重组猪溶素（Recombinant Suilysin, rSLY）的生物学活性来分析猪溶素(Suilysin, SLY)在猪链球菌致病过程中的作用。【方法】 利用原核表达载体pET30a(+)表达SC22株猪链球菌的猪溶素基因（sly）,经Ni2+亲和柱、阴离子交换柱和凝胶过滤纯化获得rSLY制品。用微量法测定rSLY对人红细胞的溶血效价,用LDH法测定rSLY对人外周血白细胞、人胚胎肺源细胞、人胚胎肝细胞和人胚胎心肌细胞的毒性强度,并用水溶性胆固醇、人血清和特异性抗体阻断rSLY的溶血活性。用Luminex测定rSLY刺激小鼠后血清中前炎性细胞因子的浓度。【结果】我们测得重组猪溶素的溶血效价仅为0.125 nmol/L,但1 nmol/L rSLY对人外周血白细胞等的细胞毒性强度为20%～25%。水溶性胆固醇可阻断等摩尔浓度的rSLY,人血清样品（游离胆固醇的平均浓度为1～2 mmol/L）仅能阻断1 nmol/L rSLY的溶血作用。在人血清中添加15 mg/ml兔源抗猪溶素IgG可使10 nmol/L rSLY 的裂解强度从70%降到5%, 将猪溶素浓度提高到100 nmol/L时,红细胞裂解强度为60%。C57BL/6小鼠经腹腔注射rSLY后血清中白介素6、趋化因子KC持续上升,这与注射牛血清白蛋白的对照组小鼠血清中相应细胞因子浓度有显著性差异。【结论】 重组猪溶素不仅能直接损伤宿主细胞还能导致机体产生强烈的炎症反应,并进而损伤招募到炎症部位的免疫细胞;血清阻断rSLY溶血作用的能力很有限,特异性抗猪溶素抗体的保护作用表现为剂量依赖性。     

烟叶果胶质分解菌的选育

从烟叶叶面分离到产果胶酶真菌 18株 ,在此基础上 ,进行液体培养 ,测定酶活 ,得到一株酶活性较高的黄曲霉DPE - 0 0 5。对该菌株产酶培养基的碳、氮源进行正交法研究 ,正交实验的结果表明 ,影响该菌产酶活性的因素依次为A(麸皮 ) >B(乳糖 ) >C(果胶 ) >D(硫酸铵 ) ,其最佳组合为A2B3C3D1。最适产酶条件为 :麸皮 4 0 % ,果胶 0 3% ,乳糖 1 5 % ,(NH4 ) 2 SO4 0 5 % ,KH2 PO4 0 2 5 % ,MgSO4 ·7H2 O 0 0 5 % ,NaNO30 0 2 % ,FeSO4 ·7H2 O 0 0 0 1% ,起始pH 6 0 ,在 2 8℃摇床培养 7d产酶量达到最高。以玉溪B3F烟叶为材料 ,施加DPE - 0 0 5菌株所产酶液 ,在 5 0℃贮存 12h。经化学成分检测 ,结果表明 ,果胶质降低了 18 15 %。     

肉牛杂交优势预测、评估及其应用研究

利用微卫星标记技术分析了８个肉 要交样本群体的遗传结构和遗传变异,预测了要种优势。在此基础上肉牛发校组合的实际杂交效果利用个体动物模型进行了评估,并提出了筛选最优杂交组合的分子数量遗传学综合评选新方法。其最优杂交组合的评选结果为,在丰宁、隆化代表区域,以海伏特、利木赞和夏洛来为父本的组合最好;在赞皇代表区域,以利木赞、安格斯和海伏特为父本的组合最好,在抚宁代表区域,以海伏特、利木赞和皮埃蒙特为父本