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本研究旨在探讨Notch1信号通路的配体delta-like ligand4(DLL4)基因过表达对K562细胞增殖的影响及其可能的作用机制.采用脂质体介导将含配体DLL4基因的质粒pBudCE4.1-DLL4转染K562细胞,通过RT-PCR和Western blot检测转染48 h后DLL4基因的mRNA及蛋白表达,同样检测转染后Notch1受体胞内区(NICD)、下游靶基因Hesl的mRNA及蛋白表达;通过Western blot检测与Notch信号通路相关的细胞转录因子YY1、原癌基因C-MYC及抑癌基因Rb蛋白的表达水平;用CCK-8法检测转染后细胞的增殖情况;用流式细胞术检测转染质粒48 h后各组细胞的凋亡情况.结果表明,DLL4基因转染后的K562细胞中DLL4、NICD及下游靶基因Hesl的mRNA及蛋白表达量比对照组明显增多(P<0.05),说明DLL4的过表达激活了Notch1信号通路;Western blot方法检测显示,DLL4的转染增加了细胞转录因子YY1、原癌基因C-MYC及抑癌基因Rb蛋白的表达,从而抑制了K562细胞的生长,诱导细胞周期停滞于G1期及细胞凋亡的增加.结论:外源性DLL4基因过表达可有效活化K562细胞内Notch1信号通路,可能通过YY1、C-MYC及Rb等Notch信号通路相关基因的高表达诱导K562细胞的生长减慢及细胞凋亡. 相似文献
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卫生理化实验室是各级疾病预防控制中心的重要部门,承担着为各级卫生行政部门提供疾病预防控制和卫生监督管理技术保证的重要职能.理化实验室在运行过程中会产生大量的化学污染物(废气、废液、废渣),大多数都是有毒、有害物质,有些还是剧毒物质或致癌物质,如不有效处理将直接污染周围环境,损害工作人员身体健康.随着人们环境意识的增强和绿色化学的兴起,实现理化实验室绿色化,将环境污染减小到最低限度,已经成为各级疾病预防控制中心理化实验室的发展方向. 相似文献
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目的 构建稳定表达人肝细胞表面分子去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)的细胞系.方法 逆转录PCR扩增人肝组织ASGPR大亚基H1全编码序列,插入到真核表达载体pIRES2EGFP中,重组质粒pIRES2EGFP/ASGPRH1转染HeLa细胞,G418筛选,RT-PCR,Western印迹及免疫荧光检测ASGPRH1的表达.结果 成功构建了pIRES2EGFP/ASGPRH1重组质粒,该质粒转染HeLa细胞后,Western印迹及免疫荧光均检测到ASGPRH1蛋白的表达.结论 成功建立了稳定表达人ASGPRH1的细胞系,为进一步研究ASGPR分子奠定了基础. 相似文献
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目的探讨性激素及其受体与食管鳞癌(ESCC)及患者性别、年龄的关系。方法选择44例ESCC高发区原发性ESCC患者、60例高发区健康者、60例低发区健康者,采用RIA法检测3组受检者血清雌二醇(E2)、睾酮(T)水平。采用免疫组化法检测≤40岁和>40岁的ESCC手术切除标本中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达;对其中9例标本取4.0~5.0mg癌新鲜组织进行ER蛋白Western印迹分析。结果无论男女,低发区健康组血清T、E2水平与高发区健康者、高发区ESCC组比较,差别均有统计学意义(P<0.05)。男、女ESCC患者中,不同TNM分期、分化程度及淋巴结有无转移者血清T、E2水平间差别无统计学意义(P>0.05)。≤40岁组与>40岁组的PR阳性率间差别有统计学意义(P<0.05)。≤40岁患者ER主要定位于细胞质,>40岁患者主要定位于细胞核。Western印迹分析显示,ESCC组织ER表达位于66kD和67kD条带,但以67kD条带表达更为显著。结论性激素及其受体的变化可能是食管癌变的重要机制,并与患者年龄有关。 相似文献
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目的:探讨多瑞吉(芬太尼透皮贴剂)作为第三阶梯止痛药物对骨转移癌患者疼痛的镇痛作用。方法:28例患者经治疗前评价疼痛分级后,先给以吗啡控释片(美施康定)剂量滴定并维持治疗2周后,按剂量换算成多瑞吉制剂,治疗4周并评价止痛效果。结果:多瑞吉止痛效果与吗啡控释片相同,部分副作用小于吗啡控释片。结论:多瑞吉作为第三阶梯止痛药物更适合用于骨转移癌患者疼痛的镇痛治疗。 相似文献