不同方法检测同种异基因造血干细胞移植受者巨细胞病毒感染的探讨

本研究探讨同种异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后早期有效检测巨细胞病毒（CMV）感染的方法。应用荧光定量PCR和ELISA试剂盒分别检测19名allo-HSCT受者,214份标本的血浆DNA负荷量和血清IgM抗体,同时应用流式细胞术检测188份标本白细胞pp65抗原。结果表明：pp65抗原、DNA定量和IgM抗体的阳性检出率分别为30.85%（58/188）、35.51%（76/214）和13.08%（28/214）,连续阳性病例和临床诊断的符合率分别为7/8、7/8和3/8。DNA定量与pp65抗原阳性检出率的差别无统计学意义（P〉0.05）,但两种检测方法有明显的相关性（P〈0.05）。IgM抗体阳性检出率明显低于DNA定量和pp65抗原,其差别均有统计学意义（P〈0.05）,与另两种检测方法虽有关系,但不密切。结论：流式细胞术和荧光定量PCR检测allo-HSCT受者CMV早期感染可靠、简便快速,值得临床推广使用。     

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??Abstract??New drugs such as rituximab had improved the efficacy of patients with non-Hodgkin lymphoma(NHL)significantly??but for high-risk patients or relapsed/refractory patients??hematopoietic stem cell transplantation(HSCT)is still the only way to save their lives.Autologous stem cell transplantation(ASCT)has an important role in the treatment of NHL??especially in the relapse setting.It is also under investigation after first-line therapy??for example??in patients with mantle cell or T cell lymphomas.Chemosensitive is the main prognosis factor.The number of allogeneic stem cell transplantations(allo-HSCT)in NHL patients has increased over the last decade??especially reduced-intensity conditioning stem cell transplantation has been applied more widely because of its graft-versus-lymphoma(GVL)effect with lower transplantrelated mortality.But the role and timing and the best RIC regimen of RIC-allo-HSCT in the treatment of NHL remains unclear??more prospective and random clinical research should ascertain these problems.     

化疗后发生肝、脾真菌感染1例报告并文献复习

目的：报道1例急性部分分化型髓系白血病（AML-M2）患者化疗后发生肝、脾真菌感染（hepatosplenic fungal infection，HSF）及其治疗经过，并进行文献复习。方法：我院2001年收治1例AML-M2a患者，化疗后发生HSF，先后给予两性霉素B、氟康唑、大蒜油、伊曲康唑及各种抗生素联合治疗，并行脾切除术。结果：经过上述治疗，无法控制侵袭性真菌感染，但患者至今仍存活并继续治疗。结论：HSF早期诊断和治疗困难，病死率高，需采取预防措施，手术切除感染灶对于延长生存期可能是有效的。     

谷氨酰胺双肽在异基因外周造血干细胞移植中的临床应用

目的研究谷氨酰胺双肽(Gln)在异基因外周造血干细胞移植(Allo-PBSCT)中的作用。方法将24例进行Allo-PBSCT的血液系统肿瘤患者分为标准化胃肠外营养液组(标准组,n=13)和加用Gln双肽的胃肠外营养液组(Gln组,n=11),造血干细胞输注后第1天开始给予胃肠外营养。结果两组患者营养物质的摄入基本相同,Gln组有3人发生粘膜炎,标准组有8人,两组相比差异有显著性(P<0.05);Gln组有1人发生严重腹泻,标准组有4人,两组相比差异有显著性(P<0.05);Gln组有1人发生临床感染,标准组有4人,两组相比差异有显著性(P<0.05);标准组中性粒细胞(ANC)≥0.5×109/L的时间为(13.9±3.4)d,Gln组为(13.9±3.3)d,两组相比差异有显著性(P>0.05);Gln组抗生素治疗时间为(12.2±2.1)d,标准组为(15.3±2.6)d,两组相比差异有显著性(P<0.05);Gln组住无菌病房时间缩短[(29.7±1.3)dvs(33.1±2.6)d,P<0.05]。结论两组患者中性粒细胞移植成功的时间无差异,但Gln能减少粘膜炎、严重腹泻和临床感染的发生率,缩短抗生素治疗时间及住无菌病房的时间。     

脂肪源间充质干细胞治疗aGVHD后T细胞亚群的变化yh

目的:探讨脂肪源间充质干细胞(adultadiposetissue?derivedmesenchymalstemcells,AMSC)治疗急性移植物抗宿主病(acutegraft-versus-hostdisease,aGVHD)的机制。方法:3例行异基因造血干细胞移植术后发生aGVHD患者,以每公斤体重2×106个细胞剂量静脉输注AMSC;首先应用尼龙毛柱分离外周血T淋巴细胞,再经CD4或CD8免疫磁珠分选出CD8+或CD4+T淋巴细胞,应用流式细胞术检测发生aGVHD患者使用AMSC前后外周血CD8+及CD4+T细胞亚群的变化。结果:与输注AMSC前相比,输注AMSC后,CD8+T细胞中的CD8+CD28CD25--亚群显著上调,CD4+T细胞中的CD4+CD25+亚群并无明显变化,同时,患者的aGVHD得以有效控制。结论:AMSC治疗aGVHD的作用机制可能与其上调CD8+CD28-T细胞亚群有关,而与CD4+CD25+亚群可能并无直接关联。     

异体脂肪源间充质干细胞移植后稳定嵌合体的形成及免疫耐受的诱导

目的研究器官移植中脂肪源F1k1＋CD31—CD34-细胞诱导免疫耐受的可能性。方法以CM—DiI荧光染料示踪脂肪源F1k1＋CD31-CD34-细胞的体内分布情况，并以PCR方法检测Y染色体的存在以进-步鉴定；以皮肤移植实验观察脂肪源F1k1＋CD31-CD34-细胞移植组小鼠对供者来源组织器官移植物的反应性。结果脂肪源F1k1＋CD31-CD34-细胞可进入并较长期（30d）存在于异基因小鼠免疫器官内；在细胞移植组小鼠脾脏中可检测到供者来源T细胞，占受者脾细胞6．68％；脂肪源F1k1＋CD31-CD34-细胞移植组小鼠供者来源皮肤移植物存活〉90d，未处理组平均为10d。结论异基因脂肪源F1k1＋CD31-CD34-细胞移植后可形成稳定嵌和体，并诱导特异性免疫耐受的产生。     

添加谷氨酰胺的全胃肠外营养对造血干细胞移植术后常见并发症的防治作用

目的:严重的黏膜损伤是诱发造血干细胞移植后出现并发症的一常见原因,已有证据显示谷氨酰胺能降低接受化疗患儿黏膜炎的发生率。观察谷氨酰胺对异基因外周造血干细胞移植患者并发症及恢复的影响。方法:选择于2002-03/2006-11在河南省血液病研究所接受同胞异基因外周造血干细胞移植的48例血液系统肿瘤患者。所有患者及其家属对治疗和实验均知情同意,并经医院伦理委员会批准。所有患者移植前均处于完全缓解状态,营养中等或良好,心、肝、肾功能正常,将48例患者随机分为标准化全胃肠外营养液组(标准组,n=13)和加用谷氨酰胺的全胃肠外营养液组(谷氨酰胺组,n=35)。待患者中性粒细胞升至1.0×109L-1,且无任何感染指征,进行异基因外周造血干细胞移植。造血干细胞输注后第1天开始给予全胃肠外营养与胃肠外营养联合谷氨酰胺双肽,至中性粒细胞≥1.0×109L-1,且无消化道症状时停用。观察两组患者中性粒细胞恢复时间、出层流室时间以及关于感染、急性移植物抗宿主病等情况有无差异。结果:48例患者均进入结果分析。两组患者营养物质的摄入基本相同,谷氨酰胺组有6例发生黏膜炎,标准组有11例,差异显著(P<0.05);谷氨酰胺组有1例发生严重腹泻,标准组有5例,差异显著(P<0.05);谷氨酰胺组有3例发生临床感染,标准组有7例,差异显著(P<0.05);标准组中性粒细胞≥0.5×109L-1的持续时间短于谷氨酰胺组(P>0.05);谷氨酰胺组抗生素治疗时间及无菌病房居住时间较标准组短(P<0.05);两组急性移植物抗宿主病发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:添加谷氨酰胺的全胃肠外营养可改善异基因造血干细胞移植患者的营养状态,减少感染及肠损害,减少急性移植物抗宿主病的发生,有利于异基因移植患者恢复。     

造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病中监测BCR／ABL融合基因的应用

目的 研究应用筑巢式逆转录多聚合酶链反应法(nested．RT-PCR)监测bcr／abl融合基因mRNA在异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病(CML)效果监测方面的价值。方法 应用RT-PCR方法定期检测异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病患者前后bcr／abl融合基因表达情况。结果 异基因造血干细胞移植治疗组完全血液学缓解率为100％，分子生物学缓解率分别为87．5％。结论 bcr／abl融合基因监测可以作为CML评价疗效的指标，适用于微小残留病变的监测。     

白血病干细胞与白血病的靶向治疗

  白血病是一类造血系统紊乱性疾病，现在已经认为这种造血紊乱起源于极少量的白血病干细胞。文章对白血病干细胞的认识现状及白血病干细胞学说对开展靶向白血病治疗策略的启示进行了综述。     

自体Retronectin诱导的CIK细胞治疗晚期结肠癌的疗效观察

目的探讨Retronectin诱导的CIK治疗晚期结肠癌安全性及有效性。方法分离患者单个核细胞用Retrone-ctin、CD3单抗、IFN-γ和IL-2等细胞因子诱导产生CIK细胞。患者每周回输1次CIK细胞,连续4次。采用流式细胞术检测患者外周血淋巴细胞免疫表型,应用BDTM-HumanCBATh1/Th2型细胞因子试剂盒监测治疗前及回输后7天外周血细胞因子变化。结果每个患者平均回输细胞数为23.9×109/L(20.6×109～27.2×109),不良反应小。CIK细胞输注后,患者外周血中淋巴细胞数、CD3+、CD3+CD56+和CD3+CD8+细胞数均有明显升高(P<0.05)。12例患者中有1例获部分缓解(PR),4例稳定,其中PR和2例SD患者的CEA水平有明显下降(P<0.05)。治疗后临床获益患者的血清中IFN-γ(6.9vs53.2 pg/mL)和TNF-α(3.2vs24.6 pg/mL)明显升高(P<0.05)。结论自体Retronectin诱导的CIK细胞通过增加效应细胞数明显增强免疫功能而无不良反应,是一种安全有效的过继免疫治疗,对恶性肿瘤的传统治疗策略有一定的借鉴作用。