疱疹病毒gD基因多聚核苷酸疫苗的构建和表达

目的：构建疱疹病毒gD2基因多聚核苷酸疫苗并在实验动物中得到表达。方法: 将构建的pcDNA3－gD2的质粒DNA注射入豚鼠的舌肌中,每周1次,共3次,最后1次免疫48h后引颈处死豚鼠,并取其舌、肝、脾、肾、心脏及股四头肌,用免疫组化法（SP法）检测gD2抗原的表达。结果：重组质粒组gD2真核表达载体免疫接种后,均可在舌肌测到抗原表达,而对照组均为阴性。结论：重组质粒gD2真核表达载体可以在豚鼠舌肌中表达,对建立基因免疫防治疱疹病毒感染奠定一定基础。     

参桃软肝丸抑制人肝癌细胞增殖及增强LAK抑瘤活性的实验研究

目的：研究中药复方参桃软肝丸对人肝癌细胞BEL－7402、SMMC－7721增殖的影响,探讨其抗癌作用机制。方法：参桃软肝丸灌胃给药后,采集大鼠血清,处理人肝癌细胞BEL－7402、SMMC－7721,MTT法观察细胞增殖;并与淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）共同处理以上两种细胞,结果：参桃软肝丸具有显著抑制BEL－7402、SMMC－7721增殖的活性,结论：抑制人肝癌细胞增殖,提高LAK活性可能是参桃软肝丸抗肝癌的主要作用机制。     

正常恒河猴脾转移因子对人淋巴细胞内CAMP ~3H—TdR掺入及E受体的影响

正常人转移因子(简称 TF)在国内外应用于临床已有多年,对多种免疫性疾病有显著疗效。但正常人 TF 的材料来源有限。因此,我们拟探讨灵长类动物恒河猴的脾脏和淋巴结制备的 TF,除试投予临床试用外,亦对其进行一些体外免疫性的研     

木瓜凝乳蛋白酶对长春新碱杀伤鼠肝癌细胞hepa-6的促进作用

目的　测定木瓜凝乳蛋白酶与长春新碱 (VCR)联合使用对鼠肝癌细胞hepa - 6的细胞毒性作用。方法　实验分为 3组 :酶组、VCR组、酶 VCR组 ,在培养不同时间 ,3种不同浓度的酶与VCR单独或联合使用时 ,采用MTT法检测对鼠肝癌细胞hepa - 6的细胞毒性。同时分析培养时间对木瓜凝乳蛋白酶活力的影响。结果　木瓜凝乳蛋白酶对hepa - 6细胞的半抑制浓度 (IC50 )约为 1 2 0 0 μg/ml,随浓度的增加对细胞的抑制率增加。 3种不同浓度的酶 (5 0 ,1 0 ,2 μg/ml)与VCR(1 0 μg/ml)联合使用时 ,在细胞培养至 4 8h前 ,木瓜凝乳蛋白酶均能促进VCR杀伤鼠肝癌细胞hepa - 6 ;这个现象与酶在生理盐水中的活力变化是一致的。结论　木瓜凝乳蛋白酶对鼠肝癌细胞hepa - 6具有细胞毒作用 ,对长春新碱杀伤鼠肝癌细胞hepa - 6具有促进作用     

抗人尿道高分化鳞癌单抗E6及F9在上皮性肿瘤组织的表达及其意义

目的　探讨E6,F9在鳞癌和腺癌中的表达及其临床意义。方法　利用免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白 -过氧化物酶 (SP)法检测 3例正常人组织 ,4 8例肿瘤患者组织 ,其中包括乳腺、胃、结肠、肺腺癌、阴茎、口腔、原癌、宫颈鳞癌各 6例。结果　正常组织呈阴性染色。肿瘤组织呈现细胞膜和细胞浆阳性着色 ,E6阳性表达率在鳞癌中为 91% (2 2 / 2 4 ) ,腺癌中为 88% (16 / 18) ,直肠癌为 83% (5 / 6 ) ,在肿瘤组织中综合表达率为 89% (4 3/ 4 8) ,F9阳性表达率在鳞癌中为 91% (2 2 / 2 4 ) ,腺癌中为 83% (15 / 18) ,直肠癌为 83% (5 / 6 ) ,在肿瘤组织中综合表达率为87% (4 2 / 4 8)。结论　单抗E6,F9具有比较强的特异性 ,其高效表达可用来判定鳞癌和腺癌的生物学行为 ,并为鳞癌和腺癌的预后提供依据。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗的免疫研究

目的　构建新型单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗 ,鉴定其在哺乳细胞中的表达 ,检测其激发动物产生免疫反应的能力。方法　RT -PCR鉴定gD基因在COS - 7细胞中的表达 ,ELISA检测血清中中和抗体水平 ,用病毒攻击后检测其保护效率。结果　pVAX -gD能在COS- 7细胞中表达 ,并可激发免疫动物产生高滴度中和抗体 ,有效保护动物免受致死量病毒的攻击。结论　构建的新型单纯疱疹DNA疫苗是一株很有希望的人用生殖器疱疹疫苗     

逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA

本文应用逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA,并与检测抗HCV IgG的ELISA方法进行比较。结果提示逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA,具有早期、灵敏、特异性高的优点。     

胃肠道腺癌患者血清抗癌胚抗原抗体的检测

目的：探讨胃肠道腺癌患者血清中IgG和IgM抗癌胚抗原(CEA)抗体的情况，评价CEA及IgG和IgM抗CEA抗体的联合检测在胃肠道腺癌诊断中的意义。方法：用放免法检测血清中CEA含量，酶联免疫吸附法(EuSA)检测血清中IgG和IgM抗CEA抗体，用竞争抑制法检测抗体的特异性。结果：胃肠道腺癌患者血清CEA含量升高者(≥15ng／ml)占30．9％(21／68)，IgG抗CEA抗体阳性者占35．3％(2，4／68)，IgM抗CEA抗体阳性者占26．5％(18／68)，CEA及抗CEA抗体的联合检测可使胃肠道腺癌的阳性率提高到60．3％(41／68)；健康对照组血清CEA升高者为0，IgG和IgM抗CEA抗体阳性者占3.3%，(1／30)。结论：胃肠道腺癌患者血清中IgG和IgM抗CEA抗体的检出率较高，这些抗体与血清CEA水平的联合检测可提高胃肠道腺癌的诊断率。     

木瓜凝乳蛋白酶与5-Fu或MTX对人肝癌细胞7402的细胞毒试验

目的：测定木瓜凝乳蛋白酶及其与5-氟尿嘧啶(5-Fu)、氨甲喋呤(MTX)单独或联合作用对人肝癌细胞7402的细胞毒性。方法：采用MTT法，不同浓度的酶和药物在不同的培养时间下，通过其细胞抑制率和半数抑制率(IC50)测定木瓜凝乳蛋白酶及联合药物的细胞毒性。结果：木瓜凝乳蛋白酶对7402细胞的：IC50约为125μg／mL，随浓度增加对细胞的抑制率增加。培养36h时酶对细胞的毒性最大。酶与5-Fu、MTX联合使用比单独使用效果更好。结论：木瓜凝乳蛋白酶对人肝癌细胞7402具有细胞毒作用，酶在培养36h时细胞毒作用最大；联合化疗药物有一定的效果。     

钙离子载体诱导HL-60细胞分化成树突状细胞的实验研究

目的 :探讨一种钙离子载体 (calciumionophore,CI)A2 3187,能否诱导早幼粒白血病细胞株HL 6 0分化成具有活性的树突状细胞 (dendriticcells,DCs)。方法 :将生长状态良好的HL 6 0细胞分别加在普通培养液中 ,或在含不同浓度 (2 5～ 16 0 0 μg/L)的A2 3187及 10 0 μg/L重组人粒 /单集落刺激因子 (rhGM CSF)的普通培养液中培养。 2 4～ 96h后 ,在光镜及电镜下观察细胞的形态 ;用流式细胞仪检测细胞的表面标志 ,MTT比色法检测其刺激同种异体T细胞增殖的作用。结果 :HL 6 0细胞以适量 (2 0 0 μg/L)的A2 3187诱导 2 4h ,DC的特征性表面标志CD83分子的表达最高 ,72h可出现典型的树突状突起 ,96h细胞表面CD80 (B7.1)、CD86 (B7.2 )、MHC II分子及细胞间黏附分子CD5 4的表达最高 ,且能明显激活同种异体T细胞。结论 :钙离子载体A2 3187可将HL 6 0细胞诱导成具有活性的DC样细胞。