用母体外周血中胎儿游离DNA检测胎儿SRY基因的研究

目的探索从孕妇外周血浆中检测胎儿躲y基因的高灵敏性及高准确性方法。方法应用PcR、实时荧光定量PcR、PEP—PcR技术,检测33例妊娠8～14周的正常孕妇血浆中游离胎儿DNA的脓y基因。组织标本躲y基因检测结果作为性别判定的标准。结果33例孕妇血浆标本检测职y基因,普通PcR检出的灵敏性为58．82％,特异性100％。PEP—PCR的灵敏性为88．24％,特异性100％。荧光定量PCR的灵敏性为88．24％,特异性100％。结论PEP—PCR技术和荧光定量PcR技术均可以提高胎儿游离DNA检测的灵敏度及准确性．可用于进一步染色体疾病的无创性产前筛查研究。     

冷冻胚胎复苏后发育情况与妊娠结局的关系

目的 观察冷冻胚胎复苏并过夜培养后的卵裂球增殖情况与临床妊娠结局的关系。方法 回顾性分析2015年1月—2016年12月在同济大学附属同济医院生殖医学中心行冷冻胚胎复苏培养后移植的周期991例,按照复苏胚胎过夜培养后卵裂球增殖与否及增殖比例进行研究。依据移植的2枚胚胎是否增殖分为2枚增殖（S2）、1枚增殖（S1）及2枚均未增殖（S0）三组;在S2中,再根据卵裂球增殖比率分为a： 增殖形成桑葚胚或早期囊胚;b： 卵裂球增殖率≥50%;c： 50%＞卵裂球增殖率≥25%;d： 卵裂球增殖率＜25%,进一步分为A（aa、ab、ac、ad）、B（bb、bc、bd）和C（cc、cd、dd）三个区段共10组,统计各组临床妊娠率、流产率等指标。结果 S2、S1、S0三组临床妊娠率分别为46.41%、23.08%及12%,差异有统计学意义（P＜0.05）;A、B、C各区段的临床妊娠率分别为59.77%、47.43%及24.43%,差异有统计学意义（P＜0.05）;在各区段中,随着其中一枚胚胎的增殖比率下降,妊娠率均有不同程度降低。结论 冷冻胚胎复苏后过夜培养,选择移植进一步发育的胚胎具有更好的妊娠结局。     

顶体酶抑制剂KF-950对兔的抗生育作用

本文观察ＫＦ－９５０对兔的抗生育作用。ＫＦ－９５０对家兔阴道给药５ｍｉｎ后人工授精,１０～１４ｄ后剖腹计数黄体数和宫内胚胎数。结果示 ＫＦ－９５０ ３ ｍｇ组家兔卵受精率１０％（溶剂对照组１００％,两组相差显著,Ｐ＜０．０５）,避孕率７１．４３％（溶剂对照组避孕率为０,两组相差显著,Ｐ＜０．０１）。ＫＦ－９５０ ６ ｍｇ组避孕率１００％。研究认为 ＫＦ－９５０在体内有明确避孕效果。     

不同年龄不孕患者卵泡液中CFTR水平与卵子及胚胎发育结局的关系

目的 探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, CFTR）在不同年龄不孕患者卵泡液中表达的变化与卵子及胚胎发育结局的相关性。方法 采用全自动电化学发光仪测定血清中卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH),黄体生成素(luteotropic hormone, LH),雌二醇(estradiol, E2),孕激素(progesterone, P)水平;采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定卵泡液中CFTR的浓度;收集取卵日卵丘颗粒细胞,采用间接免疫荧光染色法检测卵丘颗粒细胞上CFTR蛋白的定位及表达;Real-time PCR测定卵丘颗粒细胞CFTR mRNA的表达。结果 CFTR在不同年龄段不孕患者卵泡液中均有表达,不同年龄段患者卵泡液中CFTR浓度差异有统计学意义（P<0.05）,卵泡液中CFTR水平与年龄呈明显正相关(r=0.497,P<0.05)。不同年龄组胚胎培养结局中获卵数和优质胚胎率与卵泡液中CFTR含量呈反比。不同年龄组胚胎培养结局中2PN形成率与卵泡液中CFTR含量呈正比。免疫荧光染色表明颗粒细胞胞浆和胞膜上均有CFTR蛋白的表达。不同年龄患者的卵丘颗粒细胞上均有一定量的CFTR mRNA表达;不同年龄患者卵丘颗粒细胞中CFTR mRNA表达与年龄呈正相关（r=0.440）。不同年龄可用胚胎率与CFTR mRNA表达量呈反比趋势。结论 CFTR可能参与人卵泡正常生长的调控,与不孕患者年龄有密切的相关性,直接影响获卵数、2PN形成率、优质胚胎率等卵子及胚胎的发育结局,CFTR有可能作为预测体外受精患者卵子及胚胎发育结局的一种无创、定量的标记分子。     

51岁绝经后妇女瘢痕子宫受卵助孕分娩双胎一例

一、病例摘要 患者女,51岁。因绝经1年,独子意外车祸于2005年8月来院要求助孕。患者孕1产1,血促卵泡生成素（FSH）42．3U／L,阴道超声见子宫增大,约70mm×68mm×49mm,回声不均,多发性子宫肌瘤约30mm×40mm、15mm×12mm和15mm×10mm大小。遂于2005年9月行腹腔镜下子宫肌瘤剥除术,术后病理报告子宫平滑肌瘤。     

引物延伸预扩增用于胚胎种植前诊断的实验研究

目的 用引物延伸预扩增（PEP）方法对种植前胚胎进行单基因病诊断的实验研究。方法 取IVF后剩余胚胎的一个卵裂球用PEP方法，扩增SRY、ZP3、RhCE、RhD和FVⅢ5个基因，而同一胚胎的另一个卵裂球双重套式PCR扩增SRY和ZP3基因。结果 PEP分析分别由6个胚胎获得的6个卵裂球，1-4号胚胎有19个基因呈阳性（19/20），1个基因阴性，5，6号胚胎除SRY均阴性，其余基因为阳性；而6个胚胎的卵裂球双重套式PCR扩增SRY和ZP3基因的结果与同一胚胎PEP的结果相同。结论 采用PEP方法进行种植前胚胎单基因病的诊断是可靠、准确的，且可用于无创性产前诊断。     

顶体蛋白酶抑制剂4-胍基苯甲酸盐对人精子功能的影响

目的：研究顶体蛋白酶抑制剂４－胍基苯甲酸盐（ＫＦ－９５０）对人精子功能的影响。方法：体外用不同浓度的ＫＦ－９５０作用于人精子,观察其活动率;用免疫组化ＡＢＣ法观察ＫＦ－９５０对精子顶体结构的影响。结果：ＫＦ－９５０对人精子的作用与其浓度和明关。经≥０．２ｍｇ／ｍｌ ＫＦ－９５０处理,随着时间的延长以精子活动率明显下降,精子膜功能有不同程度的损害,顶体脱落率以及已发生顶体反应的精子死亡率明显上升。结     

GnRH-A在不同卵巢功能患者超排中应用的研究进展

目前,国内辅助生殖技术中控制性超促排卵(controlled ovarian hyperstimulation, COH)仍以促性腺激素释放激素激动剂(gonadotropin releasing hormone agonist, GnRH-a)长方案为主,但GnRH-a长方案中的大剂量、长时间的促性腺激素(gonadotropin,Gn)暴露对卵泡的生长、卵子的发育不利。20世纪90年代,促性腺激素释放激素拮抗剂(gonadotropin releasing hormone antagonist, GnRH-A)开始用于人类辅助生殖技术(assisted reproductive technology, ART)。GnRH-A通过与垂体促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone, GnRH)受体结合,有效抑制早发黄体生成素(luteinizing hormone, LH)峰,具有起效快、作用时间短、停药后垂体恢复迅速等特点,然而其在不同卵巢功能患者超排中的应用尚存在争议。本文对GnRH-A在ART中的临床应用作一综述。     

辅助生殖技术中选择性单胚胎移植的研究进展

辅助生殖技术（assisted reproductive technology, ART）已成为不孕症患者最有效的治疗方法,但多胎妊娠为其最突出的并发症之一。多胎妊娠常引起羊水过多、先兆子痫、低体质量儿、贫血等多项严重的母婴并发症。避免多胎妊娠的方法是单胚胎移植,选择性单胚胎移植已经成为生殖医学未来的发展方向,单胚胎的选择为临床难题。如何保证临床妊娠率又显著降低各类并发症？对于35岁以下的卵巢储备功能正常患者或有优质囊胚的高龄患者,可通过检测其胚胎发育过程中的代谢产物、胚胎持续监测或植入前遗传学诊断,筛选最具发育潜能的胚胎进行移植,改善临床结局。本文通过文献回顾,探讨选择性单胚胎移植的临床应用前景。     

MCP-1、HGF、TGF-β1在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 观察单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)、转化生长因子-β1(transforming growth factor -β1, TGF-β1)在子宫内膜异位症(endometriosis, EMs)中的表达及意义。方法 选择2012年1月至2013年12月EMs患者68例为EMs组,按照美国生育协会修正评分(r-AFS)进行分期: Ⅰ期~Ⅱ期31例,Ⅲ期~Ⅳ期37例;按照痛经评分分为: 0~1分42例,2~3分26例。选择同期确诊的良性肿瘤患者30例为疾病对照组,健康妇女20例为健康对照组。观察各组MCP-1、HGF、TGF-β1水平的变化及EMs分期、痛经评分与MCP-1、HGF和TGF-β1水平的关系。结果 EMs组的MCP-1、HGF和TGF-β1水平明显高于健康对照组和疾病对照组(P<0.01),而健康对照组与疾病对照组差异无统计学意义(P＞0.05)。随着EMs分期和痛经评分的升高,MCP-1水平明显降低(P<0.05),而HGF和TGF-β1水平明显升高(P<0.01),差异均有统计学意义。结论 MCP-1、HGF、TGF-β1可能参与了EMs的发生发展过程,检测其水平有利于了解EMs的分期和痛经的严重程度。