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用简并寡核苷酸引物构建人类染色体区带特异性探针池的技术 总被引:2,自引:0,他引:2
目的建立快速有效构建人类染色体区带特异性探针池及其文库的技术。方法显微切割人类染色体3p23-p26,3q21-q22,4p12-p16区带,用简并寡核苷酸引物-PCR(degenerateoligonucleotiedprimered-PCR,DOP-PCR)扩增,并用荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)检测扩增产物来源,再将区带特异性扩增产物克隆于pUC19载体构建区带特异性文库,以及用α-32PATP标记的gDNA行菌落原位杂交。结果经FISH证实,3p23-p26,3q21-q22,4p12-p16探针池均在切割相应区带出现特异性信号。其中3q21-q22获得的1.2×104个阳性克隆。随机分析30个含插入片段的白色菌落,其插入片段平均约420bp。220个白色克隆菌落原位杂交示单拷贝和低度重复序列占81%(178/220)。结论改进的显微切割结合DOP-PCR为人类染色体探针池及文库构建建立了一个简易、高效的方法,这将有助于基因克隆和人类基因的全序列分析。 相似文献
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目的:针对PP2A内源性抑制剂SET基因的不同部位,构建靶向SET的shRNA真核表达质粒,鉴定并筛选出最佳抑制效率的表达质粒.方法:针对SET基因的不同部位设计4对短发卡RNA(shRNA)的寡核苷酸片段,克隆到真核表达载体pGPU6中,构建靶向SET的shRNA真核表达质粒pGPU6/GFP/Neo-SET-shR... 相似文献
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骶髂关节注射糖皮质激素治疗血清阴性脊柱关节病146例 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨骶髂关节注射糖皮质激素治疗血清阴性脊柱关节病的疗效.方法 在CT引导下,经臀部皮肤作骶髂关节穿刺,注入复方倍他米松进行治疗.结果 2个月内下腰痛和骶髂关节的压痛疗效优于单纯口服药组,但3~12个月疗效不如单纯口服药组,在12~36个月问仍有有部分病人有效.阻止骶髂关节炎症CT影像学改变方面,36个月内均优于单纯口服药组.结论 骶髂关节注射糖皮质激素对血清阴性脊柱关节病下腰痛、骶髂关节压痛、骶髂关节炎症CT影像学改变有一定疗效. 相似文献
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目的 :为了确定我国汉族人群遗传多态性片段大小范围与法国人群的差异 ,更好的进行基因组扫描和个体识别等方面研究。方法 :4 0 0个微卫星位点分别在 32个反应管中进行扩增。在 5 μl反应体系中加 6~ 17对PCR引物 ,多个微卫星位点同时扩增 ,产物在ABI377XLDNA测序仪上进行电泳。结果 :4 0 0个微卫星位点共有 30 6个有满意的结果 ,其中 12 4个微卫星位点与法国CEPH家系存在片段范围的差异。结论 :遗传多态性片段大小范围在种族间存在较大差异 ;在对中国汉族人群进行基因分型时 ,应在Genethon提供的范围基础上向两侧各扩大 10bp。 相似文献
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患者女,38岁,因“面部红斑9年”于2005年11月23日入院。曾于1996年7月无诱因面部出现散在性紫红色斑,脱屑,伴发热,体温38.5cc,在某医院查抗核抗体(ANA)阳性,抗双链DNA(ds—DNA)抗体阳性,尿蛋白(+++),按系统性红斑狼疮(SLE)给予大剂量泼尼松、环磷酰胺(量不详)治疗2个月,效果欠佳,随予人血丙种球蛋白针剂5ml肌肉注射(以下简称肌注),2d后出现失眠、多梦、 相似文献
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中国迟发型2型糖尿病患者葡萄糖激酶基因突变研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:探讨中国迟发型2型糖尿病患者葡萄糖激酶(glucokinase,GCK)基因的突变情况。方法:收集了中国汉族47个迟发型2型糖尿病(1ate-onset Type 2 diabetes)家系,应用多聚酶链反应-单链构像多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)的分析方法,对先证者GCK基因12个外显子进行突变检测。结果:6,9号外显于SSCP电泳时,出现异常电泳条带。测序证实在6号内合子38bp处发生C→T的单个碱基改变,变异基因频率为35.1%;9号内合于8bp处发生C→T的单个碱基改变,变异基因颠率为57.5%。结论:发现了中国人两个单核苷酸多态位点:IVS6—38C→T;IVS9—8C→T。GCK基因突变不是中国汉族迟发型2型糖尿病的主要致病原因。 相似文献
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目的 从自身免疫和分子遗传学两个角度,探讨常见胰岛自身抗体阴性的1型糖尿病患者的病因。方法 对33例GAD-Ab、IA2-Ab、IAA及TGA、TPO-Ab等自身抗体检测均为阴性的、以自发酮症起病的糖尿病患者进行少见型胰岛自身抗体——羧基肽酶H抗体((2PH-Ab)、SOX13(ICA12)抗体以及MODY3(HNF-1d)、MODY6(NeuroD1/Beta2)和线粒体基因突变的检测。CPH-Ab及SOXl3抗体以放射配体法测定,MODY3、MODY6基因突变的检测采用PCR-SSCP-测序法,线粒体基因突变的检测采用.PCR-RFLP法。结果 33例患者中,发现2例为SOXl3抗体阳性,而未发现CPH-Ab阳性病例。基因突变检测发现1例为HNF-1αR321H(CGC→CAC)突变,1例为线粒体NDImt3316 G→A突变。结论 自身免疫和单基因突变(如HNF-1α、线粒体基因突变)是部分常见型胰岛自身抗体阴性Ⅰ型糖尿病患者的病因;诊断特发性Ⅰ型糖尿病需进一步排除自身免疫及MODY和线粒体糖尿病。 相似文献
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依地酸钙钠治疗系统性硬化症肺纤维化18例疗效观察 总被引:2,自引:0,他引:2
系统性硬化症(SSc)是一全身性自身免疫性疾病,其特点为结缔组织广泛的纤维化,常累及皮肤和内脏器官,肺部有丰富的结缔组织,故肺是第2位易受累的内脏器官。目前对于本病的治疗缺乏有效的方法。作者在临床中使用依地酸钙钠(EDTA)治疗本病收到较好的疗效,现报告如下。 相似文献
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目的探讨腹腔镜肝切除术的应用指征、技术要点和疗效.方法回顾分析本研究所463例腹腔镜肝切除术患者的临床资料和随访结果.结果2007年3月1日至2011年3月31日共完成各类腹腔镜肝切除手术463例.其中原发性肝癌165例,转移性肝癌29例,肝血管瘤143例,肝胆管结石病81例,其他肝脏良性占位病变(肝血管平滑肌脂肪瘤、肝细胞腺瘤、局灶性结节增生、慢性肝脓肿等)45例.手术方式包括腹腔镜下左肝外叶切除术93例,左半肝切除71例,超左半肝切除4例,右半肝切除29例,右肝后叶切除24例,Ⅵ段切除56例,超右半肝切除2例,中肝切除8例,特殊部位肝段切除(Ⅶ/Ⅷ段、Ⅳa、尾叶及Ⅵ段、Ⅶ段交界处)41例,病变局部不规则性切除121例,两个以上部位联合切除14例.手术时间(244.71±105.07)min,术中出血量(460.26±425.81)ml,无手术死亡,术后并发症发生率9.29%,平均住院时间(15.51±4.36)d.194例肝脏恶性肿瘤患者中185例获得2~50个月随访,术后1年、3年总体生存率为90.8%和84.2%,无瘤生存率为87.9%和73.7%.结论腹腔镜肝切除术作为一种微创治疗手段,可选择性应用于肝脏各个部位、各类病变的手术治疗.该法且具有创伤小、恢复快、切口美容的优点.其近期疗效优于开腹手术,远期疗效与开腹手术相当.肝脏良性病变、小肝癌和转移性肝癌是现阶段腹腔镜肝切除术较理想的适应证. 相似文献