参蛤散对斑马鱼血管生长的干预作用

目的:分析参蛤散对斑马鱼血管生长的干预作用。方法:制备参蛤散水煎液,以转基因斑马鱼(Fli1:EGFP)为研究对象,建立斑马鱼正常的血管生长模型,采用不同浓度参蛤散水煎液干预后,观察斑马鱼肠下静脉血管直径、平均交叉数和平均出芽数。使用血管内皮生长因子酪氨酸酶抑制剂(VRI)建立斑马鱼血管损伤模型,观察不同浓度参蛤散水煎液干预后斑马鱼脊背节间血管完整型和缺损型血管数量。结果:参蛤散各浓度组肠下静脉平均出芽数、平均交叉数及血管直径与正常组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。参蛤散各浓度组及VRI组完整型血管较正常组减少,缺陷型血管较正常组增多(P<0.01);与VRI组比较,参蛤散各浓度组完整型血管明显增多,缺陷型血管减少(P<0.01)。当参蛤散浓度为3μg/mL时,斑马鱼完整型血管数最多,缺陷型血管数最少(P<0.01)。结论:参蛤散作用于斑马鱼正常血管生长并无明显作用,但可抑制VRI的血管损伤作用。     

肾上腺脑白质营养不良两种表型的临床及影像学分析

目的:探讨肾上腺脑白质营养不良(ALD)的临床特征及诊断方法。方法:回顾性分析3例ALD患者的临床表现、影像特征、治疗和随访结果。结果:病例1为青少年男性,儿童期起病,表现为癫痫、视觉听觉、认知功能及运动功能障碍,伴肾上腺皮质功能低下表现,颅脑MRI显示双侧顶叶、枕叶皮质下白质长T1长T2、T2Flair高信号影,血清极长链饱和脂肪酸水平(VLCFA)增高,诊断为儿童大脑型ALD,给予抗癫痫治疗,糖皮质激素替代治疗,随访3个月,癫痫控制良好,认知功能无改善。病例2和病例3为成年男性,表现为痉挛性截瘫、感觉性共济失调。头颅MRI均显示双侧延髓、桥脑腹侧、大脑脚多发长T1长T2、T2Flair高信号影,提示脑干锥体束受累,病例2脊髓MRI显示全脊髓纤细萎缩,病例3脊髓MRI显示脊髓后索、侧索受累。病例2有排尿障碍、阳痿,舅舅有类似病史,神经传导示双侧胫神经、腓总神经运动电位及感觉电位均未引出,ABCD1基因诊断为c.358dupC(p.R120Pfs*75)新型半合子突变,诊断为肾上腺脊髓神经病型ALD(AMN),随访2年,症状逐渐加重。病例3伴肾上腺皮质功能低下表现,血清VLCFA水平增高,神经传导示双侧胫神经、腓总神经感觉纤维损害,ABCD1基因诊断为c.1553G>A(Arg518Gln),诊断AMN,随访7年余,症状逐渐加重。患者母亲及姐姐ABCD1基因检测均检测到该致病突变。结论:儿童大脑型ALD以肾上腺和脑白质受累为主要表现,AMN以脊髓和周围神经受累为主要表现,脑白质和肾上腺可不受累。血清VLCFA水平增高和基因诊断是确诊ALD的重要依据,目前主要是对症支持治疗。     

脊髓前动脉综合征1例报道并文献复习

目的:探讨脊髓前动脉综合征(ASAS)的临床特点、MRI特点、病因和预后,提高医师对脊髓梗死的认识。方法:回顾1例ASAS患者的临床特点、MRI特点及治疗和预后,并结合文献进行回顾性分析。结果:患者临床表现为急性起病,后背疼痛,双下肢瘫,痛温觉障碍,深感觉和触觉正常,尿潴留及排便障碍,MRI检查弥散序列显示T_(7-8)、T_(11-12)水平脊髓横断前部区域呈高信号影,稍长T2信号,综合治疗后预后良好。搜索既往报道的ASAS患者207例,临床表现特征是急性或亚急性起病,病变水平神经根痛,病变节段以下瘫痪和分离性感觉障碍及植物神经功能障碍,以胸段脊髓梗死多见,发病早期MRI弥散序列检查可显示脊髓梗死范围。207例患者中,病因不明者74例(35.8%)。颈部外伤是年龄18岁患者脊髓梗死的首位病因;主动脉疾病是年龄18～45岁患者脊髓梗死的首位病因,动脉粥样硬化是年龄45岁患者脊髓梗死的首位病因。结论:ASAS较罕见,临床表现和病因差异很大,脊髓MRI检查弥散序列有助早期诊断,早期诊断和综合治疗是改善预后的关键。     

利用孕妇血浆或血清进行胎儿遗传信息的研究

目的 :已经肯定在孕妇外周血中有胎儿的遗传物质出现 ,本研究尝试直接利用孕妇血浆和血清进行胎儿性别鉴定 ,以明确其在无创性产前基因诊断中实际应用的可行性。方法 :在SRY基因高保守区设计两对性别特异性引物 ,利用巢式聚合酶链反应 (Nest PCR) ,对 5 0例孕妇血浆和血清中胎儿游离核酸进行扩增 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 (PAGE) ,DNA测序确定扩增产物的准确性。结果 :出生证实分娩男婴 2 8人 ,其阳性检出率 ,血浆组 32 2 % (9/ 2 8) ,血清组为 4 6 4 % (13/ 2 8)。而 2 2例分娩女婴的标本无论血清还是血浆组均未出现阳性结果。结论 :直接利用孕妇血浆和血清均可以鉴别胎儿的性别 ,这为无创性产前基因诊断提供了一个新的思路     

利用孕妇血浆或血清进行胎儿遗传信息的研究

目的：已经肯定在孕妇外周血中有胎儿的遗传物质出现，本研究尝试直接利用孕妇血浆和血清进行胎儿性别鉴定，以明确其在无创性产前基因诊断中实际应用的可行性。方法：在SRY基因高保守区设计两对性别特异性引物，利用巢式聚合酶链反应（Nest-PCR),对50例孕妇血浆和血清中胎儿游离核酸进行扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳分析（PAGE），DNA测序确定扩增产物的准确性。结果：出生证实分娩男婴28人，其阳性检出率，血浆组32.2%(9/28)，血清组为46.4%(13/28)。而22例分娩女婴的标本无论血清还是血浆组均未出现阳性结果。结论：直接利用孕妇血浆和血清均可以鉴别胎儿的性别，这为无创性产前基因诊断提供了一个新的思路。     

急性脑卒中患者并发感染对预后的影响

目的:探讨急性脑卒中并发感染对患者预后的影响。方法:对449例急性脑卒中患者给予相应药物治疗,记录入院时体温及住院期间最高体温;评估出院时巴氏指数(BI)、改良的Rankin量表评分(mRS)和减少的美国国立卫生研究所脑卒中评分(NIHSS)百分数,出院后6个月随访,记录病死率及BI、mRS。结果:住院期间感染者(感染组)290例,无感染者(无感染组)159例。感染组住院期间最高体温明显高于无感染组(P<0.01),年龄明显大于无感染组(P<0.01),住院时间明显长于无感染组(P<0.05);出院时及随访时BI均低于无感染组(P<0.01,P<0.05);出院时减少的NIHSS百分数明显低于无感染组(P<0.01),mRS明显高于无感染组(P<0.01);随访时病死率明显高于无感染组(P<0.01)。结论:卒中后并发感染不仅影响急性脑卒中患者的神经功能恢复,而且影响卒中后病死率。急性脑卒中并发感染患者的预后较未并发感染者差。     

武汉市消毒级内镜消毒效果监测报告

目的了解武汉市级以上医疗机构消毒级内镜的消毒质量和内镜洗消基础设施与消毒效果的关系。方法用现场采样检测方法对24所医疗机构进行了调查。结果在17所开展内镜诊疗服务的医疗机构中,设独立消毒室的有70.59%,≥4槽洗消池等内镜洗消基础设施到位率82.35%。消毒级内镜镜身消毒效果合格率平均为90.63%,内腔面消毒效果合格率平均78.13%。消毒效果在有独立消毒室与没有独立消毒室之间无明显差异,用4槽以上洗消池清洗与用3槽以下清洗池清洗之间无明显差异。结论武汉市级以上医疗机构内镜洗消基础设施部分不到位,内镜内腔面消毒效果合格率较低。     

不同基因型地中海贫血患儿铁负荷情况的分析

目的了解不同基因型地中海贫血(地中海贫血)患儿合并铁缺乏及铁负荷过重的发生率。方法对443例临床诊断为地中海贫血的患儿进行点阵列杂交技术基因分析和铁指标检测。结果443例地中海贫血患儿中合并铁缺乏者108例,占24.4%,铁负荷过重者97例(21.9%)。在57例α地中海贫血患儿中伴铁缺乏者13例(22.8%),386例β地中海贫血中95例(24.6%)伴铁缺乏,两者差异无显著性(P>0.25)。而57例α地中海贫血患儿铁负荷过重8例(14%),386例β地中海贫血患儿铁负荷过重89例(23.1%),β地中海贫血高于α地中海贫血,但差异无显著性。最易发生铁负荷过重的是纯合子β地中海贫血(79.2%),次之为非缺失型HBH(27.3%)。最易合并铁缺乏的是静止型α地(45.5%),次之是杂合子β地中海贫血(30.3%)。结论地中海贫血患儿既可发生铁负荷过重又可合并铁缺乏,因此有必要据其具体情况进行适当治疗。     

HRM-非标记探针法检测IL-15基因SNPs方法的建立

目的建立用于检测白细胞介素-15(IL-15)基因单核苷酸多态性(SNP)位点的高分辨率熔解曲线(HRM)-非标记探针的方法。方法采用HRM-非标记探针法及小片段扩增法对80名健康儿童IL-15基因4个SNPs位点进行基因分型,采用基因测序法进行验证并同时与小片段扩增法分型结果进行比较。结果 HRM-非标记探针法与基因测序分型结果一致,准确率为100%;未加入温度内标的小片段扩增法不能区分野生纯合子和突变纯和子。结论 HRM-非标记探针法是对已知SNP位点突变研究的一种廉价、简便、准确的基因分型技术,适合于对已知的SNP位点或基因突变进行分型和检测。     

干扰组蛋白乙酰化引发间充质干细胞心肌定向分化特定蛋白的异常表达

目的 利用组蛋白乙酰化修饰关键因子Gcn5 shRNA重组质粒转染经5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导后的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并检测心肌早期发育相关结构和功能蛋白表达情况,探讨组蛋白乙酰化修饰在MSCs定向分化过程中的调控作用.方法 ①以组蛋白乙酰化修饰关键因子Gcn5为靶点,用带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GrP)基因的pGenSil-1作为载体,构建Gcn5 shRNA质粒.②MSCs体外扩增,5-aza诱导后,不同的时间点用脂质体包载Gcn5 shRNA共转染大鼠MSCs,24 h后相差显微镜下观察细胞生长状况,电镜下观察染色质的形态变化,采用Western blot法分别检测Gcn5、心肌结构重链蛋白(myosin heavy chain,MHC)和连接蛋白(Connexin 43,Cx43)的表达状况.结果 电镜示经通用阴性质粒HK转染的MSCs细胞,形态与正常MSCs无明显差别,染色质仍以边集状态为主;经干扰质粒转染的MSCs细胞在形态上与正常MSCs细胞无明显差别,但其染色质出现明显的浓缩紧密现象.以β-actin为内参,比较干扰组和阴性对照组Gcn5、Cx43、MHC蛋白,计算出沉默效率分别为86%、58%和67%.结论 转染Gcn5 shRNA质粒可干扰组蛋白乙酰化平衡,进而影响MSCs体外分化中心肌发育特定蛋白的表达.