抗淋病奈瑟菌外膜蛋白I多克隆抗体的制备及其ELISA双抗夹心法的建立

目的 制备抗淋病奈瑟菌外膜蛋白I多克隆抗体,建立检测外膜蛋白I的双抗夹心法。方法 以淋病奈瑟菌及其外膜蛋白I作为抗原,分别免疫健康雄性家兔及雌性BALB/C小鼠,制备兔抗淋病奈瑟菌和鼠抗外膜蛋白I多克隆抗体,并采用 ELISA法检测抗体效价。结果与讨论 经ELISA证明兔抗淋病奈瑟菌多抗可与淋病奈瑟菌外膜蛋白I呈高效价反应,以此建立的ELISA双抗夹心法检测外膜蛋白I可获满意结果。     

卵巢肿瘤干细胞中趋化因子的表达与细胞侵袭转移能力的关系

目的探讨卵巢肿瘤干细胞中趋化因子的表达与细胞侵袭转移能力的关系,为卵巢肿瘤的治疗提供新的研究思路和药物作用靶点。方法采用流式细胞术与RT-PCR方法检测卵巢肿瘤干细胞系CAOV-3中CXCR4的表达,通过体外微孔隔离室（Transwell）检测CXCR4对CAOV-3细胞侵袭转移能力的影响。结果 CXCR4在CAOV-3中细胞呈阳性表达,CXCL12可促进CAOV-3细胞的迁移,CXCR4的封闭能抑制CXCL12对CAOV-3迁移的促进作用。结论 CXCL12-CXCR4相互作用可促进卵巢肿瘤干细胞侵袭转移,在卵巢肿瘤的生长和侵袭转移过程中起着重要作用。     

HBx及其突变体X17-3对Hippo信号途径表达的影响

目的初步探寻HBx及其不同突变体表达与Hippo信号途径的关系,以及对细胞凋亡的影响。方法 HBx及其突变体载体转染人正常肝细胞系L02,转染48 h后,提取总蛋白,Western blot检测细胞中Hippo信号途径MST1、YAP(yes-associated protein)的表达,磷酸化和去磷酸化的情况。采用Annexin V/PI标记流式细胞术检测细胞凋亡。结果HBx及其突变体载体转染L02细胞48 h后,Western blot结果显示细胞MST1表达下调,p-MST1/2表达上升(P<0.05);YAP表达上升,p-YAP表达下调(P<0.05)。Annexin V/PI标记法流式细胞术结果显示HBx及其突变体能促进L02细胞发生凋亡(P<0.05),其介导的细胞早期凋亡尤为明显。结论 HBx通过Hippo信号通路途径调控下游致癌基因YAP的表达。结合HBx介导的L02细胞凋亡这一结果说明HBx可能通过多种途径调节细胞周期。     

人-鼠异基因移植物抗宿主动物模型的建立与检测

目的　建立一种人 鼠异基因移植物抗宿主动物模型 ,为研究人 鼠嵌合抗体在动物体内移植排斥反应中的作用提供动物模型。方法　将人外周血单个核细胞移植到裸鼠体内 ,记录动物的存活时间 ;用流式细胞术对裸鼠脾细胞表型进行分析 ,并经组织病理学切片鉴定移植物抗宿主动物模型 (人外周血 裸鼠 )的建立。结果　外周血 裸鼠存活时间为 (2 2 5 0± 6 36 )d ;流式细胞术检测显示人外周血 裸鼠脾脏内人白细胞占 6 0 % ;组织病理学切片显示其肝脏、肺、脾脏有大量淋巴细胞浸润。结论　人 鼠异基因移植物抗宿主动物模型复制成功。     

携带SLC基因的Birc5-siRNA质粒载体的构建及鉴定

目的：构建携带SLC基因的Birc5‐siRNA质粒载体,为肿瘤靶向治疗研究提供基础。方法使用Ambion公司siRNATarget Finder设计的Birc5 mRNA干扰序列,将Birc5‐siRNA插入载体 PEGFP6‐1后转化大肠埃希菌扩增培养,提取质粒;将SLC插入质粒pGenesil‐8后转化细菌扩增培养,提取质粒;挑取酶切鉴定正确的质粒转化菌液测序鉴定;采用分子克隆技术构建特异性沉默Birc5且携带SLC基因的质粒,命名为pgsiRNA‐Birc5＋SLC。结果质粒Birc5能被 EcoRⅠ酶切出1条约400 bp的DNA条带,说明Birc5‐siRNA 已插入质粒载体PEGFP6‐1;pGenesil‐8‐SLC能被BglⅡ＋ XbaⅠ酶切出1条约430 bp的DNA条带,说明SLC插入正确;酶切鉴定正确的质粒转化菌液Birc5‐siRNA和SLC测序结果显示均为插入正确的克隆质粒;经酶切鉴定分析显示pgsiRNA‐Birc5＋SLC符合酶切鉴定结果,表明携带SLC基因的Birc5‐siRNA质粒载体构建成功。结论成功构建了携带SLC基因的Birc5‐siRNA质粒,为进一步研究靶向沉默肿瘤Birc5基因并趋化淋巴细胞抗肿瘤研究提供了工具和基础。     

心内科病房夜间输注多巴胺的管理

总结238例微泵输注多巴胺患者夜间护理。认为微泵输注多巴胺患者在夜间存在较多不安全因素,护士要加强责任心,认真交接班,保证剂量准确无误,保持管道通畅,防止药液外渗,密切观察用药效果,保证患者血压平稳,严防药物骤然增多或减少,提高夜间护理质量。     

TLR4与TLR9在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Toll样受体4(TLR4)、TLR9在肝癌发生、发展中的作用。方法搜集临床经病理证实的肝癌及相应癌旁组织标本、肝血管瘤组织标本,分别用免疫组化法及流式细胞术检测TLR4、TLR9表达。结果肝癌组织中TLR4表达明显低于癌旁及肝血管瘤组织,而TLR9表达明显高于癌旁及肝血管瘤组织,P均<0.05。结论TLR4、TLR9与肝癌的发生、发展有关;乙肝病毒可能通过拮抗TLR4表达、激活TLR9通路促进肝癌的进展。     

老年心力衰竭患者服用地高辛依从性原因分析及护理

目的探讨影响地高辛药物依从性的因素。方法通过对100例老年心衰服用用地高辛的患者采用询问、电话随访、调查问卷的方法,评价影响地高辛药物依从性的因素,并实施有效的护理对策。结果影响地高辛药物依从性的因素有病人的健康信念模式、相关知识、药物的副反应等。结论除了让患者被动地遵从医嘱外,提高地高辛药物依从性,可减少并发症,提高生活质量。     

阿莫西林钠舒巴坦钠和长春西丁存在配伍禁忌

阿莫西林钠舒巴坦钠是由阿莫西林钠和舒巴坦钠组成的复方制剂,是抗生素和β-内酰胺酶抑制剂的复合剂,是广谱抗菌药。适用于上呼吸道感染、下呼吸道感染、泌尿系统感染、盆腔感染、口腔感染等。长春西丁主要用于改善脑梗死后遗症、脑出血后遗症、脑动脉硬化等,对大脑血管有选择性作用,通过增加脑血流量,改善大脑氧的供给。在临床输液过程中,笔者发现这2种药物存在配伍禁忌,现报道如下。     

EGFR特异性单链抗体与靶细胞结合的特异性

目的:检测EGFR特异性单链抗体F4-scFv与EGFR阳性及阴性细胞结合特性。方法:提取细菌周质腔蛋白经N i-NTA柱纯化F4-scFv;采用流式细胞术及W estern b lot检测F4-scFv与EGFR阳性及阴性细胞结合的特异性。结果:N i2+柱纯化的F4-scFv经SDS-PAGE可见分子量为36 kDa单一条带,F4-scFv可与EGFR阳性细胞CHO-EGFR-GFP1、A431及MDA-MB-231特异性结合,而不与EGFR阴性细胞CHO-K1及SKOV3结合。结论:F4-scFv可与天然表达EGFR的细胞特异性结合,为其靶向抗肿瘤研究奠定了基础。