从一根毛发中分别提取nDNA和mtDNA的简易方法

目的:探讨从1根脱落毛发中既获取核内基因组DNA(nDNA)又获取核外线粒体DNA(mtDNA)的简便可靠方法。方法:用含高浓度的二硫苏糖醇(DTT)的细胞裂解液裂解细胞,建立DTT-裂解液法及DTT-TKM法用于毛根、毛干部分的核酸提取,并对2种方法进行了比较。结果:2种方法均能从毛根及毛干中提取nDNA及mtDNA。DTT-TKM法适用于多根毛发的核酸提取。而DTT-裂解液法则不仅能提高毛囊DNA的提取量,而且能从少量毛干中提取到几乎不含nDNA的mtDNA。结论:DTT-裂解液法简便、经济、无创,更适于从1根毛发中分别提取nDNA及mtDNA。特别适用于血液等样本采集困难时对于遗传信息的获取,在法医学上亦具有一定的应用价值。     

连续性静-静脉血液滤过单用与联用血液灌流治疗多器官功能障碍综合征的临床疗效比较

目的比较连续性静-静脉血液滤过(CVVH)单用与联用血液灌流(HP)治疗多器官功能障碍综合征(MODS)的临床疗效.方法 20例MODS患者随机分成两组,每组10例,CVVH+HP组治疗42次,CVVH组治疗45次,比较两组患者治疗前后的平均动脉压(MAP)、氧合指数(PaO2/FiO2)、血内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、C-反应蛋白(CRP)、乳酸水平及急性生理学与慢性健康状况评分系统II(APACHE II)评分,同时观察治疗的不良反应,评价治疗安全性.结果 两组治疗后PaO2/FiO2较治疗前均有明显上升(P均<0.05),LPS、TNF-α、IL-1、CRP、乳酸水平及APACHE II 评分均较治疗前明显降低.且CVVH+HP组疗效优于CVVH组(P均<0.05).CVVH+HP组与CVVH组的存活率分别为40%和30%,但差异无统计学意义(P>0.05),均未发生出血、休克、过敏等不良反应.结论 CVVH联用HP较单用CVVH能更有效地清除炎症介质,改善MODS患者的预后.     

Fibroscan在慢性肝病诊治中的应用进展

肝活检一直是诊断慢性肝病的金标准,但是其为有创性检查等限制其应用.因此寻求一种可靠的无创诊断方法受到越来越多的关注.2003年Fibroscan(FS)问世以来,由于其具有无创、无痛、快速、客观等优点成为学者们研究的热点.本文就FS对慢性肝病的诊治进行综述.     

气化过氧化氢用于生物安全实验室消毒最佳浓度及剂量探讨

目的 探讨生物安全实验室采用气化过氧化氢（H2O2）消毒时H2O2的最佳浓度及剂量。方法 选择生物安全实验室一处,体积约120 m^3,通过气化H2O2消毒灭菌器（VHP）将H2O2溶液气化,采用9种不同的H2O2注入速度及维持时间组合进行实验室消毒。消毒结束后,收集在实验室10个位置点放置的化学指示卡,观察化学指示卡颜色,收集各点放置的枯草杆菌黑色变种芽胞菌片,观察各点芽胞菌片平板的菌落生长情况。观察9种组合方法消毒后各实验点化学指示卡变化、生物指示菌片变化情况,选取消毒效果合格的下最少H2O2剂量。按照最少剂量的参数设置再重复进行6次消毒实验,以验证消毒效果。结果 H2O2使用剂量≥5 g/m^3时,消毒实验后所有化学指示卡均由蓝色变为米黄色,消毒合格。选定最佳的H2O2使用剂量为5 g/m^3,6次消毒验证实验后,消毒效果全部合格。结论 生物安全实验室采用气化H2O2消毒时最佳浓度为35%,最佳剂量为5g/m^3。     

骨癌痛小鼠脊髓水平CREB转录共激活因子1表达的变化

目的 探讨骨癌痛小鼠脊髓水平CREB转录共激活因子1（CRTC1）表达的变化.方法 采用随机数字表法,46只C3H/HeJ雄性小鼠随机分为假手术组（Sham组,n=23）和肿瘤组（Tumor组,n=23）,Tumor组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔接种溶于α-MEM的NCTC2472纤维肉瘤细胞,建立骨癌痛模型,Sham组小鼠接种不含肿瘤细胞的α-MEM.两组在术前1d、术后4d、7d、10 d、14 d、21 d检测痛行为学,并于相应时间点痛行为学检测后,分别随机选取3只小鼠处死,取脊髓L3-L5节段,采用Western Blot法检测CRTC1的蛋白表达水平.结果 与Sham组比较,Tumor组接种后各时间点机械缩足阈值[（1.35±0.14）g,（1.10±0.28）g,（0.78±0.25）g,（0.47±0.16）g,（0.34±0.16）g]明显降低（P＜0.05）,自发抬足次数[（3.12±0.74）次,（6.02±0.67）次,（7.42±1.22）次,（10.82±0.98）次,（12.48±1.06）次]明显增加（P＜0.05）.与基础值相比,Sham组和Tumor组脊髓水平CRTC1的表达在术后4d升高（P＜0.05）;与基础值和Sham组相比,Tumor组脊髓水平CRTC1的表达在术后7d、10d、14d、21 d均升高（P＜0.05）.结论 骨癌痛小鼠脊髓水平CRTC1的蛋白表达上调,该变化可能参与了骨癌痛的发生和维持.     

HPV感染对宫颈癌细胞中自噬的影响

自噬是一种高度调节的“自我消化”途径,参与生物的发育、生长等多种过程。细胞自噬的异常导致癌细胞的出现。宫颈癌的主要病因是高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染,但仅有病毒感染不足以致癌,迫切需要更深入地了解HPV生物学行为及其诱发宫颈癌的机制。自噬在HPV感染及诱发癌症过程中起着基础性的作用,同时HPV感染后也影响了宫颈细胞的自噬作用。HPV与自噬之间的联系促进了旨在抑制HPV感染的新型抗病毒策略的发展。多项研究证明自噬在促进HPV的生命周期和肿瘤进展中起到抑制作用,恢复HPV感染和癌变过程中宫颈细胞自噬反应对于抑制HPV诱发的宫颈疾病具有重要意义。这在构建预防HPV感染和治疗HPV感染的宫颈癌疫苗中也具有临床价值。综述关于致癌的HR-HPV如何影响自噬的最新发现,为今后寻求有效靶向自噬的方法治疗HPV感染导致的宫颈疾病提出新的思路。     

再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞亚群检测

<正> 本文报告应用抗淋巴细胞单克隆抗体检测再障患者外周血淋巴细胞亚群。 研究对象和方法 一、研究对象:慢性再障成人患者9例,按1981年全国再障座谈会诊断标准。男性5例,女性4例。平均年龄30岁(15～55岁)。 再障患儿 8例,按1986年杭州儿科血液病会议制定的标准诊断。     

癫痫患者的T淋巴细胞亚群改变

本文用间接荧光法测定54例癫痫患者外周血T淋巴细胞亚群分布,与正常对照组比较,发现癫痫患者总T细胞、T_4细胞均显著降低,T_8细胞显著增高,因此T_4/T_8比值显著降低。以上异常改变与服用抗痫药无关,与癫痫的病因分类、病程及脑电图的异常亦无相关性。     

连续性静-静脉血液滤过单用与联用血液灌流治疗多器官功能障碍综合征的临床疗效比较

目的比较连续性静-静脉血液滤过(CVVH)单用与联用血液灌流(HP)治疗多器官功能障碍综合征(MODS)的临床疗效.方法 20例MODS患者随机分成两组,每组10例,CVVH+HP组治疗42次,CVVH组治疗45次,比较两组患者治疗前后的平均动脉压(MAP)、氧合指数(PaO2/FiO2)、血内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、C-反应蛋白(CRP)、乳酸水平及急性生理学与慢性健康状况评分系统II(APACHE II)评分,同时观察治疗的不良反应,评价治疗安全性.结果 两组治疗后PaO2/FiO2较治疗前均有明显上升(P均<0.05),LPS、TNF-α、IL-1、CRP、乳酸水平及APACHE II 评分均较治疗前明显降低.且CVVH+HP组疗效优于CVVH组(P均<0.05).CVVH+HP组与CVVH组的存活率分别为40%和30%,但差异无统计学意义(P>0.05),均未发生出血、休克、过敏等不良反应.结论 CVVH联用HP较单用CVVH能更有效地清除炎症介质,改善MODS患者的预后.     

美托洛尔治疗慢性充血性心力衰竭的临床观察

近年来 ,随着对慢性充血性心力衰竭 (CHF)发生机制的深入研究 ,其治疗措施也在不断改进 ,本文旨在观察美托洛尔(倍他乐克 )对改善慢性 CHF患者心功能的疗效。1　对象和方法1.1　对象　选择 2 0 0 0年以来我科住院的 CHF患者 6 5例 ,年龄 4 5～ 78岁 ,均按 NYHA心功能分级标准分级和随机分组 :观察组 35例 ,男 18例 ,女 17例 ,平均年龄 6 2岁 ,其中心功能 级 5例 , 级 12例 , 级 18例 ;对照组 30例 ,男 16例 ,女 14例 ,其中心功能 级 3例 , 级 10例 , 级 17例。所有入选患者均无支气管哮喘病史 ,无严重的窦性心动过缓、低血压、 度以…