全文获取类型
收费全文 | 2578篇 |
免费 | 310篇 |
国内免费 | 1284篇 |
学科分类
生物科学 | 4172篇 |
出版年
2024年 | 33篇 |
2023年 | 122篇 |
2022年 | 132篇 |
2021年 | 148篇 |
2020年 | 136篇 |
2019年 | 131篇 |
2018年 | 130篇 |
2017年 | 99篇 |
2016年 | 119篇 |
2015年 | 126篇 |
2014年 | 185篇 |
2013年 | 148篇 |
2012年 | 160篇 |
2011年 | 169篇 |
2010年 | 130篇 |
2009年 | 179篇 |
2008年 | 143篇 |
2007年 | 144篇 |
2006年 | 168篇 |
2005年 | 112篇 |
2004年 | 130篇 |
2003年 | 112篇 |
2002年 | 116篇 |
2001年 | 93篇 |
2000年 | 77篇 |
1999年 | 68篇 |
1998年 | 63篇 |
1997年 | 63篇 |
1996年 | 71篇 |
1995年 | 48篇 |
1994年 | 57篇 |
1993年 | 45篇 |
1992年 | 44篇 |
1991年 | 48篇 |
1990年 | 46篇 |
1989年 | 35篇 |
1988年 | 41篇 |
1987年 | 30篇 |
1986年 | 34篇 |
1985年 | 30篇 |
1984年 | 19篇 |
1983年 | 15篇 |
1982年 | 25篇 |
1981年 | 15篇 |
1980年 | 21篇 |
1979年 | 17篇 |
1965年 | 11篇 |
1963年 | 8篇 |
1959年 | 9篇 |
1955年 | 7篇 |
排序方式: 共有4172条查询结果,搜索用时 0 毫秒
101.
目的:构建干扰载体pSilencer 3.1-spl,并初步研究其对Spl基因的干扰作用.方法:根据Spl cDNA编码序列,设计并合成针对Spl基因的特异性RNA干扰片段,并将其克隆入pSilencer 3.1-Hl neo干扰载体中,构建Spl基因小干扰RNA(siRNA)真核表达载体pSilencer 3.1-Spl;分别将阴性对照载体pSilencer 3.1与重组载体pSilencer 3.1-Spl经脂质体LipofectAMINE2000介导转染HeLa细胞,采用RT-PCR、Western blot方法分别检测Spl基因的转录与表达水平.结果:构建了Spl基因siRNA真核表达载体pSilencer 3.1-Spl,经酶切、测序鉴定证实克隆正确,并在mRNA水平和蛋白水平证实了载体的干扰效果.结论:特异性siRNA能明显抑制Spl基因在HeLa细胞中的表达,为进一步研究Spl的生物学功能和作用机制奠定了实验基础. 相似文献
102.
目的:了解不同试剂在应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)以及巢式PCR方法在检测低拷贝数的HBV DNA量的差异与灵敏度.方法:用上海复星医学科技发展有限公司(A方法)检测出了68例HBV DNA结果为5.1× 101-1.0× 103拷贝数/毫升的低拷贝数标本.然后,三家不同公司的试剂(方法B、方法C、方法D)对这些样本进行复核.另外,巢式聚合酶链反应PCR法检测此68例标本.随访巢式PCR结果为阳性的10例低拷贝数HBV DNA的病人.结果:用四种方法(A、B、C、D)检测的68个样本的HBV DNA拷贝数结果如下:无拷贝(0,9,12,4);101-102 (21,17,18,22);102-103(47,36,28,35),大于103(0,6,10,7).同时,用巢式聚合酶链反应检测此68例标本,有55例检测为阳性,有13为阴性结果.巢式PCR结果为阳性的10例低拷贝数HBV DNA含量的病人,随访发现此10病人有8例均在1~3月后出现HBV DNA的反跳,并伴肝功能的不正常,其HBV DNA的含量均在104拷贝数/毫升以上.结论:目前所用的实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)的方法和试剂对低拷贝数HBV DNA存在不稳定性和不确定性.巢式PCR法对低拷贝数HBV DNA的检测灵敏度要远高于实时荧光定量PCR法.该研究提示测对抗病毒治疗过程中患者进行低拷贝数HBV DNA的检将提供有效的药物评价和预后信息. 相似文献
103.
可转化人工染色体与植物基因克隆 总被引:1,自引:0,他引:1
概要介绍了人工染色体的几种类型以及各种人工染色体克隆DNA片段的特点,着重说明了可转化人工染色体在植物基因克隆中应用的优越性,展示了其在植物基因克隆应用中的巨大潜力。 相似文献
104.
105.
水分胁迫下荔枝叶片过氧化物酶和IAA氧化酶活性的变化 总被引:14,自引:0,他引:14
以适应山地栽培的抗旱性较强的东刘1号和适应河边栽培的抗旱性较弱的陈紫2年生荔枝(Litchi chinensis Sonn.)实生苗为试验材料,研究了水分胁迫下叶片细胞胞质,与(细胞)壁以离子键结合和壁以共价键结合的过氧化的酶(POD)和IAA氧化酶活性的变化。结果表明:在叶片中POD主要是以与壁以离子键结合的POD存在,占总活性的51.15%-52.15%,其次是细胞胞质POD,占44.20%-44.74%,与壁以共价键结合的POD活性最低,仅占3.44%-3.65%。与POD不同,IAA氧化酶绝大多数存在于细胞胞质中,占总活性的88.93%-89.29%,其次是少量的与壁以离子键结合的IAA氧化酶,占7.32%-7.63%,与壁以共价键结合的IAA氧化酶活性最低,仅占3.39%-3.44%;2个品种间差异不明显。水分胁迫下,叶片细胞胞质以及与壁以离子键和壁以共价键结合的POD和IAA氧化酶(比)活性均上升,抗旱笥较强的品种上升的幅度均大于抗旱性较弱的品种。 相似文献
106.
肝原性糖尿病人血浆氨基酸谱改变及分析 总被引:1,自引:0,他引:1
为探讨肝原性糖尿病人血浆氨基酸谱变化特点 ,对 6 0例病人进行 1 7种氨基酸检测和支芳比值分析 ,并设立慢性肝病组和糖尿病组作两两对照。结果显示 :观察组血浆芳香族氨基酸增高 ,部分支链氨基酸下降 ;支芳比值降低。成糖氨基酸中缬氨酸改变明显 ,与两组比较均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :肝原性糖尿病人血浆氨基酸代谢紊乱 ,与慢性肝病、糖尿病改变均不同 ,在进行保肝治疗和营养支持时要针对其特点 ,科学合理地补充氨基酸和能量 相似文献
107.
离子型谷氨酸受体(iGLuR)是哺乳动物中一类由L-氨基酸(如谷氨酸、甘氨酸)等配体门控的阳离子通道, 具有调节兴奋性神经信号传递和引导神经元发育等分子功能。1998年研究者在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中发现了20个与iGLuRs同源的序列(即AtGLRs), 它们的功能涉及植物光信号传递、根尖分生细胞活性、花粉管生长、胞质Ca2+流以及应答多种生物和非生物环境胁迫等。该文从谷氨酸受体(GLR)的结构特征、离子通道激活与配体的关系、表达模式及可能的生物学功能等方面, 综述了近十几年来关于植物GLR和氨基酸信号的研究成果, 旨在为相关领域的同行提供有益的参考。 相似文献
108.
CpGmotif是以CpG二核苷酸为核心的,未甲基化的特殊的DNA序列,在微生物基因组中的出现频率高于在脊椎动物中的出现频率,近年来发现这种特殊的基序具有许多免疫调节作用。如刺激淋巴细胞增殖,分泌细胞因子,产生IgG2a类抗体,诱导Th1类应答,本介绍这种独特的CpGmotif的特征,可能的调节机制及应用前景。 相似文献
109.
鲮鱼遗传改良的研究——Ⅰ.杂交育种和遗传性状分析 总被引:5,自引:0,他引:5
本文介绍用杂交选育方法改良鲮鱼(Cirrhinus molitorella)耐低温能力的试验经过和已取得的进展。同时,分析讨论了杂交后代(一代和二代)性状遗传的某些结果。对鱼类低温适应和抗冻、抗寒等方面的研究进展作了介绍和讨论,并认为只有把鱼类耐低温性状遗传的分子机理彻底阐明,人们才有可能直接利用基因工程技术定向地改良像鲮鱼等不耐寒物种的抗寒性能。此外,我们也对如何改进鱼类杂交选育的技术措施提出一些意见。 相似文献
110.
大白菜包叶特异基因的克隆及其结构特征和表达方式 总被引:2,自引:0,他引:2
大白菜营养生长经历幼苗期、莲座期、包心期和结球期4个生育时期,每个时期分别以幼叶、莲座叶、包叶和球叶为主要形态标志.构建了大白菜包心早期茎尖组织特异的cDNA文库,分别与莲座叶和包叶cDNA两个探针进行差异杂交,筛选出一个全长的cDNA克隆BcpLH.DNA序列和推导氨基酸序列同源性比较表明,该基因编码的蛋白质含有两个双链RNA结合结构域(dsRNA-binding domains),与人和小鼠dsRNA结合蛋白基因TRBP具有较高的同源区域.PCR表达分析的结果表明,BcpLH基因主要在包心期的包叶组织中表达.在包心期用IAA涂抹植株显著增加了包叶中BcpLH基因的转录产物.据此认为,BcpLH基因与包叶的发生和叶球的形成有关,它的表达受生长素的诱导调节. 相似文献