基因-病毒治疗系统CNHK300-小鼠内皮抑素对裸鼠胃癌的抗肿瘤作用

目的探讨新构建的基因-病毒治疗系统CNHK300-小鼠内皮抑素murineendostatin（CNHK300-mE）对胃癌的抑制作用。方法通过胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型观察该病毒治疗系统对胃癌生长和肿瘤血管生成的抑制作用。用电镜观察该病毒在肿瘤细胞中的复制情况及肿瘤细胞的超微结构改变。用酶联免疫吸附（ELISA）法检测mE基因在体内的表达。用免疫组织化学的方法检测腺病毒外壳蛋白六邻体（hexon）、增殖细胞核抗原（PCNA）及vWF因子相关抗原的表达情况。采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果CNHK300-mE能在肿瘤细胞内复制,高表达mE,在第7天时,达到（2115±770）ng/ml（范围1745～3000ng/ml）;明显抑制胃癌皮下移植瘤的生长及瘤内的血管生成,并可引起胃癌细胞的凋亡[治疗组小鼠肿瘤细胞凋亡率（78.4±9.1）%,对照组仅（15.2±0.5）%,P〈0.01],抑制肿瘤细胞增殖[治疗组小鼠PCNA指数（55.0±1.4）%,对照组为（74.1±0.4）%,P〈0.05]。结论CNHK300-mE能在小鼠胃癌内增殖复制,高效表达mE基因,抑制胃癌生长。     

糖原型胃癌的酶细胞化学研究

为了研究腺苷酸环化酶（ＡＣＬ）对糖原型胃癌糖代谢的影响，采用光镜、电镜和酶细胞化学技术研究了５６例糖原型和非糖原型胃癌的形态学和ＡＣＬ活性。发现糖原型胃癌ＡＣＬ活性明显下降。可以认为ＡＣＬ活性下降导致癌细胞信号传导途径中第二信使ｃＡＭＰ产生障碍，其最终结果是糖原的累积     

溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53对肝癌细胞的体外杀伤作用

目的:研究携带细胞穿膜肽11R和P53的溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53对肝癌细胞的体外杀伤作用。方法:以本课题组前期实验构建的携细胞穿膜肽11R和P53的溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53和不携11R的溶瘤腺病毒SG7605-P53感染肝癌细胞HepG2、SMMC-7721、Hep3B、Huh7和正常成纤维细胞株BJ,Western blotting检测感染后细胞P53和11R-P53的表达情况,TCID50法检测SG7605-11R-P53和SG7605-P53在肝癌细胞中的增殖能力,MTT法检测SG7605-11R-P53对肝癌细胞及正常细胞的杀伤作用。结果:SG7605-11R-P53和SG7605-P53能在肝癌细胞中高表达P53和11R-P53蛋白。SG7605-11R-P53可在HepG2、SMMC-7721、Hep3B和Huh7细胞中大量增殖,其增殖倍数是SG7605-P53的10~100倍,但在正常BJ细胞内几乎不增殖。SG7605-11R-P53在MOI=0.1时对Hep3B细胞的杀伤率达90%,对于正常BJ细胞只有当MOI=50时才有很弱的抑制作用;SG7605-11R-P53对4种肝癌细胞杀伤作用的大小依次为Hep3B、HepG2、Huh7和SMMC-7721细胞。结论:携带细胞穿膜肽11R和P53的SG7605-11R-P53溶瘤腺病毒体外对4种肝癌细胞株均有较好的靶向杀伤作用,尤其对Hep3B细胞的杀伤作用最强。     

靶向端粒酶的肿瘤基因治疗新策略

端粒酶在 85 %以上的各类恶性肿瘤中激活并维持细胞的无限增殖能力 ,是目前发现的恶性肿瘤细胞区别于正常细胞最广谱的分子标记 ,具备了作为肿瘤靶向基因治疗的物质基础。因此 ,端粒酶已成为肿瘤基因治疗的理想靶点 ,有望为肿瘤基因治疗提供一种全新的途径     

胃肠道印戒细胞癌超微结构分型

通过对３８例胃肠道印戒细胞癌进行超微细胞结构观察，发现印戒细胞癌可有三种类型，即粘液型、微囊型和糖原型。结合粘液组化染色，作者对印戒细胞癌的细胞起源以及癌细胞不同形态表现的原因和意义进行了探讨，认为印戒细胞癌起源于具有多潜能分化的干细胞，癌细胞超微结构形态特征的变化是其畸形分化或功能代谢不同的具体表现。     

转染纤溶酶原激活剂抑制剂－2基因对纤维肉瘤细胞侵袭能力的影响

作者将转染纤溶酶原激活剂抑制剂－２（ＰＡＩ－２）基因的纤维肉瘤细胞克隆和对照细胞铺在同位素标记的３Ｈ－细胞外基质（ＥＣＭ）上，液体闪烁计数法测定释放到培养液中的同位素。并进行裸小鼠皮下接种肿瘤细胞和组织学研究，以了解ＰＡＩ－２在肿瘤细胞侵袭过程中的作用。结果表明ＰＡＩ－２可抑制肿瘤细胞降解３Ｈ－ＥＣＭ能力，抑制率达８６．５％。ＨＥ染色种植瘤切片，光镜观察显示，在实验组瘤组织的周围有加厚的包膜，而对照组瘤组织旁无明显的包膜。包膜是肿瘤细胞侵袭的障碍，因此，重组ＰＡＩ－２可抑制纤维肉瘤细胞的侵袭能力     

基因-病毒治疗系统CNHK200-hA对肺癌治疗的研究

目的　构建抗肿瘤新生血管生成的基因治疗与病毒治疗相结合的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA ,并对其肺癌的体内外治疗作用进行初步研究。方法　通过Westernblot分析 ,观察携带抗肿瘤新生血管生成基因angiostatink1 5 (hA)的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA和非增殖型腺病毒对介导k1 5蛋白表达的影响 ;通过细胞病理作用及动物试验 ,比较CNHK2 0 0 hA和非增殖型腺病毒对人肺癌细胞株A5 4 9的杀伤作用及对肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用。结果　基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA能够介导hA基因在肺癌细胞内高效表达k1 5蛋白 ,其表达量高于非增殖型腺病毒Ad hA。细胞病理效应显示 ,CNHK2 0 0 hA对A5 4 9的杀伤作用明显优于Ad hA ,CNHK2 0 0 hA在感染复数 (MOI)值为 1时可完全杀伤A5 4 9细胞 ,而达到相同杀伤效应的Ad hA的MOI值为 1 0 0。动物试验显示 ,CNHK2 0 0 hA对肺癌的疗效明显好于Ad hA及肿瘤增殖型病毒ONYX 0 1 5。结论　插入了抗肿瘤新生血管生成基因hA的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA ,可明显提高hA基因的表达量 ,其在体内外的抗肺癌作用较非增殖型腺病毒Ad hA及肿瘤增殖型病毒ONYX 0 1 5进一步提高。     

基因一病毒治疗系统CNHK200-hA对肺癌治疗的研究

目的构建抗肿瘤新生血管生成的基因治疗与病毒治疗相结合的基因一病毒治疗系统CNHK200-hA，并对其肺癌的体内外治疗作用进行初步研究。方法通过Western blot分析，观察携带抗肿瘤新生血管生成基因angiostatin k1-5(hA)的基因-病毒治疗系统CNHK200-hA和非增殖型腺病毒对介导k1-5蛋白表达的影响；通过细胞病理作用及动物试验，比较CNHK200-hA和非增殖型腺病毒对人肺癌细胞株A549的杀伤作用及对肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用。结果基因．病毒治疗系统CNHK200．hA能够介导hA基因在肺癌细胞内高效表达kl-5蛋白，其表达量高于非增殖型腺病毒Ad-hA。细胞病理效应显示，CNHK200-hA对A549的杀伤作用明显优于Ad-hA，CNHK200-hAA在感染复数(MOI)值为1时可完全杀伤A549细胞，而达到相同杀伤效应的Ad-hA的MOI值为100。动物试验显示，CNHK200-hA对肺癌的疗效明显好于Ad-hA及肿瘤增殖型病毒(ONYX-015。结论插入了抗肿瘤新生血管生成基因hA的基因-病毒治疗系统CNHK200-hA，可明显提高hA基因的表达量，其在体内外的抗肺癌作用较非增殖型腺病毒Ad-hA及肿瘤增殖型病毒ONYX-015进一步提高。     

原发恶性肿瘤MTS1／p16基因缺失的研究

目的:研究MTS1/p16基因在人类恶性肿瘤组织中的变化.方法:采用Southern杂交和多重PCR技术,分析了68例原发肿瘤组织标本,包括非小细胞肺癌31例、食管癌15例、胃癌13例、乳腺癌9例.结果:PCR检测癌旁组织未见p16基因缺失,而不同肿瘤组织标本的p16基因缺失差别很大,总缺失率为13.2%(9/68).Southern杂交检测p16基因的缺失率为17.7%(12/68).结论:MTS1/P16基因缺失在人类恶性肿瘤发生发展中起重要作用,是重要的多肿瘤抑制基因.