利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱联合磁珠技术寻找乳腺癌血清蛋白标志物

目的探索乳腺癌与乳腺良性疾病和健康人血清蛋白质谱表达差异,寻找具有鉴别诊断意义的血清蛋白标志物。方法实验分为两大组：（1）决策树模型组共293例标本,包括3个亚组,分别为乳腺癌组110例标本、乳腺良性疾病组113例和健康组70例,建立决策树（乳腺癌诊断）模型;（2）盲法验证组共34例标本,包括3个亚组分别为乳腺癌组7例标本、乳腺良性疾病组13例及健康组14例,进行盲筛验证决策树模型。采用弱阳离子磁珠捕获乳腺癌患者血清中的蛋白,使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）仪检测绘制蛋白峰。应用Biomarker Wizard TM3．1软件和Biomarker Patterns TM5．0软件分析数据。统计分析采用方差分析法和秩和检验法。计算决策树模型诊断的准确率以及盲法验证模型诊断乳腺癌的敏感性和特异性。结果在决策树模型组中检测到了47个差异有统计学意义的蛋白峰（P〈0．050）。应用BPS5．0软件,以相对损失最小的原则从这47个蛋白峰中选取了4个蛋白峰,分别为相对分子质量（Mr,本文中相当于质荷比m／z）9292．5、Mr11707．2、Mr15504．5和Mr16107．9,用其建立决策树模型（乳腺癌诊断模型）。该模型判断乳腺癌、乳腺良性疾病及健康人的准确率分别为99．09％、95．58％、92．86％。盲法验证该模型诊断乳腺癌的敏感性为71．43％,特异性为88．89％。结论应用MALDI—TOF—MS联合磁珠技术可以检测乳腺癌血清中差异蛋白峰并可以建立决策树（乳腺癌诊断）模型。选择的4个差异蛋白蜂建立的决策树模型诊断乳腺癌具有好的准确性和较好的敏感性及特异性。决策树模型能将乳腺癌与乳腺良性疾病及健康人相鉴别。寻找到的Mr9292．54、Mr11707．2、Mr15504．5以及Mr16107．9的蛋白峰有望成为鉴别乳腺癌与乳腺良性疾病和健康人的有效的肿瘤血清蛋白标记物。     

元胡止痛分散片的制备工艺研究

目的:制备元胡止痛分散片(延胡索,白芷)。方法:采用单因素试验及U9(94)均匀设计试验以多个指标考察分散片的处方和制备工艺。结果:采用优化条件选择分散片片重为400 mg/片,淀粉34%、微晶纤维素40%、乳糖10%作为填充剂,8%的交联羧甲基纤维素钠(cCMC-Na)为崩解剂,15%PVPK30的乙醇溶液为黏合剂。结论:所制分散片处方合理、工艺可行,溶出快。     

TLR9在HaCaT细胞UVB光老化模型中对下游信号分子的调控作用

目的：探讨Toll样受体9（Toll-like receptor 9,TLR9）在中波紫外线（ultraviolet B,UVB）诱导的人永生化角质形成细胞（human immortal keratinocyte,HaCaT）光老化模型中对下游信号分子的调控作用。方法：实验分为3组：正常对照组、模型组、A151组。正常对照组予以假照射处理,模型组予以辐照剂量30 mJ/cm2 UVB照射处理,A151组予以辐照剂量30 mJ/cm2 UVB照射并加用TLR9抑制剂进行干预处理。使用衰老相关β半乳糖苷酶法观察细胞衰老。CCK-8法检测细胞增殖。Western blot检测TLR9、磷酸化核转录因子（phospho nucler factor-κB,pNF-κB）蛋白表达。RT-PCR法检测细胞肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）mRNA转录水平。结果：Western blot结果显示模型组较正常对照组TLR9、pNF-κB蛋白表达量升高（P=0.000,P=0.000）,A151组较模型组TLR9、pNF-κB蛋白表达量降低（P=0.010,P=0.000）。RT-PCR结果显示模型组较正常对照组TNF-α、IL-6mRNA转录水平上调（P=0.000,P=0.000）,A151组较模型组TNF-α mRNA、IL-6 mRNA转录水平下调（P=0.000,P=0.030）。衰老相关β半乳糖苷酶染色结果显示模型组较正常对照组染色阳性细胞数增多（P=0.000）,A151组较模型组染色阳性细胞数减少（P=0.000）。CCK-8结果显示模型组较正常对照组细胞增殖率降低（P=0.010）,A151组较模型组细胞增殖率升高（P=0.045）。结论：UVB通过上调HaCaT中的TLR9表达,引起核转录因子磷酸化,促进细胞因子TNF-ɑ、IL-6转录水平升高,介导细胞炎性反应,从而降低细胞增殖率,诱导细胞衰老。     

大黄游离蒽醌对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用

目的探讨大黄游离蒽醌(free anthraquinone from rhubarb,FAR)对糖尿病大鼠心肌CTGF和collagen表达及间质纤维化的影响。方法健康♂SD大鼠一次性腹腔注射STZ制备糖尿病大鼠模型,2周后随机分为模型对照组(DCM组)和大黄游离蒽醌干预组(FAR组),同时设立正常对照组(CON组);干预8周后检测大鼠空腹血糖;心脏质量指数;Masson染色观察心肌纤维化程度;RT-PCR法检测CTGF、procollagenⅠ和collagenⅢmRNA表达;免疫组化法检测CTGF蛋白含量;ELISA法检测collagenⅠ和collagenⅢ胶原含量。结果与CON组相比,DCM组大鼠空腹血糖、心脏质量指数、心肌纤维化程度以及CTGF、collagen I和collagenⅢ表达均明显升高;与DCM相比,FAR组心脏质量指数、心肌纤维化程度以及CTGF、collagenⅠ和collagenⅢ表达均明显下降。结论大黄游离蒽醌可通过调低糖尿病大鼠心肌组织CTGF的表达,减少心肌间质中collagen I和Ⅲ合成及沉积,从而改善糖尿病心肌病大鼠早期的心肌纤维化     

硅油填充眼复发性视网膜脱离的特点及危险因素分析

目的探讨硅油填充眼复发性视网膜脱离的临床特点及危险因素.方法回顾性分析行玻璃体手术并硅油注入后的复发性视网膜脱离患者52例52眼的临床资料,采用Logistic多因素回归分析法筛选危险因素.结果(1)视网膜脱离复发时间为术后10天至12月,平均4.60个月±2.86个月.(2)视网膜脱离特点31眼(59.6%)以下方脱离为主,8眼(15.4%)全脱离,5眼(9.6%)颞侧脱离,5眼(9.6%)脱离局限于周边,上方脱离2眼(3.8%),后极部脱离1眼(1.9%).(3)裂孔部位及形态33眼(63.5%)有明确裂孔,原裂孔未闭或封闭不良9眼(27.3%).周边裂孔25眼(75.8%),后极部裂孔4眼(12.1%),黄斑裂孔2眼(6.1%),巨大裂孔 2眼(6.1%).(4)增生性玻璃体视网膜病变(PVR)29眼(55.8%)有明显PVR,4眼合并前部PVR,视网膜明显增厚僵硬者2眼.(5)其他黄斑下新生血管膜1眼,黄斑囊样水肿1眼,视网膜下重水1眼,硅油进入视网膜下4眼.(6)PVR分级(P=0.023)及既往手术次数(P=0.030)与硅油眼复发性视网膜脱离相关,随PVR分级程度及手术次数的增多,相对危险度逐渐增大.结论硅油填充眼视网膜再脱离多数为孔源性,再脱离与术中没有充分松解对视网膜的牵引、未完全封闭裂孔或遗漏裂孔和再增殖有关,多以下方为主;术前危险因素有PVR分级程度及既往手术次数.     

莫沙必利治疗功能性消化不良的临床研究

目的 探讨莫沙必利对功能性消化不良患者的疗效.方法 符合功能性胃肠病罗马Ⅱ诊断标准的FD患者84例,随机接受莫沙必利5 mg,每天3次(A组,42例)或吗丁啉5 mg,每天3次(B组,42例),记录治疗前及治疗后患者症状积分和钡条胃排空数.结果 A组患者有效率为85.71%,B组为66.67%,两组间差异有统计学意义(P＜0.01).胃排空钡条数在治疗前均明显少于正常对照组(P＜0.01),治疗后2组明显增多(P＜0.05),两组差异显著(P＜0.05).结论 莫沙必利治疗功能性消化不良的效果优于吗丁啉.     

核糖核酸对家兔日本血吸虫性肝纤维化病理及超微结构变化的影响

应用家兔日本血吸虫病模型，在不同阶段进行肝内核糖核酸含量的测定和光镜、电镜观察肝组织相应的变化。结果显示感染血吸虫后，肝内核糖核酸含量减少。光镜下肝细胞变性坏死程度与胶原纤维分布明显增多。经核糖核酸治疗后，肝内核糖核酸含量增加的同期，肝组织病变明显减轻。电镜观察在核糖核酸减少时，贮脂细胞、枯否氏细胞增多。胶原纤维分布广泛，经核糖核酸治疗后，上述细胞及胶原纤维相应减少。提示核糖核酸对血吸虫性肝纤维化的形成有直接影响，核糖核酸可以减轻病变程度，阻抑肝纤维化的进展。     

伴发内分泌功能紊乱肾上腺髓样脂肪瘤的诊断及其治疗

目的:进一步提高伴发内分泌功能紊乱的肾上腺髓样脂肪瘤(AML)的诊断与治疗水平。方法:收集2005年~2013年我院收治并确诊的伴有内分泌功能紊乱的3例AML患者,包括高醛固酮血症、高皮质醇血症以及高雄激素血症患者各1例,对该3例患者的临床资料进行对比分析。结果:3例患者表现出同内分泌功能紊乱相对应的典型临床症状、体征改变,影像学特点均表现为卵圆形高低密度混合肿块,病理表现为肿块由造血细胞以及脂肪细胞组成,伴随肾上腺皮质功能带的增生或瘤变。治疗上,1例采用单侧肿瘤切除加患侧肾上腺部分切除术,2例采用患侧肾上腺全部切除术。术后随访期间,患者原有症状消失,内分泌功能恢复正常,所有患者未见复发。结论:伴发内分泌功能紊乱的AML是AML的一种特殊类型,内分泌功能紊乱类型往往对应肾上腺皮质功能带的相应改变,诊断AML是否伴发内分泌功能需要结合患者临床症状、生化检查、内分泌功能、影像学检查以及病理结果。一旦发现伴发内分泌功能紊乱,即应手术治疗。     

BMPs在皮肤伤口愈合和瘢痕形成中的作用研究进展

<正>骨形成蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)属于转移生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族(BMP-1除外),目前已知的有20多种亚型,是分泌型糖蛋白,可通过自分泌或旁分泌的方式发挥作用,控制多项细胞进程,如:细胞周期和分化、成熟、发育、运动、粘附、神经元生长、骨形态发生和伤口愈合[1]。在20世纪70年代末,BMPs被发现是一种有效的骨形成诱导物[2],近10年来,组织工程学的发展,作为是骨再生的可能关键因素之一,BMPs受到极度重视,随后,     

醛固酮对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成及组织金属蛋白酶抑制因子-1 mRNA表达的作用

肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)可能在肝纤维化形成中发挥重要作用，利用醛固酮受体拮抗剂、血管紧张素Ⅱ1型(AT1)受体拮抗剂和血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)等药物阻断RAAS可以显著抑制实验性大鼠肝纤维化的形成。现在体外现察了醛固酮对肝星状细胞株HSC-T6 Ⅰ，Ⅲ型胺原合成和组织基质金属蛋白酶抑制因于-1(TIMP-1)mRNA表达的作用。