多参数流式细胞术分析肺癌幼稚细胞免疫表型CD133、CD34、CD44的表达

目的 研究CD133、CD34、CD44在肺癌组织中的表达及其不同表达组合所构成的细胞亚群.方法 收集术前病理确诊的肺癌新鲜组织40例,外周正常肺组织10例,制备成单细胞悬液,选用CD133、CD34、CD44、CD117、CD43、CD45、LIN(CD2,CD3,CD31,CD64)单克隆抗体荧光染色,采用流式细胞仪分析上述表面抗原在肺癌组织及正常肺组织细胞中的分布,通过流式双参数图分析CD133、CD34、CD44双抗原组合表达形成的细胞亚群.结果 肺癌实质细胞中(LIN系列及CD45阴性),CD133、CD34、CD44表达弱阳性,CD117、CD43阴性;非参数秩和检验示,CD133、CD34、CD44在肺癌及正常肺组织幼稚细胞中表达水平差异无统计学意义;在肺鳞癌与肺腺癌细胞中,CD44 、CD133-CD34-、CD133 CD44 、CD133 CD44-、CD133 CD34 、CD133-CD34 及CD133-CD44 的表达量不同(P<0.05),其余表型的差异均无统计学意义.聚类分析显示,肺癌幼稚细胞可主要归类为4种亚型.结论 CD133、CD34、CD44可能是肺癌幼稚细胞标记,有利于更好研究肺癌细胞发育和演变的过程.     

端粒酶催化亚单位基因启动子调控Hsv-tk/GCV系统对肺癌细胞A549选择性杀伤作用的研究

目的研究人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit,hTERT)基因启动子调控单纯疱疹胸苷激酶/更昔洛韦(herpes simplex virus-thymidine kinase/ganciclovir,Hsv-tk/GCV)治疗系统对人肺癌细胞株A549的选择体外杀伤作用。方法(1)用脂质体法将hTERT启动子和sv40启动子调控的tk基因表达质粒(pGL3-hTp-tk和pGL3-sv40-tk)转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞株A549及端粒酶阴性的人胚肺成纤维细胞株MRC-5,用逆转录-PCR方法检测转染细胞中tk基因的表达情况;(2)用MTT法检测GCV对上述转染细胞体外增殖的抑制作用;(3)用流式细胞仪检测GCV对上述转染细胞凋亡和细胞周期的影响。结果(1)转染pGL3-sv40-tk的细胞A549、MRC-5和转染pGL3-hTp-tk的A549均有tkmRNA表达,转染pGL3-hTp-tk的MRC-5无tkmRNA表达;(2)GCV对转染pGL3-sv40-tk的细胞A549、MRC-5和转染pGL3-hTp-tk的A549体外增殖均有明显抑制作用,对转染pGL3-hTp-tk的MRC-5无明显抑制作用;(3)转染pGL3-sv40-tk的A549、MRC-5和转染pGL3-hTp-tk的A549细胞,GCV处理后细胞凋亡指数(21.58%、9.35%和23.19%)均显著高于转染pGL3-hTp的A549和MRC-5细胞(0.78%和0.55%)及空白对照A549和MRC-5细胞(2.17%和0.60%),转染pGL3-hTp-tk的MRC-5细胞凋亡指数(0.88%)无明显升高。结论hTERT启动子调控Hsv-tk基因可以在肺癌细胞中选择性表达,hTERT调控的Hsv-tk/GCV治疗系统对肺癌细胞体外增殖具有靶向性抑制作用。     

肺部磨玻璃密度影研究进展

越来越多的证据表明肺部磨玻璃密度影与早期支气管肺癌,尤其是早期细支气管肺泡癌密切相关。随着高分辨电子计算机X射线断层扫描技术(high-resolution computed tomography,HRCT)和正电子发射断层成像术(positron emission tomography/computed tomography,PET/CT)的应用和发展,越来越多的肺部磨玻璃密度影被发现。结合磨玻璃密度影比率、结节大小、快速组织病理学检查等结果做出合理的判断是否行手术切除,不能盲目扩大手术指征和手术范围。因此,肺部局限性磨玻璃密度影的早期发现及正确诊断对提高患者预后有重要意义。     

治疗前淋巴细胞/单核细胞比值与中国食管鳞癌患者预后关系的Meta分析

目的 探究治疗前淋巴细胞/单核细胞比值(lymphocyte/monocyte ratio, LMR)与中国食管鳞癌(Chinese esophageal squamous carcinoma, CESCC)患者预后的相关性。方法 计算机检索PubMed、EMBASE、The Cochrane Library、Web of Science、CNKI、VIP、SinoMed等数据库公开发表的文献,检索时间为建库至2018年12月31日,收集有关LMR与CESCC患者预后关系的文献,应用Stata 12.0软件进行Meta分析,合并值为风险比(hazard ratio,HR),主要终点事件为总生存率(overall survival, OS),次要终点事件为无病生存率(disease-free survival, DFS)和肿瘤相关生存率(cancer-specific survival, CSS)。结果 共纳入11项回顾性研究,总计4545例患者; Meta分析结果显示,相比于治疗前LMR较高的患者, LMR较低患者OS明显更低,差异有统计学意义[HR=1.49,95%置信区间(confidence interval, CI):1.25～1.79,P=0.000],伴较高异质性(I²=58.5%);基于治疗方案和临界值的亚组分析进一步论证了LMR与OS的关系;同时,治疗前LMR也与DFS(HR=1.47,5% CI:1.24～1.74, P=0.000)、CSS (HR=1.64,5% CI:1.29～2.08, P=0.000)显著相关;通过逐一剔除单项研究的敏感度分析结果显示结论无显著改变,说明该项Meta分析的结论较为稳定、可靠;发表偏倚检测结果表明不存在显著的发表偏倚。结论 治疗前LMR较低与CESCC患者预后不良存在显著联系,LMR可能是CESCC患者的一个独立预后影响因素,但仍需更多大样本的前瞻性研究进一步论证。     

单胸腔引流管在肺癌术后快速康复中的应用

目的比较肺癌肺叶切除术后单、双胸腔引流管的临床效果及单胸腔引流管在快速康复中的应用。方法纳入2009年3～12月四川大学华西医院93例肺癌患者,将其分为单胸腔引流管组[46例,男39例、女7例,年龄（58．4±9．5）岁和双胸腔引流管组（47例,男32例、女15例,年龄（58．2±9．0）岁]。观察两组的引流量、引流管持续时间、术后住院时间、拔管后积气与积液。结果双胸腔引流管组中全胸腔镜肺叶切除术（video-assistedthoracicsurgery,VATS）患者数显著高于单胸腔引流管组,而开胸手术数显著少于单胸腔引流管组（P〈0．05）。双胸腔引流管组引流量显著多于单胸腔引流管组[（824．4±612．5）mlVS．（510．7±406．7）ml,P〈0．05]。单胸腔引流管组与双胸腔引流管组术后带管时间、住院时间、皮下气肿、胸腔积气、积液和再次置管差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论肺癌肺叶切除术单胸腔引流管引流效果优于或与双胸腔引流管效果相当,且带管时间有缩短的趋势。     

术前短期综合肺康复训练对肺癌合并轻中度慢性阻塞性肺病患者的影响:一项前瞻性随机对照试验

背景与目的 围术期肺康复训练计划能够加速肺癌手术患者的术后快速康复,但是其应用方案、时间等仍未统一.肺癌合并慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的手术患者,由于其相对较差的肺功能及心肺耐力,一直以来,都是肺部相关并发症的高危人群.本研究旨在探讨术前短期综合肺康复训练对肺癌合并轻中度COPD手术患者的影响.方法 前瞻性分析2015年3月11日至2015年11月31日四川大学华西医院胸外科行肺叶切除的原发性非小细胞癌合并轻中度COPD患者48例,随机分成实验组和对照组;实验组患者术前完成一周短期综合肺康复方案,包括以雾化吸入普米克令舒、博利康尼和沐舒坦静脉滴注为主的药物康复以及呼吸训练+耐力训练(Nustep)的物理康复;而对照组患者按常规术前准备进行.结果 最终24例患者纳入实验组,24例患者纳入对照组:实验组患者的术后住院时间[(6.17±2.91)d vs(8.08±2.21)d;P=0.013]和术后抗生素使用时间[(3.61±2.53) d vs(5.36±3.12)d;P=0.032]低于对照组,总住院费用[(46,455.6±5,080.9)￥vs (45,536.0±4,195.8)￥,P=0.498]、住院材料费用[(21,155.5±10,512.1)￥vs(21,488.8±3,470.6)￥,P=0.883]、住院药物费用[(7,760.3±2,366.0)￥vs(6,993.0±2,022.5) ￥P=0.223]在两组间均无统计学差异;实验组患者对比训练前后,最大峰值流速(peak expiratory flow,PEF)[(268.40±123.94) L/min vs(343.71±123.92) L/min;P＜0.001]、6分钟运动距离(6-min walk distance,6-MWD)[(595.42±106.74) mvs(620.90±99.27)m;P=0.004]及能量消耗[(59.93±10.61) kcal vs (61.03±10.47) kcal;P=0.004]提高;术后肺部相关并发症(postoperative pulmonary complications,PPCs)发生率(8.3％,2/24 vs 20.8％,5/24,P=0.416)差异无统计学意义.结论 术前短期综合肺康复训练能够提高肺癌合并轻中度慢性阻塞性肺病患者心肺耐力,加速患者术后快速康复,可作为术前快速康复计划的重要部分.     

单孔电视胸腔镜手术临床应用的现状与进展

目前电视胸腔镜手术(video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)发展呈现两大趋势:一是胸腔镜手术应用范围扩大化;二是单孔技术的使用使胸腔镜手术更"微创化"和美容化。我们从以下几方面介绍单孔胸腔镜手术:(1)单孔电视胸腔镜手术(single-port video-assisted thoracoscopic surgery,single-port VATS)切口"个体化"设计及其特点;(2)单孔VATS技术治疗气胸相关技术及器械的改进;(3)单孔VATS技术应用于胸部相关疾病(如肺叶切除术)的诊断与治疗;(4)单孔VATS临床应用中的优点与不足。     

二甲双胍与糖尿病患者食管癌发生风险及预后相关性的系统评价与Meta分析

目的探究二甲双胍与糖尿病患者食管癌发生风险及预后之间的相关性。方法计算机检索PubMed、Web of Science、EMbase、维普、万方、中国知网数据库中关于二甲双胍与糖尿病患者食管癌发生风险及预后相关性的文献,检索时限为建库至2021年8月21日。采用纽卡斯尔-渥太华量表(Newcastle-Ottawa scale,NOS)评价研究质量;采用STATA 12.0软件进行统计分析。结果纳入14项回顾性研究,包括5605218例患者。所有研究均为高质量研究(NOS≥6分)。Meta分析结果显示,二甲双胍不仅能显著降低糖尿病患者发生食管癌的风险[OR=0.84,95%CI(0.71,1.00),P=0.045],且能显著延长糖尿病合并食管癌患者的总生存期[HR=0.89,95%CI(0.80,0.99),P=0.025]。结论使用二甲双胍既能降低糖尿病患者患食管癌的风险,也能明显改善合并有食管癌患者的预后;但上述结论仍需更多前瞻性高质量的研究进一步证实。     

单向式全胸腔镜肺叶切除手术治疗肺良性疾病的临床研究

目的 探讨单向式全胸腔镜肺叶切除手术治疗肺良性疾病的可行性、安全性.方法 2006年5月至2009年12月采用单向式全胸腔镜肺叶切除治疗60例肺良性疾病.其中支气管扩张9例,支气管囊肿7例,结核瘤7例,炎性假瘤11例,硬化性血管瘤6例,错构瘤4例,支气管狭窄伴肺不张2例,肺曲霉菌病2例,肺隔离症2例,多发肺大泡8例,中叶综合症2例.60例中行右肺上叶切除18例,右肺中叶切除11例,右肺下叶切除7例,左肺上叶切除6例,左肺下叶切除18例.结果 手术中转开胸1例.围术期因肺部感染死亡1例.全组手术时间平均169 min(70～265 min),术中失血平均125 mL(10～700 mL),术后总引流量平均860 mL(20～3500 mL),术后引流管保留时间平均4 d(2～16 d),术后住院平均7.9 d(4～19 d).结论 单向式全胸腔镜肺叶切除手术治疗肺良性疾病是安全可行的.     

人端粒酶催化亚单位启动子调控自杀基因HSV-TK靶向性表达治疗肺癌的体内外实验研究

目的 研究人类单纯疱疹病毒的胸苷激酶(HSV-TK)/更昔洛韦(GCV)治疗系统在人端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子的调控下对肺癌细胞A549的体外靶向性增殖抑制作用和对裸鼠体内A549移植瘤的治疗效果.方法 ①用已构建的hTERT启动子和SV40启动子调控的TK基因表达质粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞A549及端粒酶阴性的人胚肺细胞MRC-5,RT-PCR方法检测转染细胞中TK基因的表达情况;②MTT法检测GCV对上述转染细胞体外增殖的抑制作用;并应用流式细胞仪检测GCV对上述转染细胞凋亡的影响;③将A549细胞接种于裸鼠皮下,研究pGL3-hTp-TK/GCV和pGL3-SV40-TK/GCV对移植瘤的体内生长抑制作用.结果 ①转染pGL3-SV40-TK的A549和MRC-5细胞均有TK mRNA表达,转染pGL3-hTp-TK的A549细胞也有TK mRNA表达,但MRC-5细胞无TK mRNA表达;②GCV对转染pGL3-SV40-TK的A549、MRC-5细胞和转染pGL3-hTp-TK的A549细胞的体外增殖均有明显抑制作用,对转染pGL3-hTp-TK的MRC-5细胞无明显抑制作用;转染pGL3-SV40-TK 和pGL3-hTp-TK的A549细胞经GCV处理后细胞凋亡指数(分别为21.58%和23.19%)均显著高于转染pGL3-hTp的A549细胞及空白对照, 转染pGL3-SV40-TK的MRC-5细胞凋亡指数(9.35%)显著高于对照组,而转染pGL3-hTp-TK的MRC-5细胞凋亡指数(0.88%)无明显升高;③pGL3-SV40-TK/GCV和pGL3-hTp-TK/GCV治疗系统对裸鼠A549移植瘤的生长具有明显抑制作用,抑瘤率分别为46.7%和40.5%,均显著高于各阴性对照组(分别为9.7%,14.3%,7.0%和8.0%).结论 hTERT启动子可以调控HSV-TK基因在肺癌细胞中靶向性表达,HSV-TK/GCV治疗系统在hTERT启动子调控下对肺癌细胞A549的体外增殖和裸鼠体内的移植瘤生长均有明显的抑制作用.