p16INK4a在子宫颈细胞学分级的临床意义

目的:研究在意义不明的不典型鳞状细胞(Atypical squamous cells of undetermined significance,ASC-US),不能排除高度上皮内瘤变的不典型鳞状细胞(Atypical squamous cells,cannot exclude high-grade squamous intraepithelial lesion,ASC-H),低度鳞状上皮内病变(Low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL),高度鳞状上皮内病变(High-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)中p16INK4a蛋白和HPV16/18的表达水平及意义.方法:应用免疫组织化学技术和原位分子杂交技术,对89例子宫颈细胞涂片样本中p16INK4a蛋白及HPV16/18型DNA进行检测.结果:p16INK4a蛋白阳性率随着子宫颈病变程度的加重而升高,LSIL、HSIL及ASC-H的p16INK4a蛋白阳性率均高于ASC-US(P<0.05);ASC-US和LSIL的p16INK4a阳性表达与HPV16/18阳性表达无差异性;LSIL和ASC-US的HPV16/18阳性表达无差异性.结论:子宫颈细胞涂片样本中p16INK4a蛋白检测能协助子宫颈细胞学诊断分级,尤其对于ASC-US的病例.需同时做p16INK4a免疫组织化学检查,以帮助临床医生选择恰当的处理方式.     

人胃癌IFN-γ-STAT1通路的作用及其机制

目的:分析人胃癌组织和胃癌SGC7901细胞中STAT1、Caspase-7及p21waf的表达关系,并探讨胃癌中IFN-γ-STAT1分子通路特点.方法:人胃癌组织免疫组织化学染色,IFN-γ及STAT1反义寡核苷酸处理SGC7901细胞.免疫细胞化学、RT-PCR及图像分析的方法检测mRNA和蛋白水平变化,应用Hoechest 33258观察细胞凋亡.结果:人胃癌组织Caspase-7与STAT1和p21 waf正相关(r=0.32,0.22,均P<0.05); SGC7901细胞经IFN-γ处理后,STAT1、Caspase-7和p21 wafmRNA和蛋白表达明显上升(P<0.05).经IFN-和不同浓度STAT1反义寡核苷酸联合处理后,STAT1 mRNA和蛋白表达较IFN-γ单独处理明显下降,有浓度依赖性(P<0.05).Caspase-7和P21waf蛋白表达较IFN-γ单独处理明显下降,有浓度依赖性(P<0.05),但是mRNA表达量则随着STAT1反义寡核苷酸浓度变化,出现Caspase-7先下降后上升,p21 waf先上升后下降的变化.经IFN-γ和STAT1反义寡核苷酸处理后细胞无明显凋亡.结论:人胃癌组织和胃癌细胞系SGC7901中存在IFN-γ-STAT1通路,且可上调Caspase-7和p21 waf的表达,但无明显凋亡调控作用; 胃癌IFN-γ-STAT1分子通路的下游分子在mRNA水平和蛋白水平表达变化不一致.     

免疫组化PV二步法与SP三步法比较

目的:用两种不同的免疫组化方法二步法和三步法分别在胃癌组织中进行ER-α36染色结果的比较,寻求不同免疫组化原理的染色试剂盒对实验结果的影响。方法:利用两种不同的试剂盒研究相同的胃癌微阵列芯片(共352点,以肝组织作为定位标志),通过比较两种免疫组化方法在相同组织上表达的不同做比较。结果:三步法制片结果比二步法背景低,阳性率低,非特异性着色小,结果明确易读;而二步法较三步法操作简单,检查阳性率高,阳性强度高。结论:针对一抗为ER-α36的免疫组化染色,三步法虽然实验耗时比较长,但实验结果较好,明确易读,适合科学研究。二步法较易出结果,灵敏度较高,阳性强度高,较易出背景着色,假阳性率高,故不适于科学研究,但因为操作方便,检出阳性率较三步法高,对于ER-α36弱表达的病例不容易漏诊,且能较快出结果,故可考虑在临床病理诊断中选择应用。     

一个新的视网膜母细胞瘤结合蛋白的分子克隆和鉴定

视网膜母细胞瘤蛋白家族包括RB、p107和p130。RB是研究得最为广泛的家族成员,是肿瘤抑制基因。它与其结合蛋白发生作用,如与E2F转录因子结合形成RB-E2F-DNA复合物,则阻止了其它序列特异性的DNA结合蛋白与启动子元件接近,从而抑制基因的转录。 本文分子克隆和鉴定一个新的视网膜母细胞瘤结合蛋白,称"Rim”为蛋白。作者应用修改的酵母双杂交系统筛选所获得的克隆并进行EST同源搜寻,得到了一个包含有3＇和5＇UTR,编码897个氨基酸     

清热化湿、凉血活血法治疗慢性肾衰36例疗效观察

目的观察清热化湿、凉血活血法治疗慢性肾衰的临床疗效。方法将66例慢性肾衰Ⅱ、Ⅲ期患者随机分为治疗组36例与对照组30例,两组均予西医常规治疗,治疗组辨证服用清热化湿、凉血活血中药汤剂;比较两组治疗后血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血色素(Hb)、24h尿蛋白定量的变化及中医症状积分改善情况。结果治疗组中Scr、BUN、Hb均较对照组明显改善,24h尿蛋白定量亦明显改善;治疗组总有效率88.89%,对照组为73.33%。结论清热化湿、凉血活血法能明显改善肾功能,降低Scr、BUN、24h尿蛋白定量及中医症状积分,提高生活质量,延缓慢性肾衰的进程,延长患者生命。     

应用组织芯片技术研究STAT1和Survivin在全数淋巴结检查资料胃癌中的表达(英文)

目的本研究旨在探讨有全数淋巴结检查的胃癌病例中STAT1与Survivin的相关性以及两者与淋巴结转移、浸润深度的关系及其预后意义。方法收集江汉大学附属医院1988-2003年胃癌根治性手术切除,有完整病理学检查资料的标本140例。经溶脂法检查全数切除淋巴结、4μm间断连续切片、常规HE染色和免疫组化染色,确定有无淋巴结转移。构建胃癌组织微阵列,免疫组织化学染色检测STAT1蛋白和Survivin蛋白在胃癌组织中的表达情况。数据经SPSS12．0统计学软件进行Spearman等级相关分析,Kaplan-Meyer法Log-rank检验及Cox模型回归分析(SPSS12．0)。结果构建的140例胃癌组织微阵列中,符合分析要求的共110例(组织微阵列利用率为78．6％)。110例中共检出淋巴结7079枚,平均64．4枚／例。其中89例有淋巴结转移,共检出转移淋巴结1679枚。Survivin阳性率为52．7％(58／110),STAT1阳性率为40%(44／110)。STAT1表达与Survivin表达负相关(r=-0．19,P=0．04)。STAT1与浸润深度(r=-0．21,P=0．02)负相关。Sur- vivin表达与UICC N分期(r=-0．24,P=0．01)及组织学分型(r=-0．21,P=0．03)负相关。两者和生存无关。Cox模型回归多因素分析,UICC淋巴结分期与预后相关(X2=4．85,P=0．028)。结论胃癌STAT1蛋白表达与Survivin蛋白表达负相关。两者与生存无关。STAT1是推测进展期胃癌的分子标志物。Survivin是推测胃癌淋巴结转移的分子标志物。UICC胃癌淋巴结分期是重要的预后指标。     

口腔鳞状细胞癌中SPINK5的表达及其对预后的影响

目的:深入探讨SPINK5在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中的表达水平与其临床发展和预后的关系,分析其潜在的机制和临床价值,评估其作为靶向治疗基因的潜力。方法:表达量及临床病理数据来自于TCGA数据库中筛选和获取口腔组织来源的癌症病例样本。分析OSCC临床病理特征及预后和SPINK5的相关性。SPINK5在OSCC组织中的差异表达通过免疫组化进行验证。采用基因功能富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)方法预测SPINK5调控的信号通路。结果:SPINK5表达量与OSCC临床预后具有显著相关性(P<0.05)。高表达组生存时间较长。SPINK5在正常黏膜组织中的表达量均高于OSCC,且差异有统计学意义(P<0.05)。SPINK5差异表达的基因富集到了化学刺激的感官知觉、RNA的基因沉默、RNA介导的翻译抑制导致的基因沉默、气味的感官知觉4个生物学过程,和嗅觉受体活动、转录后基因沉默中涉及的RNA结合、mRNA的3’UTR、嗅觉结合4个分子功能。结论:在OSCC中,SPINK5的...     

S1P2受体shRNA腺病毒载体的构建及筛选

目的 为探讨S1P2受体介导血管内皮细胞衰老的机制,构建和筛选特异性S1P2受体shRNA腺病毒载体.方法 设计并合成4对靶向S1P2受体的单链寡核苷酸(ss oligo),经变性退火为双链寡核苷酸(ds oligo)插入穿梭质粒pRNAT-H1.1/Shuttle载体,测序正确后经脂质体介导转染人肺动脉内皮细胞(HPAEC),通过RT-PCR方法筛选对S1P2受体基因沉默效果最佳的穿梭质粒pRNAT-H1.1/Shuttle-shRNA,提取质粒DNA,经双酶切,回收S1P2受体基因沉默效果最佳的shRNA片段,亚克隆到腺病毒表达载体(pAdeno-X),筛选出正确重组子,转染HEK 293A细胞,收集重组的腺病毒,测定病毒滴度,通过Western blot方法检测S1P2受体沉默效果.结果 测序结果证实所构建的pRNAT-H1.1/Shuttle-shRNA质粒正确,并从4对ds oligos筛选出对S1P2受体沉默效果最佳的穿梭质粒pRNAT-H1.1/Shuttle-shRNA,经亚克隆到腺病毒表达载体.转染人肺动脉内皮细胞后,Western印迹检测显示构建的腺病毒载体pAdeno-shRNA对S1P2受体蛋白的沉默有明显效果.结论 成功地构建和筛选出介导特异性shRNA-S1P2的重组腺病毒.     

腹腔镜肝切除术临床应用的经验体会

目的探讨腹腔镜肝切除术的应用指征、技术要点和疗效.方法回顾分析本研究所463例腹腔镜肝切除术患者的临床资料和随访结果.结果2007年3月1日至2011年3月31日共完成各类腹腔镜肝切除手术463例.其中原发性肝癌165例,转移性肝癌29例,肝血管瘤143例,肝胆管结石病81例,其他肝脏良性占位病变(肝血管平滑肌脂肪瘤、肝细胞腺瘤、局灶性结节增生、慢性肝脓肿等)45例.手术方式包括腹腔镜下左肝外叶切除术93例,左半肝切除71例,超左半肝切除4例,右半肝切除29例,右肝后叶切除24例,Ⅵ段切除56例,超右半肝切除2例,中肝切除8例,特殊部位肝段切除(Ⅶ/Ⅷ段、Ⅳa、尾叶及Ⅵ段、Ⅶ段交界处)41例,病变局部不规则性切除121例,两个以上部位联合切除14例.手术时间(244.71±105.07)min,术中出血量(460.26±425.81)ml,无手术死亡,术后并发症发生率9.29%,平均住院时间(15.51±4.36)d.194例肝脏恶性肿瘤患者中185例获得2～50个月随访,术后1年、3年总体生存率为90.8%和84.2%,无瘤生存率为87.9%和73.7%.结论腹腔镜肝切除术作为一种微创治疗手段,可选择性应用于肝脏各个部位、各类病变的手术治疗.该法且具有创伤小、恢复快、切口美容的优点.其近期疗效优于开腹手术,远期疗效与开腹手术相当.肝脏良性病变、小肝癌和转移性肝癌是现阶段腹腔镜肝切除术较理想的适应证.