肺癌细胞中survivin与P53的相关性

目的:观察survivin特异性小干扰 RNA (small interference RNA, siRNA)对P53野生型和P53 缺失型肺癌细胞株的生长抑制作用， 分析肺癌细胞中survivin 与 mP53的相关性 。 方法 ：以化学合成的survivin siRNA转染 P53野生型肺癌细胞株A549和P53缺失型肺癌细胞株H1299，用MTT 法检测转染前后肺癌细胞的增殖情况，流式细胞术分析细胞周期和凋亡的改变，半定量 RTPCR 检测转染对survivin mRNA表达的影响，Western blotting 检测survivin、 PARP、 P21、 P53等蛋白表达的变化。 结果：siRNA转染前A549 细胞中survivin表达量明显低于 H1299 细胞(P<0.05)。 Survivin siRNA 转染组两种细胞 survivin 蛋白及 RNA 表达水平均显著低于对照组和无关干扰组(P<0.01)。Survivin siRNA 对 A549 和 H1299细胞生长抑制作用均呈浓度依赖性(P<0.05)，但对H1299细胞的抑制起效晚于A549，且抑制程度低于A549细胞。转染后 A549和 H1299 细胞均有 G1 期比例增加和 S 期比例相应地减少，H1299 细胞的变化更为显著。 A549 细胞有一定比例出现凋亡，PARP 发生了裂解，P53、 P21蛋白表达增加，而H1299 细胞中上述指标的变化却不明显。 结论：P53野生型 A549细胞内源性survivin表达明显低于P53缺失型H1299细胞；抑制survivin能上调P53蛋白表达，其对A549细胞的生长、凋亡和P21等蛋白表达的影响明显强于H1299细胞；提示survivin与P53之间可能存在着相互抑制作用。     

紫杉醇对p53缺失型肺癌细胞株H1299的生长抑制作用

背景与目的:评价紫杉醇对p53缺失型肺癌细胞株H1299的生长抑制作用.材料与方法:分别以体外药物敏感试验(Mir法)、流式细胞术观察紫杉醇不同作用浓度、不同作用时间处理H1299细胞后,其生长抑制情况以及细胞周期、细胞凋亡等指标的变化,并以荧光显微镜观察细胞核形态的改变.结果:紫杉醇对H1299细胞毒性呈时间依赖性(P＜0.05);在紫杉醇1 nmol/L以上各浓度组,随着紫杉醇浓度的增加,H1299细胞的存活率降低,与对照组间差异具有统计学意义(P＜0.05);各实验组H1299细胞的生长被阻滞于Gz/M期,在0.1～1 000 nmol/L浓度范围内呈浓度依赖性(P＜0.05),其细胞凋亡比例在0.1～10 nmol/L浓度范围内随浓度的增加而增高(P＜0.05);在时间依赖性试验中,10 nmol/L作用时,G2/M期的阻滞于12 h达高峰;1 000 nmol/L作用时于24 h达高峰,延长1 000 nmol/L作用时间,H1299出现异常多倍体现象;凋亡发生呈时间依赖性,但高浓度诱导的凋亡较低浓度出现的时间晚.紫杉醇诱导的凋亡和G2/M期阻滞无相关性(P＞0.05).荧光显微镜下可见细胞凋亡与细胞死亡共存现象.结论:紫杉醇可以同时诱导H1299细胞凋亡和死亡,对其生长抑制作用呈时间和浓度依赖性.     

肺癌细胞中survivin与紫杉醇作用的实验研究

目的:探讨survivin与紫杉醇作用机制可能的关系.方法:分别以体外药物敏感试验(MTT法)、流式细胞术、Western blot观察紫杉醇作用后,A549细胞生长抑制情况以及细胞周期、凋亡、survivin蛋白等指标的变化.结果:紫杉醇作用12h后,A549细胞才表现出生长抑制,并且这种抑制具有明显的时间依赖性(P＜0.05).不同作用浓度对A549生长的影响也存在差异,在同一时间点,紫杉醇浓度越大,细胞存活率越低(P＜0.05).时间依赖性实验中,10nM紫杉醇诱导的survivin表达与G2/M期阻滞一样,早在4h即已出现,延长作用时间(48h或更长),表达反而降低,但凋亡所占比例则与作用时间呈正相关(P＜0.05).浓度依赖性实验中,不同浓度紫杉醇同样表现出有效诱导survivin表达的能力(P＞0.05),G2/M期阻滞则呈浓度依赖性特点,凋亡比例于10nM达高峰;survivin表达与G2/M期阻滞、凋亡无相关性(P＞0.05).结论:紫杉醇对A549的生长抑制作用呈时间依赖性,紫杉醇诱导的survivin表达与G2/M期阻滞及凋亡的关系可因紫杉醇浓度而不同.时间依赖性实验中,10nM紫杉醇诱导的survivin表达与G2/M期阻滞变化趋势基本一致,但与凋亡相反,提示有丝分裂生存途径可能是肺癌细胞通过survivin拮抗紫杉醇诱导凋亡的一种重要方式,抑制survivin表达可能成为增加肺癌细胞对紫杉醇敏感性的有效途径.     

脑梗死和心肌梗死并存者临床分析

目的　探讨脑梗死和心肌梗死并存的临床特点。方法　回顾分析 80例心、脑梗死并存患者的临床资料。结果　两组有某些共同的危险因素。统计脑梗死和急性心肌梗死发病的时间间隔 ,在 2月以内的比例均较高 ,心、脑梗死组为 83 3% ,脑、心梗死组为 5 5 3% ,尤其以 2周之内突出 ,心、脑梗死组为 4 5 2 % ,脑、心梗死组为 34 2 %。心、脑梗死组右室心肌梗死伴发率及左室肥大、室壁瘤的比例均高于脑、心梗死组 ,而左室射血分数、入院时的舒张压均明显低于脑、心梗死组。两组年龄≥ 6 5岁患者住院病死率均明显增高 (P <0 0 5 )。结论　老年 (≥ 6 5岁 )可能是心、脑梗死和脑、心梗死预后危险因素 ,心肌梗死和脑梗死时应积极防治并发症 ,争取获得最好的转归     

中性粒细胞活化在海水淹溺致肺损伤中的作用

目的 探讨中性粒细胞活化在海水淹溺致肺损伤中的作用.方法 36只新西兰兔随机分成6组:0(对照)、1、3、6、12、24 h组,每组6只动物.海水组经气管插管灌注2 mL/kg海水.观察不同时间点血气分析和支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数及百分比的变化,计算肺通透指数(LPI);以生化法检测髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)含量,以酶联免疫吸附法(ELISA)分析中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性,同时进行病理学检查,并计算肺病理评分(LPS).结果灌注海水后氧合指数迅速低至300 mm Hg 以下,持续时间长达6 h(P<0.01).肺大体标本以灌注后3 h瘀血水肿最严重,体积最大.显微镜下炎症细胞浸润以6~12 h最突出,肺泡间隔宽度随时间延长而加重.各时间点BALF中性粒细胞计数及百分比,肺组织NE、MPO、MDA含量,LPI及LPS均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),多于3~12 h达高峰.各指标间均有显著相关性(P<0.05或P<0.01).结论 中性粒细胞是SWD-ALI早期主要的炎症效应细胞,氧化应激反应与NE释放协同参与了肺组织损伤.中性粒细胞募集和活化在SWD-ALI发生发展中起重要作用.     

老年慢性充血性心力衰竭BNP水平及临床意义

目的：研究B型钠尿肽（BNP）在诊断慢性充血性心力衰竭中的应用价值及其对心功能的评价作用。方法：选择慢性充血性心力衰竭患者30例,正常对照组28例,测定血清BNP浓度、LVEF等指标,分析其水平变化。结果：心力衰竭组总体血浆BNP水平明显高于对照组（P〈0.01）,HF在治疗后明显低于HF在治疗前（P〈0.01）。结论：血浆BNP的水平对HF的诊断和疗效评价有重要的临床意义。     

胸部开放伤后海水浸泡对犬肺损伤程度的影响及肺表面活性蛋白A、B的变化

目的 探讨胸部开放伤后海水浸泡对犬急性肺损伤(acute lung injury,ALI)程度的影响及肺表面活性蛋白A、B(SP-A、SP-B)的变化.方法 成年杂交犬24只,按单纯气胸、胸腔注入淡水及海水制备3种犬AU模型,观察不同时间点动脉血气、TNF-α、IL-6、肺组织及血清中SP-A、SP-B含量的变化,实验终点处死动物后行肺病理组织学检查,并用免疫组化染色观察SP-B于肺内的表达.结果 海水浸泡组及淡水浸泡组均引起低氧血症,海水组缺氧程度比淡水组严重(P<0.05).2个实验组动物血清及肺泡灌洗液(broncho-alveolar lavage fluid,BALF)中IL-8、TNF-α等炎症因子水平均较对照组增高(P<0.05),肺组织病理损伤严重,并且海水组重于淡水组.2个实验组BALF中SP-A、SP-B含量较对照组明显降低(P<0.05),血清中SP-A、SP-B含量较对照组增加(P<0.05);肺内SP-B阳性的Ⅱ型肺泡上皮细胞数量减少,其灰度值明显弱于对照组,这种改变程度在海水组及淡水组中也存在统计学差异(P<0.05).结论 胸部开放伤后海水浸泡引起的肺损伤程度重于淡水浸泡和单纯气胸.     

淡水淹溺致急性肺损伤兔模型的制备

目的 通过向新西兰兔气管内灌注不同剂量淡水,研究淡水淹溺型急性肺损伤动物模型的制备方法.方法 健康新西兰兔28只,随机均分为空白对照(C)组及F8组,F10组、F12组(分别灌注8、10、12ml/kg淡水).观察各组灌沣前,灌注即刻(0min),灌注后5、30min和1、2、3h的呼吸频率、心率、平均动脉压(MAP)、动脉血气.于实验终点处死动物,观察肺组织病理学变化.计算肺湿/干重比和微血管通透指数的变化.结果 各淡水灌注组在灌注即刻呼吸频率均明显增快,口唇发绀,双肺底闻及少许湿啰音;灌注瞬间心率均有少许加快,但与C组及灌注前比较无统计学意义.F8组和F10组在灌注淡水后MAP变化缓慢,于30min后下降,与灌注前和C组比较均有显著差异(P<0.05);F12组在灌注即刻MAP即出现下降,与灌注前和C组比较均有显著差异(P<0.05).各灌注组动物均出现低氧血症、低碳酸血症,氧合指数、BE值和渗透压下降.F12组自灌注时即出现氧合指数低于300mmHg并维持1h,与F8、F10组比较更稳定、持久.各灌注组动物的肺组织均可见不同程度的损伤,且肺微血管通透性增加,但仅F12组肺组织湿/干重比增加(P<0.05).结论 不同剂量淡水灌注均可引起不同程度肺损伤,灌注淡水12ml/kg可以成功建立较为稳定的淡水淹溺型急性肺损伤模型.     

中性粒细胞凋亡与急性肺损伤

急性肺损伤时,中性粒细胞是造成过度性、失控性炎症反应的主要因素.中性粒细胞凋亡异常引起的功能和数量上的改变,可能是参与过度炎症反应的重要机制之一.中性粒细胞凋亡涉及到多基因、多因素的综合作用.深入了解Au时PMN凋亡的规律及调控机制,不仅有助于进一步阐明ALI发病机制,而且可能为治疗ALI提供新的思路和手段.