供体血管内皮细胞对小鼠-大鼠移植心脏存活时间的影响

目的 探讨供体血管内皮细胞对小鼠-大鼠移植心脏存活时间的影响.方法 分离小鼠血管内皮细胞并于移植前14 d注入大鼠阴茎背静脉2×106细胞/只或联合注射环磷酰胺20 mg/kg·d.异位小鼠-大鼠心脏移植后观察供心存活时间. 结果 成功分离小鼠血管内皮细胞,注射小鼠血管内皮细胞14 d后,移植心脏平均存活时间(10±1.414)min, 组化染色显示供心有IgM、C3沉积,血浆IgM、IgG、C3、C4较未注射血管内皮细胞组明显增高;联合使用环磷酰胺能延长供心成活时间(19.44±2.603 4)min(t=2.880,P ＜ 0.01).结论 外周静脉注射供体血管内皮细胞不能诱导延迟性异种移植排斥反应(DXR)的免疫耐受,却促使发生HAR.联合环磷酰胺可延长供心存活时间.     

HO-1对DXR免疫反应影响的实验研究

目的 探讨HO-1对延迟性异种心脏移植免疫反应的影响。方法 应用NIH小鼠-Wistar大鼠颈部异位心脏移植模型,用CoPP（cobalt protoporphyrin,CoPP）诱导HO-1并结合免疫抑制剂Cyclosporine A（CSA）及Cyclophosphamid（CYP）处理受体。比较移植心脏存活时间并分别用免疫组化、Westem- blot蛋白印迹杂交等检测移植心脏HO-1、IL-1β、INF-γ、TNF-α和STAT-3表达,免疫组化检测并计数分析CD68细胞,比较不同处理因素之间的差异。结果 单用CoPP诱导HO-1后移植心脏存活时间较CSA组及空白对照组长（t=2．6936,P〈0．05）,CSA＋CoPP组移植心脏存活时间和CYP＋CoPP组均长于单用CSA组和CYP组（t=2．8511,P〈0．05）,CoPP＋CSA＋CYP组移植心脏存活时间优于其余任何组（t=3．8644,P〈0．001）。CoPP组TNF-α、LI-1β低于在空白对照组的表达（t=2．6364,P〈0．05）,但INF-γ除外。三者在CoPP＋CSA＋CYP组表达均低于其余各组。CoPP及CSA、CYP组间STAT-3表达无差异（t=1．0854,P〉0．05）,但均高于空白对照组（t=10．1254,P〈0．001）。CoPP与CSA及CYP联合应用时STAT-3表达高于单用CoPP组（t=2．8164,P〈0．05）,三者联合使用时高于任何组（t=2．5605,P〈0．05）。CoPP组移植心肌组织中CD68阳性细胞数低于空白对照组（t=3．1837,P〈0．01）,CoPP＋CSA＋CYP组最低（t=2．5099,P〈0．05）。结论 HO-1并联合免疫抑制剂CSA、CYP可能通过上调STAT-3蛋白表达,减少CD68细胞对移植心脏的浸润,降低心脏移植后炎症细胞因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的产生,并可能由此推迟了DXR的发生。     

热休克处理诱导小鼠心脏HO-1表达并延长其移植至大鼠的存活时间

目的探索热休克诱导NIH小鼠心脏表达HO-1的方法及其对延迟性异种心脏移植排斥反应的影响.方法采用取暖器加热NIH小鼠,使其温度维持在42℃20 min,分别于加热后1、6、12、24、48、72 h切取心脏,应用RT-PCR、Western blot分别检测HO-1 mRNA、HO-1蛋白以及HO-1酶活性检测.借助NIH小鼠-Wistar大鼠颈部异位心脏移植模型,对热休克处理供体并结合CoPP(cobalt protoporphyrin,CoPP)、ZnPP(zinc protoporphyrin,ZnPP)了解热休克诱导HO-1对移植心脏存活时间的影响.结果热休克预处理6 h后心脏组织HO-1 mRNA、蛋白表达及酶活性开始增多,以24～48 h为高峰,24 h组和48 h组与其余任意组比较均有显著性差异(t=3.507,P＜0.05),72 h后开始下降.热休克组心脏存活时间明显长于空白对照组(t=5.703,P＜0.01)和ZnPP 热休克组(t=4.913,P＜0.001).而热休克 CoPP组移植心脏存活时间[(6.250±1.512)d]明显长于热休克组[(4.750±1.363)d](t=2.084,P＜0.01).当热休克与ZnPP和CoPP同时使用时,移植心脏存活时间略短于热休克组,但其差异无显著性(t=0.816,P＞0.05).结论取暖器加热NIH小鼠可诱导心脏HO-1的产生,能延长NIH小鼠-Wister大鼠心脏移植存活时间,推迟DXR的发生.     

Stat3诱骗寡核苷酸激活巨噬细胞抗乳腺癌免疫反应

目的:探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的信号转导和激活子3(Stat3)信号途径在抗乳腺癌免疫应答中的作用.方法:用大鼠乳腺癌细胞的培养上清液诱导培养大鼠的腹腔巨噬细胞,再用Stat3诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)抑制其Stat3的活性并用细菌的脂多糖将其激活,检测其对肿瘤细胞的杀伤活性和抗原呈递能力;将乳腺癌细胞移植到SD大鼠,然后接受诱导的巨噬细胞或转染ODNs的诱导巨噬细胞的处理,检测肿瘤的生长和大鼠的免疫反应强度.结果:伴随Stat3的过度激活,诱导的巨噬细胞对肿瘤细胞的细胞毒性和抗原呈递能力减弱.Stat3 decoy ODNs增强诱导的巨噬细胞的杀伤活性,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);增强诱导的巨噬细胞的抗原呈递能力,巨噬细胞呈递抗原剌激的淋巴细胞的增殖能力、IFN-γ产量及细胞毒性与对照组比较,差异有统计学意义(P值均＜0.01).Stat3活性被抑制的巨噬细胞能增强大鼠对移植乳腺癌的免疫反应而抑制肿瘤的生长,在第24、28、32天,Stat3 decoy ODNs处理组的肿瘤体积与其他各组比较,差异有统计学意义(P值均＜0.01).结论:TAMs的免疫抑制作用可能与其Stat3信号过度激活有关,抑制其Stat3信号能增强机体对乳腺癌的免疫应答反应.     

盐酸羟考酮缓释片体外一致性评价研究

目的 建立盐酸羟考酮缓释片释放曲线测定方法和有关物质检测方法,评价自制制剂和原研制剂释放曲线的相似性和有关物质杂质谱的一致性。方法 用4种释放介质[水、盐酸（pH 1.2）、乙酸盐缓冲液（pH 4.0）和磷酸盐缓冲液（pH 6.8）]分别考察自制盐酸羟考酮缓释片和原研制剂的释放情况,并通过计算相似因子（f₂）评价溶出曲线的相似性;优化有关物质检查色谱条件,使14-羟可待因酮、氢可酮达到基线分离,对比研究自制盐酸羟考酮缓释片与原研制剂的有关物质,进行杂质谱研究。结果 自制制剂与原研制剂在4种释放介质中释放曲线的f₂均>50,表明2种制剂体外释放行为相似,且两者的有关物质杂质谱基本一致,表明2种制剂质量基本一致。结论 建立的释放曲线、有关物质测定方法准确、可靠,可为盐酸羟考酮缓释片的仿制药一致性评价提供参考。     

血管生成在乳腺非典型增生及癌变过程中的作用

为探讨乳腺非典型增生至癌变过程中血管生成的作用及其规律以及血管生成与非典型增生程度及癌变的关系，本研究应用免疫组化法，以ＦⅧ为标志物对８６例良、恶性乳腺病变组织中的血管内皮细胞进行组化染色。分别以微机图像分析系统和人工计数对微血管内皮细胞面积（ＭＥＡ）和微血管密度（ＭＶＤ）进行定量分析。结果发现，中重度非典型增生及癌变组织中的血管生成量ＭＥＡ和ＭＶＤ均明显高于正常乳腺、单纯上皮增生和轻度非典型增生（Ｐ＜０．０５）。结论：乳腺非典型增生过程中已有血管生成并随非典型增生程度的增加而增多；乳腺增生组织中的血管生成可反映乳腺癌前病变的恶性倾向     

原发性十二指肠恶性肿瘤41例分析

目的：总结原发性十二指肠恶性肿瘤的常见临床类型，病理特征及诊断方法。方法：对我院1981年1月－2002年6月收治并经病理证实的41例原发性十二指肠恶性肿瘤进行回顾性分析。结果：病理类型：腺癌35例，平滑肌肉瘤4例，类癌1例，淋巴瘤1例，部位，十二指肠第2段65．85％（27／41），其中乳头区22例，球部24．39％（10／41）；水平段3例，升段1例，常见临床症状依次为上腹痛53．68％，贫血48．78％，黄疸46．34％，上消化道出血29．27％，消瘦34．39％，诊断手段：内镜，低张钡餐、B超、CT及MRCP等检查可提高十二指肠肿瘤的检出。结论：原发性十二指肠恶性肿瘤以腺癌为主，好发于第2段，但第1段并不少见；早期临床表现没有特异性，联合应用内镜及影像学检查可提高检出率。     

金水六君煎加减治疗夜咳50例

目的：观察金水六君煎加减治疗夜咳的临床疗效。方法：对50例夜咳患者采用金水六君煎加减治疗,治疗1周为1疗程,2疗程后观察疗效。结果：治愈41例,好转8例,无效1例,总有效率为98．0％。结论：金水六君煎加减治疗夜咳疗效较好。     

原发性小肠肿瘤58例临床分析

目的分析原发性小肠肿瘤的临床病理特征及诊断方法。方法回顾性分析经病理证实的j8例原发性小肠肿瘤的临床资料。结果恶性45例,以腺癌、平滑肌肉瘤、恶性淋巴瘤为主。良性13例,以平滑肌瘤、血管瘤、腺瘤为主。主要临床表现为腹痛、出血、贫血、腹块、黄疸、消瘦、肠梗阻等。术前确诊率为15．52％（9/58）,易误诊为其他消化系统疾病及盆腔疾病。结论原发性小肠肿瘤以恶性多见。临床表现缺乏特异性,检查手段相对不足．诊断较困难,临床医生应提高对小肠肿瘤的认识。DSA．胃肠X线、内镜及B超、CT等检查有一定诊断价值。