自然杀伤性T细胞在肿瘤免疫治疗中的作用及机制

自然杀伤性T细胞(NKT cells)是一群细胞表面既有天然杀伤(NK)细胞受体,又有T细胞受体(TCR)的特殊T细胞亚群。经活化后的NKT细胞既可以作为效应细胞直接发挥杀伤肿瘤作用,也能激活多种免疫效应细胞间接实现抗肿瘤作用。研究表明,NKT细胞在机体抗肿瘤、免疫调控以及获得性免疫应答方面都具有重要的临床意义。     

sIL-33联合CEA、CA19-9检测对结直肠癌的诊断价值

目的研究结直肠癌(CRC)患者血清白介素-33(s IL-33)水平,评价其对CRC诊断的临床意义。方法收集121例CRC患者的术前血清标本与临床病理资料,以81例体检健康者、33例肠息肉患者作为对照。用ELISA法检测s IL-33含量,分析其与临床病理参数的关系,并采用ROC曲线、Logistic回归分析比较s IL-33、CEA和CA19-9单独检测或3者联合检测的诊断价值。结果 CRC患者s IL-33含量[172.44(108.08,321.57)pg/m L]显著高于肠息肉组[67.31(37.72,130.44)pg/m L]和体检健康组[71.73(36.80,85.53)pg/m L],差异有统计学意义(P均0.01)。s IL-33与CRC的分化程度、肿瘤部位有关,差异有统计学意义(P均0.01)。s IL-33、癌胚抗原(CEA)和糖链抗原19-9(CA19-9)3者联合检测的敏感性(80.99%)、准确率(86.38%)和曲线下面积AUCROC(0.933 4)均比单独检测高,其特异性(92.11%)也处于较高水平,具有较好的诊断价值。结论s IL-33、CEA和CA19-9 3者联合检测对CRC诊断具有较好的临床应用价值,可作为潜在的血清学标志物。     

基于蛋白L染色方法的流式细胞术检测嵌合抗原受体的表达

目的探讨以蛋白L(protein L)为基础的流式细胞染色方法用于检测患者T细胞表面嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)表达的技术可行性。方法单采2例CD19阳性淋巴瘤患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),磁珠分选法获得T细胞,加入靶向CD19、CD22的CAR逆转录病毒,转染、诱导培养成CAR-T细胞。通过生物素化蛋白L(biotinylated protein L)-亲合素(streptavidin-PE)系统对CAR-T细胞表面的单链抗体片段(single-chain variable fragment,sc Fv)进行标记,用流式细胞术检测活化培养的T细胞中CD19-CAR、CD22-CAR表达阳性T细胞的比例,以常规Anti-Ig G染色的流式细胞检测方法作为对照组,进行结果对比。结果 sc Fv-biotinylated protein L-streptavidin-PE-流式细胞染色方法能够检测到CAR-T细胞表面CAR表达。2例患者蛋白L实验组和Anti-Ig G对照组CD19-CAR-T细胞比例分别为71.6%vs64.2%和49.3%vs 43.8%;CD22-CAR-T细胞比例分别为53.1%vs 46.3%和56.5%vs 64.0%,测定结果相似。结论以蛋白L为基础的染色方法可以作为流式细胞术检测CAR-T细胞的常规染色方法。     

共刺激分子B7-H4表达对细胞因子诱导的杀伤细胞治疗胃癌患者预后的影响

目的 评价共刺激分子B7-H4表达对细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）过继免疫治疗胃癌患者后预后的影响.方法 采用回顾性队列分析156例胃癌的临床资料,并按其治疗情况分为对照组（81例,单纯化疗）和试验组（75例,化疗联合CIK细胞治疗）.对胃癌患者组织进行B7-H4免疫组织化学染色,并比较B7-H4不同表达情况下,对照组与试验组治疗后无瘤生存率的差异.结果 对照组和试验组间各临床病理资料的差异无统计学意义（p〉0.05）.两组术后中位无瘤生存时间分别为18.0个月和45.0个月（χ~2=11.631,P=0.001）,术后中位总体生存时间分别为27.0个月和49.0个月（χ~2=10.907,P=0.001）,差异均有统计学意义.86例B7-H4低表达者中,采用单纯化疗和CIK联合治疗后中位无瘤生存时间分别为32.0个月和62.0个月.差异有统计学意义（χ~2=4.663,P=0.03）;70例B7-H4高表达者中,采用单纯化疗和CIK联合治疗后中位无瘤生存时间分别11.0个月和18.0个月,差异有统计学意义（χ~2=11.971,P=0.001）.结论 采用化学治疗联合CIK细胞回输治疗胃癌,无论B7-H4高表达还是低表达,均可显著延长胃癌患者的无瘤生存时间.     

CIK细胞辅助治疗Ⅲ期胃癌

目的 分析细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)辅助治疗Ⅲ期胃癌的临床意义.方法 对 88 例Ⅲ期胃癌根治术后行6周期化疗患者资料进行回顾性分析,其中43例患者于辅助化疗结束后接受CIK细胞治疗至少3个周期为CIK治疗组,45例患者单纯化疗为对照组.对CIK细胞治疗前后T细胞亚群检测结果进行随访观察,对2组总生存期与无瘤生存期进行比较.结果 第1次CIK细胞治疗后2周时,CD3+细胞与CD4+/CD8+ 比值显著升高,2个月时又下降到接近治疗前水平,而CIK细胞连续治疗3周期后2个月CD3+细胞与CD4+/CD8+ 比值均维持在高水平.CIK治疗组与单纯化疗组的中位生存期分别为(42.0±2.6)个月与(36.0±2.9)个月,2组中位无瘤生存期分别为(34.0±2.7)个月与(25.0±2.8)个月,2组总生存期与无瘤生存期比较差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 采用CIK细胞辅助治疗Ⅲ期胃癌可以改善患者免疫功能,延缓肿瘤复发,延长患者生存期.     

RMP基因在体内对肝癌细胞株SMMC-7721的生长抑制作用

目的探讨RMP基因在体内抑制肿瘤细胞生长的作用及其机制。方法通过体外构建真核表达载体pGPU6-Neo-RMP-484、pFLAG-CMV-4-RMP以及稳定表达细胞株shRNA-SMMC-7721、RMP-SMMC-7721,并测定RMPmRNA表达的变化,荷瘤裸鼠皮下注射各组肝癌细胞,观察移植瘤的大小及病理变化。结果成功构建了真核表达载体及稳定表达细胞系。实验组移植瘤体积、质量、病理及肿瘤相关蛋白的表达量均有明显变化。结论RMP基因在体内能有效地抑制肝癌细胞的生长,为RMP对肝癌的基因治疗/基因干预提供了有价值的靶点及体内分子机制的实验依据,为深入研究奠定了基础。。     

细胞因子诱导的杀伤细胞的基础研究新进展

细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞是人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子刺激后获得的一群异质细胞,它具有增殖能力强、杀瘤活性高和杀瘤谱广、临床应用不良反应小的特点,是肿瘤过继免疫治疗中更为有效的杀瘤效应细胞。本文综述了CIK细胞的生物学特性、作用机制等基础研究的最新进展。     

癌性胸水肿瘤浸润淋巴细胞表型分析

癌症患者多发生胸腔积液。自体胸水肿瘤浸润淋巴细胞（ｔｕｍｏｕｒｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ,ＴＩＬ）治疗癌性胸水,有效率在９０％以上［１］。国内外曾对实体瘤ＴＩＬ表型进行了研究［２,３］。作者对１８例癌性胸水的ＴＩＬ表型进行了检测与...     

自体CIK过继免疫治疗恶性肿瘤的最佳输注时间

摘要：目的:研究恶性肿瘤患者自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的免疫表型与细胞毒活性的变化规律,探讨肿瘤患者CIK过继免疫治疗输注的最佳时间。 方法:采集40例恶性肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),由IFN-γ、rhIL-1α、rhIL-2等细胞因子和CD3单克隆抗体体外诱导培养成CIK。用流式细胞术动态监测免疫表型,MTT法分析细胞毒活性。 结果：随着诱导时间的延长,PBMC中CD3⁺、CD3⁺CD8⁺、CD3⁺CD56⁺表型细胞所占比例呈上升趋势。CD3⁺CD4⁺细胞在7 d达到峰值,随后缓慢下降。CD25⁺细胞在培养的早期(3～7 d)即达峰值,7～14 d缓慢下降,14～21 d快速下降。HLA-DR+细胞在0～14 d处于上升期,14 d达峰值后快速下降。成熟CIK细胞毒活性［(52.49±7.70)%］较未活化的PBMC［(7.02±2.00)%］显著增高(P<0.01)。 结论:14 d左右能诱导出典型的CIK,CD3⁺CD56⁺细胞处于对数生长期。确立自体CIK过继免疫治疗恶性肿瘤的最佳输注时间为第14天。     

乳腺癌肿瘤浸润淋巴细胞表型分析

国内外曾对晚期癌症肿瘤浸润淋巴细胞 (ＴＩＬ)表型进行了研究[1,2 ] ,我们对 2 6例Ⅱ、Ⅲ期乳腺癌的ＴＩＬ表型进行了监测与分析 ,旨在探讨静脉输注ＴＩＬ的最佳时间。1　资料和方法1.1　一般资料　本院住院患者 2 6例 ,均为女性 ,36～ 70岁 ,平均 4 8岁 ,按 1998年国际抗癌联盟提出的ＴＮＭ分期法以及术后病理证实均为Ⅱ、Ⅲ期乳腺癌。其中Ⅱ期 11例 (Ⅱａ期 2例、Ⅱｂ期 9例 ) ,Ⅲ期15例 (均为Ⅲａ期 )。1.2　仪器和试剂　白细胞介素 2 (ＩＬ - 2 )为北京四环生物工程制品厂产品 ,荧光素标记的鼠抗人ＣＤ3+ 、ＣＤ4 + 、ＣＤ8+ 、ＣＤ5 6…