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建立一种用乙酰化衍生处理低聚糖并用毛细管气相色谱-FID进行分析的方法。以1-甲基咪唑为催化剂并以乙酸酐为乙酰化试剂, 同时对植物样品中蔗糖、棉子糖和水苏糖等低聚糖乙酰化产物进行毛细管气相色谱分离和FID检测。确定了低聚糖乙酰化衍生物的毛细管气相色谱分析条件, 并对低聚糖乙酰化反应条件及色谱分离条件进行了优化。结果表明, 在80–1 000 ng·μL–1范围内线性关系良好, 蔗糖、棉子糖和水苏糖的相关系数(R)分别为0.995 2、0.995 7和0.987 7, 并且精准度与回收率均较高。使用该方法对低聚糖进行乙酰化反应重现性好、所需样品材料及试剂量少且污染毒害小, 能够得到理想的分离、检测和定量分析效果, 适用于少量植物组织中低聚糖的定量分析。该方法在食品、医药检测和基础科学研究领域均具有广泛的适用性及参考价值。 相似文献
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改良Masson胶原纤维染色法在半薄切片中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
改良Masson胶原纤维染色法在半薄切片中的应用胥维勇,杨红,李科,杨群(四川省人民医院病理科成都,610072)在对2μm切片做Masson胶原纤维染色时,发现该染色法对肌纤维、胞质、红细胞染色不够鲜艳,着色浅,对比度差,针对这一现象、我们将Mas... 相似文献
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新兴的染色质靶向切割和标签化(clevage under target and tagment,CUT&Tag)技术利用转座酶在目标蛋白结合的DNA附近进行切割并对切割下的DNA片段进行标签化,通过后续的二代测序可以快速鉴定蛋白质-DNA相互作用,极大的简化了染色质免疫共沉淀测序(chromatin immunoprecipitation sequencing,ChIP-seq)的实验过程。CUT&Tag中转座酶完成标签化后需要DNA回收或其他后处理才能进行建库PCR,不同的回收方法对CUT&Tag结果有着显著的影响。通过建立生物素化转座体-链霉亲和素磁珠体系(streptavidin beads recovery CUT&Tag,srCUT&Tag),可以快速便捷地完成CUT&Tag的产物回收。本文在K562细胞中展开H3K4me3、RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymeraseⅡ,RNAPⅡ)、转录因子CTCF和HMGA1的CUT&Tag实验,并利用现有的乙醇沉淀、片段分选(solid-phase reversible immobilization,SPRI)磁珠回收和直接PCR法,以及本研究建立的srCUT&Tag方法对产物进行回收。结果表明,从整体上看,SPRI磁珠回收和srCUT&Tag方法着较高的回收效率,而乙醇沉淀法则回收效率低下。在全部4种CUT&Tag产物回收过程中,SPRI磁珠回收均会损失大部分小于150 bp的产物片段。在CTCF和HMGA1 CUT&Tag产物的回收中,直接PCR法则损失了大部分大于300 bp的片段并与其他回收方法的结果有较大的差别。因此,srCUT&Tag能够比其他三种回收方法提供更多更完整的测序信息。综上所述,新建立srCUT&Tag回收方法相比现有的CUT&Tag产物回收方法能提高建库效率并得到更好的数据质量,为表观遗传学研究提供了更好的技术选择。 相似文献
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建立一种用乙酰化衍生处理低聚糖并用毛细管气相色谱-FID进行分析的方法。以1-甲基咪唑为催化剂并以乙酸酐为乙酰化试剂,同时对植物样品中蔗糖、棉子糖和水苏糖等低聚糖乙酰化产物进行毛细管气相色谱分离和FID检测。确定了低聚糖乙酰化衍生物的毛细管气相色谱分析条件,并对低聚糖乙酰化反应条件及色谱分离条件进行了优化。结果表明,在80–1000ng·μL–1范围内线性关系良好,蔗糖、棉子糖和水苏糖的相关系数(R)分别为0.9952、0.9957和0.9877,并且精准度与回收率均较高。使用该方法对低聚糖进行乙酰化反应重现性好、所需样品材料及试剂量少且污染毒害小,能够得到理想的分离、检测和定量分析效果,适用于少量植物组织中低聚糖的定量分析。该方法在食品、医药检测和基础科学研究领域均具有广泛的适用性及参考价值。 相似文献
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不同条件下对改良PTAH染色效果的比较胥维勇,杨红,李科,杨群(四川省人民医院病理科成都610072)我们采用PTAH染色改良法(胃蛋白酶消化处理代替酸性高锰酸钾氧化和草酸漂白还原作用),目的在于更加清晰地显示横纹肌纤维的细微结构,并在室温、加热、微... 相似文献