鱼类胚胎干细胞培养相关技术

胚胎干细胞(ESCs)具有自我更新能力和多向分化潜能,可作为生物学进程、胚胎发育和再生医学等研究的理想实验模型,由此人们对不同物种胚胎干细胞的开发产生了浓厚的兴趣,包括在鱼类、啮齿类和灵长类中建立了胚胎干细胞系。该文重点总结了鱼类中ESCs和ESCs样细胞系的培养技术和应用难点,讨论了鱼类胚胎细胞系因体外长期培养丢失多能性、染色体数目异常、生殖系传递能力和嵌合体形成效率低等问题,并探讨了通过核移植、半克隆技术作为代替途径来解决生殖系嵌合问题以及快速制备转基因品系鱼类模型,希望对优化鱼类ESCs培养技术提供参考。     

SOX转录因子家族在生殖细胞命运决定中的调控作用

SOX(SRY-related HMG-box)是一类含有HMG box DNA结合结构域的转录因子,自第一个SOX成员—性别决定基因SRY发现以来,先后共发现了20个成员。SOX不仅在胚胎发育、组织自稳态、神经发育、视网膜发育、骨组织形成等方面发挥重要调控功能,而且在生殖细胞的发生、分化和成熟等过程中也有重要的调控作用,如SOX17能调控胚胎干细胞向生殖细胞分化的过程中,使胚胎干细胞在体外可以诱导形成生殖细胞,为解决人类的不育问题带来了曙光。该文对近年来SOX家族在生殖细胞发育和命运决定方面的研究进展情况作一简述。     

"生存还是毁灭",发育还是阻滞--小鼠早胚体外发育2-细胞阻滞产生机制初析

在体外培养条件下,小鼠受精卵往往经一次分裂后就停滞在２－细胞,不能完成到达囊胚的后续发育过程,称作２－细胞阻滞。氧自由基伤害、培养液成分不平衡等外界因素都能引起阻滞。小鼠的２－细胞阻滞现象受细胞质内母型物质制约,具有品系依赖性。在阻滞品系小鼠胚胎的细胞质内可能缺乏某些重要的蛋白因子,在无外源信号的培养体系内不能继续分裂。发生阻滞的胚胎细胞内ＭＰＦ前体物虽然储备充足,但因无法去磷酸化激活而最终导致发     

p38在小鼠着床前胚胎中的表达(简报)(英文)

探讨p38 MAPK在小鼠着床前胚胎期的表达图式,并对其作用作初步分析。用免疫印迹法分析胚胎全裂解物中的p38蛋白。为考察p38在着床前发育中的作用,在胚胎培养液中添加p38专一性抑制剂SB203580。此外对同位素标记的胚胎作双向电泳分析,示踪ZGA(zygotic gene acti-vation,合子型基因激活)标志物TRC的表达情况。在卵母细胞中能检测到低水平的p38蛋白,而在合子中的检测度更低,表明p38是贮存于卵母细胞内的母型转录物,自减数分裂期随其它母型转录物一起逐步降解。到2细胞中期p38蛋白的表达量开始恢复,在4细胞时达到顶峰,在8细胞时又跌落。p38蛋白在2到4细胞期的表达量上升提示该蛋白在小鼠着床前胚胎发育中可能发挥一定作用。经与p38抑制剂SB203580共培养后的2细胞中期胚胎中仍能清晰检测到TRC,因而以TRC为标志的ZGA对SB203580不敏感。SB203580同样不能阻止胚胎发育到桑椹胚期。     

斑马鱼原始生殖细胞发育分子调控的研究进展

原始生殖细胞是生物个体中最早出现的生殖细胞.原始生殖细胞经过增殖及迁移,到达性腺位置,再经过一系列的分化最终发育成精子或者卵子.在斑马鱼中,原始生殖细胞最早出现在受精后3小时.而在小鼠中,原始生殖细胞最早出现在受精后7.25天.在斑马鱼原始生殖细胞发育的过程中,细胞迁移的启动、细胞数目的 变化、细胞干性的维持等均受到严...     

受精素和整合素在哺乳动物精卵质膜融合过程中是必需的吗?

精子膜蛋白受精素(fertilin)和卵子膜蛋白整合素(integrin)是精卵质膜融合侯选蛋白中最受关注之一,认为它们之间的相互作用介导了精卵质膜的融合。最近的基因剔除研究结果显示,受精素被剔除的精子和整合素α6β1被剔除的卵子仍具有一定的受精能力,因此,受精素和卵子整合素在精卵质膜融合中的重要作用值得进一步研究。     

组蛋白甲基化修饰酶与早期胚胎发育

早期胚胎发育是胚胎发育中细胞分裂与分化最为活跃的时期,也是合子型基因大规模转录的时期,而此时组蛋白的甲基化修饰也显示出动态学的变化。这一时期,在细胞内外信号的共同调控下,经历着一系列基因的激活与抑制,许多调控机制参与其中的调控。而近年来的研究表示,表观遗传学调控显示越来越重要的作用。组蛋白甲基化修饰是表观遗传学重要调控机制之一,在胚胎的早期发育过程中扮演着重要的角色。就近年来组蛋白甲基化修饰酶在早期胚胎发育过程中的作用与功能做一简要综述。     

哺乳动物早期胚胎发育调控过渡研究的进展

哺乳动物早期胚胎最初的发育是受卵母细胞发生期间就已贮存在细胞质内的mRNAs和蛋白质调控的;发育到特定阶段,母系遗留的物质被耗尽或降解,转由合子型基因组调控。在此过渡阶段,胚胎细胞核纤层中核纤层蛋白A和C消减,核与胞质之比值由小向大转变,细胞周期由短向长过渡,功能核仁建立;母型mRNA降解、消失,但是大部分母型rRNA、核糖体、snRNAs和snRNPs继续留存,后者与合子型mRNA前体的加工有关。合子型基基的表达需要增强子以激活启动子的活性。由台子基因组编码的最初蛋白质是一类分子量为68—74kD的热休克蛋白质。哺乳类早期胚胎发育调控过渡的实现,可能依赖于源自输卵管上皮细胞分泌的信号和相应的信号转导系统。有关机制已引起人们的极大兴趣。     

哺乳类早期胚胎发育阻滞的形成与突破

本文对有关哺乳类(包括人)着床前早期胚胎发育阻滞的形成与突破的研究近况作了概述。早期胚胎发育阻滞一般都发生在最初四个细胞周期中的某个长G_2相阶段,该时期恰好是贮存在胚胎细胞中源自母系的mRNA失活或降解、胚胎细胞自身基因组应该被激活的临界期,胚胎在这时对环境压力非常敏感。过氧化氢类物质在胚胎细胞内高含量累积也是导致发育阻滞的因素之一。早期胚胎的正常发育必须依赖于源自生殖道上皮细胞的信号,这类外源信号被初步认为蛋白质性质。提供某些生长因子,或清除微环境中有害物质等都将有助于 胚胎的正常发育。早期胚胎间的协同作用在体外胚胎正常发育中的正效应已引起人们的重视。     

组蛋白精氨酸甲基化与斑马鱼早期发育

发育是由基因的特定时空表达模式来调控的,其表观遗传机制已越来越受到关注。组蛋白精氨酸甲基化是一种重要的翻译后修饰,由蛋白质精氨酸甲基化酶催化产生,对染色体的结构与功能具有重要调控作用。不同位点的精氨酸甲基化与其相邻位点的翻译后修饰具有复杂的对话机制,并可招募或阻碍相关效应分子的结合,进而导致转录激活或抑制。斑马鱼作为一种重要的发育生物学研究模式动物,已为蛋白质精氨酸甲基化酶在早期发育过程中的生理功能的研究提供了大量资料。该文对组蛋白精氨酸甲基化的产生、对话调控机制及其对斑马鱼早期发育调控功能的研究进行综述。