重组人胱抑素C及其多克隆抗体的制备

目的探讨重组人胱抑素C（Cys C）及其多克隆抗体的制备。方法根据大肠埃希菌编码蛋白的特性设计Cys C编码基因序列,人工合成目的基因,并将其在大肠埃希菌中表达,目的蛋白经亲和层析纯化后免疫新西兰大白兔;采用Western blot和酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测兔血清重组人Cys C及其多克隆抗体。结果制备的重组人Cys C纯度达90%以上,抗重组人Cys C抗体具有很好的结合效价和特异性。结论制备的重组人Cys C及其抗体可用于进一步的实验研究和临床应用。     

血管内皮生长因子受体KDR表达情况检测

目的：检测血管内皮生长因子受体KDR在不同肿瘤细胞和组织中的表达情况。方法：采用细胞酶联免疫和免疫组化法，利用抗KDR单克隆抗体，检测KDR在不同肿瘤细胞和组织表面的表达情况。结果：发现KDR在人肝癌细胞SMMC-7721和人胚胎脐静脉内皮细胞(HUVEC)表面表达阳性，在人正常细胞Wish细胞和人平滑肌细胞表面表达呈阴性。在乳腺癌组织的血管内皮细胞表达阳性，而在乳腺炎和膀胱癌组织的血管内皮细胞表达呈阴性。结论：KDR的特异性表达，可为肿瘤的靶向治疗提供一个很好的靶位点。     

开展人群大规模新冠核酸筛查的混合检测方法研究

目的 为在大规模人群中进行新型冠状病毒核酸筛查时提高检测效率、缩短检测时间,探索混采混检、单采混检检测的合理比例数。方法 对当天采集的56份新鲜样本进行单独检测,再分为混采混检组和单采混检组,各组中均有3∶1、5∶1、10∶1 混合样本,每份混合样本中含1份阳性样本并配备双份样本进行平行试验,比较混采混检和单采混检检测结果的差异。结果 混采混检方案：3∶1 、5∶1 混采混检阳性样本检测结果与单采单检相比Ct值基本不变,检测灵敏度无差异;10∶1 混采混检阳性样本Ct值平均升高2.95个单位（0.71~5.47）,检测灵敏度略有降低,检测结果在临界值（37~40）的样本会成为假阴性。单采混检方案：3∶1、5∶1、10∶1的单采混检阳性样本检测结果与单检相比Ct值平均升高1.13、2.57、4.92个单位（0.30~7.66）,检测灵敏度降低。结论 建议在针对高风险地区的大规模人群筛查时采用5∶1混采混检方案。特殊情况下需要快速提升核酸检测能力时可采取10∶1混采混检方案。对发热门诊、重点人员以及密接人员仍采用单人单采单检的检测方案。     

噬菌体抗体库中筛选特异结合新甲型H1N1病毒scFv分子的研究

目的从人源化噬菌体抗体库中筛选到能高亲和性、特异结合新甲型H1N1流感病毒的单链抗体。为分析H1N1病毒抗原中和表位的活性位点和人源化治疗单抗奠定基础。方法将细胞培养的新型H1N1病毒毒株，经超速离心浓缩纯化后，获得纯的新甲型H1N1病毒，以新甲型H1N1病毒为靶蛋白，以亲和结合为原理，筛选噬菌体scFv抗体文库，经过3轮筛选富集后，随机挑选了96个噬菌体克隆扩增培养，ELISA法挑选能特异性、高亲和性结合目的蛋白的噬菌体克隆。结果经过3轮富集性的亲和筛选．分别从96个噬菌体克隆中挑选到了4株能特异结合新甲型H1N1病毒，而不结合季节性H1N1病毒的单链抗体分子，且PCR扩增都得到了长为368、527和935bp的轻链、重链和轻链一连接片段一重链的基因片段。结论从噬菌体抗体库中筛选到的特异结合新甲型H1N1病毒的单链抗体片段．可为进一步研发新甲流的H1N1快速筛选试剂和人源性治疗抗体奠定基础，也可为鉴定新甲型H1N1病毒中的抗原决定簇提供结构信息。     

广东新型甲型H1N1病毒血凝素基因分子进化与变异

目的 揭示广东地区2009-2011年新型H1N1病毒血凝素基因(HA)进化特征及抗原表位变异特征.方法 采用时空抽样方法抽样,检测2009-2011年广东分离的24株新型H1N1病毒HA基因核苷酸序列,与GenBank中44株国外相应序列比较;比对HA基因核苷酸序列,分析基因分子变异,构建分子遗传动力学MCMC进化树;同时分析2009-2011年广东毒株HA基因的抗原表位变异情况.结果 68株HA基因进化树显示,广东毒株进化树主干至少分为6大分支;其中2011年毒株聚类为2个(Ⅴ和Ⅵ)主要分支,各具基因特征.变异频率较高的位点包括391、467、202和214位,正向选择位点包括8、145和391;广东毒株抗原表位区发生S145L/P、L208I、Q240R、S160G和G187R位点变异.2009年广东毒株HA基因分支Ⅰ毒株可能于2010年传播到亚洲、欧洲和澳洲地区.结论 广东新型H1N1病毒HA基因变异具有传播特征(Ⅰ)和地区特征(Ⅵ),位于抗原表位Ca、Sa和Sb的氨基酸发生变异,其中位点145等变异频率较高,承受着正向选择压力.     

禽流感病毒适应性进化研究进展

禽流感病毒是有严格宿主特异性的负链RNA病毒,但在禽流感病毒进化过程中其基因片段与猪流感或人流感的基因片段发生重配,可获得跨宿主传播的能力,由禽传播给人,并在人间流行,从而发生人感染禽流感病毒事件,对人类健康造成危害。本研究对禽流感病毒适应性进化的相关研究进行综述,总结其基因进化规律,为预防禽流感流行提供科学依据。     

北京房山区农民1991至1999年膳食营养水平的变化

目的：评价20世纪90年代北京市房山区农民人群膳食营养素摄入的变化情况和趋势。方法：1991—04／1999—06在北京市房山区农民人群中对35～65岁的随机抽样样本进行膳食营养调查。应用24h膳食回忆法分别进行了1991／1992年，1995年和1999年的调查，随机样本人数分别为．443人(男209人，女234人)，367人(男163人，女204人)和393人(男180人，女213人)。分性别和不同年龄组对营养素的摄入变化进行比较。结果：1991／1999年，平均每人每天膳食中摄入热量和总蛋白质略升高；动物蛋白质，总脂肪，饱和脂肪酸，单不饱和脂肪酸，胆固醇，Keys分值(膳食脂质分值)变化呈一致性明显逐渐升高趋势，55～65岁男性年龄组中其升高全都有显著性意义(P&;lt;0.05)，在35～54岁女性年龄组中其升高也基本都有显著性意义；碳水化合物，植物蛋白质．钠的摄入略降低，钾、钙、乙醇的变化不大。结论：北京市房山区农民9年来膳食营养摄入的变化呈增加心脑血管病尤其冠状动脉粥样硬化性心脏病危险因素的趋势，需要进行这方面饮食平衡的指导。     

加味香连丸的质量控制研究

[目的]对加味香连丸质量控制进行研究。[方法]采用薄层色谱法对加味香连丸中白芍、当归、黄芩进行定性鉴别,建立高效液相色谱法同时测定加味香连丸中芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、厚朴酚的含量。[结果]白芍、当归、黄芩的薄层色谱鉴别斑点清晰,阴性对照无干扰;高效液相色谱方法测定加味香连丸中芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、厚朴酚分别在0.011 68~0.116 8、0.022~0.22、0.255~0.025 5、0.004 1~0.041 g/L范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.75%、99.79%、99.22%、99.36%(n=6);RSD分别为1.63%、1.3%、1.57%、1.6%。[结论]本法简便易行、准确、重现性良好,为加味香连丸的质量控制提供了理论依据。     

正交实验法优化番泻叶的提取工艺

[目的]优选番泻叶中番泻苷的最佳提取工艺。[方法]建立同时测定番泻叶中番泻苷A和番泻苷B含量的方法,以番泻苷A、B的含量为指标,在单因素考察的基础上,进行正交实验优选最佳提取工艺。[结果]番泻叶中番泻苷的最佳提取工艺为10倍量0.5%的碳酸氢钠60℃搅拌提取1 h。[结论]优化后的提取工艺稳定可靠,可为番泻苷相关研究和实际生产提供依据。     

老年性白内障超声乳化人工晶体植入术40例护理体会

超声乳化术治疗白内障具有切口小、术后反应轻、愈合快、视力恢复快及手术时间短等优点,由于技术发展成熟,为门诊患者提高了技术保证[1].我院对40例老年性白内障行白内障超声乳化术取得良好的效果.