COMPARATIVE PATHOLOGICAL AND FCM STUDIES ON THE PRIMARY AND METASTATIC CANCERS IN STOMACH AND BREAST

ＣＯＭＰＡＲＡＴＩＶＥＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡＬＡＮＤＦＣＭＳＴＵＤＩＥＳＯＮＴＨＥＰＲＩＭＡＲＹＡＮＤＭＥＴＡＳＴＡＴＩＣＣＡＮＣＥＲＳＩＮＳＴＯＭＡＣＨＡＮＤＢＲＥＡＳＴ￥ＺｈａｎｇＸｉａｎｇｈｏｎｇ；张祥宏；ＺｈａｎｇＪｉｅｙｉｎｇ；张杰英；Ｘｉ...     

脑星形细胞瘤中TIP30、VEGF和CD34的表达及其相关性研究

Objective To investigate the expression and relationship of TIP30(HIV-1 Tat interactive protein 2), vascular endothelial growth factor (VEGF) and MVD (detected by CD34) in the angiogenesis of human brain astrocytomas. Methods Expression of TIP30, VEGF and CD34 in 19 cases of normal brain tissue and 71 cases of astrocytoma were immunohistochemically examined with Elivision plus two-step method. Results The positive expression of TIP30 could be seen in cytoplasm of neuroglial cells and neurons of 19 normal brain tissues. The positive expression rate of TIP30 in 71 cases of astrocytoma was 33.80 % (24/ 71). The positive expression rate of TIP30 in astrocytoma of different grades was 52 % for grade Ⅱ, 34.78 % for grade Ⅲ and 13.04 % for grade Ⅳ. The positive expression rate of TIP30 in high grade (Ⅲ+Ⅳ) of astrocytoma was found significantly lower than that in low grade(Ⅱ) (χ2=5.71, P <0.05); The expression of VEGF and MVD detected by CD34 in astrocytomas were higher than that in normal brain tissue and increased as the tumor grade increased; In astrocytoma, the negtive correlation was found between the expression of TIP30 and VEGF (r=-0.428, P<0.05); no correlation was found between TIP30 and MVD(r=-0.065, P 0.05); the positive correlation was found between VEGF and MVD(r=0.684, P<0.01). Conclusion The positive expression rate of TIP30 in normal brain tissue is significantly higher than that in astrocytoma. The positive expression rate of TIP30 significantly decreases as the pathological grade of the astrocytoma increases; The expression of TIP30 and VEGF is negatively correlated in astrocytoma.     

大肠腺瘤样息肉癌变中ras p21,p53表达及DNA含量变化

目的；探讨大肠腺瘤样息肉癌变机理。方法：以病理学与ＦＣＭ技术相结合的方法，定量研究４３例大肠腺瘤样息肉（ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌａｄｅｎｏｍａｔｏｕｓｐｏｌｙｐｓ，ＣＡＰ）ＣＡＰ伴有上皮不典型增生及ＣＡＰ癌变细胞的ＤＮＡ含量与癌基因，ｒａｓ表达及抑癌基因，ｐ５３异常表达，结果：ＣＡＰ细胞ＤＮＡ含量均处在ＤＮＡ二倍体的范围内，而ＣＡＰ伴上皮不典型增生和ＣＡＰ癌变组细胞的ＤＮＡ含量明显高于ＣＡＰ，且为ＤＮ     

工频均匀强磁场促进体外培养SNU细胞凋亡及其相关机理的研究

观察50Hz工频均匀强磁场(0.097T)对人低分化胃腺癌细胞株-SNU细胞凋亡的影响,并通过检测Bax、Bcl-2和Caspase-3三种蛋白表达的变化探讨其可能机制。体外培养SNU细胞,给予50Hz工频均匀强磁场(0.097T)处理后应用流式细胞定量检测和透射电镜超微结构观察,研究该磁场对SNU细胞凋亡的影响,并应用流式细胞定量检测、免疫细胞化学染色和蛋白免疫印迹相结合的方法,检测三种凋亡相关蛋白的表达。给予工频均匀强磁场处理后SNU细胞的凋亡率明显升高,此外,SNU细胞内Bax和Caspase-3蛋白的表达量随处理时间延长逐渐增加,而给予磁场处理后Bcl-2蛋白的表达量随处理时间延长逐渐下降。工频均匀强磁场处理可以促进体外培养SNU细胞凋亡,其可能机理为上调Bax和Caspase-3蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。     

Maspin蛋白在乳腺癌与癌旁组织中的表达及其意义

目的:探讨Maspin蛋白在乳腺癌与癌旁组织中的表达及其意义.方法:采用免疫组化SP法检测104例浸润性乳腺癌、26例癌旁原位癌成分、63例癌旁导管上皮增生性病变(不典型增生20例、单纯性增生43例)及10例正常乳腺组织中Maspin蛋白的表达情况,同时分析浸润性乳腺癌组织中Maspin蛋白表达与病理组织学分级、淋巴结转移及ER、PR、c-erbB-2、Cath-D、VEGF表达的关系.结果:正常乳腺上皮细胞Maspin蛋白阳性反应主要位于细胞核,所有正常乳腺上皮细胞核均呈高表达( ～ ,100%),乳腺上皮单纯性增生、不典型增生、原位癌和浸润性乳腺癌细胞核Maspin蛋白高表达率分别为76.7%、65.0%、69.2%,和49.0%.从正常乳腺上皮到癌旁不典型增生细胞核Maspin蛋白高表达率呈渐趋下降趋势,不典型增生与原位癌的表达无明显差异,浸润性乳腺癌表达最低,Logistic回归模型分析不同组织细胞核Maspin蛋白高表达间存在显著差异(P＜0.05);而单纯性增生、不典型增生、原位癌和浸润性乳腺癌细胞浆Maspin蛋白高表达率分别为51.2%、85.0%、69.2%和63.5%,正常乳腺上皮未见细胞浆表达.不同组织Maspin蛋白的细胞浆表达同样有显著差异(P＜0.01),其中癌旁不典型增生较乳腺癌有更高的细胞浆表达.进一步研究发现浸润性乳腺癌细胞核Maspin蛋白表达与乳腺癌病理组织学分级及c-erbB-2表达呈负相关,与ER水平呈正相关;而与PR、Cath-D、VEGF的表达和淋巴结转移无明显相关.乳腺癌细胞浆Maspin蛋白与病理组织学分级、淋巴结转移及各项生物学因素无关.结论:细胞核Maspin蛋白绝大多数高表达于癌旁单纯性增生及正常乳腺上皮,细胞浆Maspin蛋白的高表达多出现在乳腺癌的早期及癌旁不典型增生,推测Maspin基因在乳腺癌的发生、发展中可能起一定的作用.     

乳腺导管内乳头状瘤和导管癌中Pten、p16基因蛋白表达研究

 目的　分析抑癌基因Pten及p16蛋白在乳腺导管内乳头状瘤和导管癌组织中的表达 ,以进一步探讨导管内乳头状瘤的生物学特性。方法　应用间接免疫荧光染色流式细胞术对 2 3例乳腺导管内乳头状瘤、2 9例导管癌Pten及p16在蛋白水平上的表达情况进行定量检测。结果　正常乳腺组织、导管内乳头状瘤和导管癌组织中Pten蛋白表达阳性率逐渐下降 ,分别为 10 0 %、4 7.83%及 10 .34% ,三组比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。与Pten结果相似 ,在所有的正常乳腺组织中 p16均呈阳性表达 ,而在导管内乳头状瘤和导管癌中p16的表达均有不同程度降低 ,分别为 82 .6 1%及 2 4 .14 % ,两组与正常对照比较有显著性差异 (P <0 .0 1) ,而导管内乳头状瘤与导管癌之间 p16蛋白表达无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　乳腺导管内乳头状瘤存在Pten和p16蛋白表达异常 ,提示导管内乳头状瘤是一种具有抑癌基因变化的癌前病变。     

杂色曲霉素单次灌胃后小鼠第四脑室外侧隐窝超微结构的变化

目的观察杂色曲霉素（ST）对外侧隐窝处室管膜细胞、神经元、神经纤维和血管内皮细胞的影响.方法 BALB/c小鼠,ST单次灌胃,分别于灌胃后1、2、4、8、16 h处死动物,用透射电镜观察外侧隐窝室管膜细胞、神经元、神经纤维和血管内皮细胞的结构变化.结果 ST灌胃后1 h血管内皮细胞吞饮囊泡开始增多,2 h组室管膜细胞的顶浆分泌增多,部分神经髓鞘变性;4 h和8 h组神经纤维广泛变性,神经元线粒体变性、核切迹和空泡出现;16 h组神经元胞浆内线粒体变性更加明显,并出现脂褐素.结论单次灌胃后,ST即可引起外侧隐窝处室管膜细胞、神经纤维、神经元和内皮细胞的改变,但ST主要是对神经纤维和神经元的损伤.     

气管给予黄曲霉毒素G1对大鼠肺组织CC-10表达的影响

目的： 探讨1次性支气管给予黄曲霉毒素G1(AFG1)对大鼠肺组织CC-10表达的影响。方法: 按30 μg/kg剂量经支气管1次性给予雄性SD大鼠AFG1处理。处理1、3、7和14 d后分别处死动物。收集肺泡灌洗液(BALF)，采用生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力。采用流式细胞术(FCM)和蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测肺组织中CC-10蛋白的表达；采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测CC-10mRNA水平的表达。结果: 给予AFG1作用后肺泡灌洗液中LDH活力升高(P<0.01)，至14 d时恢复到正常水平。FCM和蛋白免疫印迹方法检测CC-10蛋白结果发现AFG1作用3、7和14 d，CC-10蛋白表达明显低于对照组(P<0.01, P<0.01)，蛋白免疫印迹结果同FCM一致。AFG1作用3、7和14 d大鼠肺组织CC-10 mRNA表达明显低于对照组(P<0.01)。结论: 支气管1次性给予AFG1作用对大鼠肺组织具有明显的致损伤作用，降低CC-10蛋白和mRNA的表达水平。     

TAP1真核表达载体的构建及其对GES-1细胞HLA-I分子表达的影响

目的:构建抗原加工相关转运蛋白TAP1真核表达载体,并观察其对HLA-I分子表达的影响。方法:采用基因重组技术,构建含人TAP1基因全长的pcDNA3.1/V5-His-TAP1真核表达质粒,并采用细胞转染、RT-PCR、Western blot以及流式细胞术(FCM)观察TAP1转染对胃黏膜上皮(GES-1)细胞HLA-I分子表达的影响。结果:以人外周血单个核细胞总RNA为模板,经RT-PCR反应获得人全长TAP1基因,以pcDNA3.1/V5-HisB为载体,经酶切、连接、转化等基因重组技术,构建了含人TAP1基因全长的pcDNA3.1/V5-His-TAP1质粒,并经测序结果证实。以GES-1作为靶细胞进行转染,经RT-PCR和Westernblot证实,转染后TAP1基因表达明显增加,细胞适于所构建的TAP1质粒的转染。进一步检测了TAP1转染对GES-1细胞HLA-I类分子表达的影响。结果发现,TAP1转染组HLA-A、HLA-B、HLA-C(重链)在mR-NA水平表达明显增加,β2m(轻链)mRNA水平无明显影响。FCM及Western blot检测结果表明,TAP1转染可以上调HLA-I蛋白的表达。结论:成功构建了TAP1真核表达质粒,细胞转染后TAP1表达的增加,可引起细胞表面HLA-I分子表达的相应增加,从而证实了TAP1在HLA-I抗原表达以及抗原递呈途径中的重要作用。     

核黄素和抗坏血酸对脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导小鼠胸腺细胞凋亡和增殖抑制影响的研究

目的:探讨核黄素和抗坏血酸在体内对脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (DON)诱发小鼠胸腺细胞凋亡的阻断作用。方法:采用动物实验,应用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测方法分析核黄素和抗坏血酸预处理对DON诱导小鼠胸腺细胞凋亡和增殖抑制的影响。结果:FCM检测结果表明,4mg/kgDON可诱导小鼠胸腺细胞凋亡,其凋亡率为13.73%±1.53 %。核黄素 (1.25-10mg/kg)和抗坏血酸 (25-100mg/kg)预处理组小鼠胸腺细胞凋亡率均明显低于DON组 (P <0.05),但不同剂量核黄素和抗坏血酸预处理组间凋亡率无明显差异。DNA琼脂糖凝胶电泳结果亦证实,DON处理组细胞出现明显的凋亡特有的“梯状条带”,而核黄素和抗坏血酸预处理各组及生理盐水对照组细胞均未出现“梯状条带”。给予核黄素和抗坏血酸预处理的各DON处理组细胞增殖指数与DON处理组细胞增殖指数之间无明显差异。结论:核黄素和抗坏血酸均可一定程度抑制DON体内对小鼠胸腺细胞的致凋亡作用,但对DON抑制胸腺细胞增殖的作用无明显影响.