牛磺酸对大鼠缺血心肌缺血再损伤的保护作用

目的探讨大鼠心肌缺血损伤与凋亡蛋白 Bcl-2和 Bax的关系及牛磺酸的影响. 方法选择健康 SD大鼠 30只,随机分为假结扎组、结扎组和牛磺酸保护组,每组 10只.结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型.检测 3组心肌线粒体中超氧化物歧化酶( superoxide dismutase,SOD)、 Ca2+-ATP酶活性和丙二醛含量,用免疫组化法检测心肌中的 Bcl-2和 Bax蛋白. 结果结扎冠状动脉左前降支可致心肌线粒体丙二醛含量升高 [假结扎组 (4.89± 0.54) μ mol/g;结扎组( 9.85± 0.68) μ mol/g], SOD和 Ca2+-ATP酶活性下降 [假结扎组( 8.63± 0.35) μ mol/( g· s) ,(13.97± 1.97) mmol/( g· s) ;结扎组( 6.73± 0.39) μ mol/( g· s), (8.54± 2.28) mmol/( g· s) ].缺血心肌 Bax蛋白表达呈显著升高 (t=3.931, P< 0.01),牛磺酸能明显减少缺血心肌线粒体丙二醛的生成 [牛磺酸保护组 (5.46± 0.72) μ mol/g],降低心肌 Bax蛋白的表达,增加 Bcl-2蛋白的表达 ( t=3.716, P< 0.01). 结论结扎大鼠冠状动脉左前降支所致心肌缺血损伤与 Bcl-2和 Bax蛋白的表达有关 ,牛磺酸对缺血心肌 Bcl-2和 Bax蛋白的表达有较好的调控作用.     

急性心肌梗塞患者血浆单胺类物质及递质氨基酸的变化

对２０例急性心肌梗塞患者（ＡＭＩ组）采用荧光法测定其血浆中单胺类物质５－羟色胺（５－ＨＴ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）及多巴胺（ＤＡ）含量；用聚酰胺薄膜荧光扫描法测定其血浆中递质氨基酸γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）、甘氨酸（Ｇｌｙ）、谷氨酸（Ｇｌｕ）、天冬氨酸（Ａｓｐ）及牛磺酸（Ｔａｕ）含量，并与２０例正常人（对照组）进行对比，结果显示：ＡＭＩ组血浆中５－ＨＴ、ＮＥ、ＤＡ以及ＧＡＢＡ、Ｇｌｙ值均显著高于对照组，而Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔａｕ值均低于对照组。提示血浆中单胺类物质及递质氨基酸与ＡＭＩ的发病有一定的关系。     

抑癌基因P16在喉癌中的表达

目的　研究抑癌基因P16与喉癌的关系。方法　用免疫组化和原位杂交方法检测 18例喉癌组织中抑癌基因P16蛋白及mRNA的表达。结果　P16蛋白在喉癌、交界性肿瘤及正常喉粘膜中的检出率分别为 2 2 .2 2 %、44.44%及 6 6 .6 7% ,原位杂交表明P16mRNA在上述组织中的阳性率分别为 2 7.78%、5 5 .5 6 %及 83 .33 % ,各组分别与喉癌相比 ,均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。并显示P16表达阳性率随喉癌病理分级的上升而降低。结论　P16在喉癌中的表达明显低于正常喉粘膜组织 ,它与喉癌的发生发展密切相关 ,可作为喉癌生物学行为的评估指标。     

花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用体外培养,细胞毒（MTT法）实验、荧光显微镜观察细胞形态变化、DNA琼脂糖凝胶电泳测定DNA ladder及流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化.结果 花边莲提取液能够抑制SPC-A-1细胞增殖,且呈剂量依赖性;观察到凋亡细胞典型的形态和生化特征,花边莲提取液作用48 h,SPC-A-1细胞均呈现凋亡细胞所特有的亚二倍体峰（sub-G1）,凋亡率随药物浓度增加而增高,并使细胞生长停滞在S期,从而阻滞细胞周期的进行.结论 花边莲提取液对SPC-A-1细胞具有增殖抑制作用,并可诱导SPC-A-1细胞凋亡,其机制可能与细胞周期的S期阻滞有关.     

猪肾CD26的分离、纯化及动力学研究

目的：纯化CD26,并对其部分性质进行研究。方法：采用ADA-Sepharose 4B亲和层析法分离纯化CD26,采用Egawa法测定酶活性。结果：纯化达电泳纯,得率为31.3%,纯化倍数达341,用SDS-PAGE测得其分子量为109.2 KD。另外,采用非线性回归分析法求得了CD26对底物Gly-Pro-p-nitroanilide的Km=（101.5±2.2） μmol/L和Vmax=（19.5±0.3） U/mg protein。结论：用ADA-Sepharose 4B亲和层析法可纯化CD26达电泳纯。     

川芎嗪对严重烧伤大鼠心肌细胞GRP94表达的影响

目的 观察严重烧伤大鼠心肌细胞内质网应激蛋白表达的改变及川芎嗪对其的影响,探讨川芎嗪对严重烧伤后心肌损伤保护作用机制.方法 建立大鼠30%Ⅲ度烫伤模型,酶联免疫法检测血浆中心肌肌钙蛋白T(cTnT)含量,放射免疫法检测血浆中TNF-α的含量,RT-PCR和免疫组化分析GRP94的表达.结果 烧伤组大鼠伤后3 h血浆中cTnT含量即呈显著升高(P<0.01),心肌中GRP94 mRNA和蛋白表达于烧伤后3 h显著性升高,12 h达峰值,24 h还显著升高; Caspase-3活性在伤后3 h升高,12 h达高峰,48 h后仍显著高于对照组.川芎嗪治疗组GRP94的表达和Caspase-3活性较烧伤组均有显著性降低(P<0.05).结论 严重烧伤可引起心肌细胞内GRP94表达呈持续性升高,川芎嗪对烧伤后早期GRP94表达升高有较好的拮抗作用.     

白英提取液对人肺癌A549细胞凋亡及Fas／FasL基因表达的影响

目的探讨白英提取液（STE）对人肺癌A549细胞凋亡及fas／fasL基因表达的影响。方法体外培养肺癌A549细胞，以0（正常对照组），10，20和40mg／ml STE处理A549细胞48h，并以25mg／L顺铂（DDP）作为阳性对照、采用MTT法检测细胞增殖抑制率，TUNEL法检测凋亡率，半定量RT—PCR检测fas和fasLmRNA表达。结果与正常对照组比较，STE各浓度组细胞增殖抑制率显著上升（P〈0．01），细胞凋亡率明显升高（P〈0．01），基因fasmRNA表达显著上升（P〈0．05或P〈0．01），而fasLmRNA表达明显下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论STE通过上调fas基因和下调fasL基因表达，诱导细胞凋亡，从而抑制A549细胞增殖。     

白英水提物对胃癌SGC-7901细胞凋亡与基因bcl-xl／bid表达的影响

目的:观察白英水提物对胃癌SGC-7901细胞凋亡及基因bcl-xl、bid表达的影响。方法:常规法制备白英水提物,实验分正常对照组、白英处理组。白英处理组加入白英水提物终浓度分别为12.5mg/mL、25mg/mL和50mg/mL。流式细胞仪检测细胞凋亡,半定量RT-PCR和免疫化学分析细胞中bcl-xl、bid基因表达。结果:与正常对照组比较,白英处理组SGC-7901细胞增殖有显著性下降,细胞凋亡显著性增多(P<0.05);基因bcl-xl mRNA和Bcl-xl蛋白表达降低、bidmR-NA和Bid蛋白表达升高(P<0.05),并随白英浓度增加而加强。结论:白英水提物能诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡和抑制增殖,且有一定的量效关系,其作用机制可能与调控bcl-xl、bid基因表达有关。     

川芎嗪对缺血再灌注后心肌细胞凋亡的影响

目的观察缺血再灌注后大鼠心肌细胞凋亡的特点及川芎嗪对其的影响。方法结扎冠状动脉左前降支45 min,再灌注180 min复制大鼠心肌缺血再灌注(IR)模型,川芎嗪保护组(IR+TMP)在结扎冠脉前30 min腹腔注射川芎嗪(20 mg/kg)。以TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫组化法分析Fas、FasL、Capase-8及Capase-3蛋白表达,荧光分析法测定Capase-3活性。结果缺血再灌注组(IR)心肌细胞凋亡指数23.47±3.88较对照组0.41±0.03有显著性升高(P<0.01),Fas、FasL、Capase-8、Capase-3蛋白及Capase-3活性均显著高于对照组(P均<0.05)。川芎嗪保护组(IR+TMP)心肌细胞凋亡指数1.81±0.25较IR组23.47±3.882有显著性降低(P<0.05),Fas、FasL、Capase-8、Capase-3蛋白及Capase-3活性均显著性低于IR组(P均<0.01)。结论缺血再灌注后心肌细胞凋亡数有明显的增多;川芎嗪对缺血再灌注后心肌细胞凋亡有较好的拮抗作用,其机制可能与降低Fas死亡受体通路的信号转导有关。     

花边莲提取液诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及其分子机制的研究

目的:探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及其可能分子机制。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,TUNEL法检测凋亡率,二步法免疫组化检测野生型P53、Survivin、NF-κB P65和Bc l-2蛋白表达变化。结果:花边莲提取液能够抑制SPC-A-1细胞增殖,且呈一定剂量—时间依赖性;随着药物浓度上升细胞凋亡率明显增高(P<0.01);P53蛋白表达显著上升(P<0.01),Survivin、NF-κB和Bc l-2蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论:花边莲取液能诱导SPC-A-1细胞凋亡,其分子机制可能与上调野生型P53蛋白表达和下调Survivin、NF-κB P65和Bc l-2蛋白表达有关。