HPLC-MS/MS法同时测定三七花总皂苷中2种成分

目的建立高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定三七花总皂苷中2种成分的含有量。方法总皂苷甲醇提取液的分析采用Eclipse Plus-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm);以0.1%甲酸-乙腈(B);柱温25℃;体积流量0.3 m L/min,电喷雾离子源(ESI)正离子检测,多反应监测(MRM)模式定量。结果三七皂苷Fe、人参皂苷Rb1分别在0.152~15.2μg/m L(r=0.998 0)、0.168~16.8μg/m L(r=0.999 2)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.09%、99.95%,RSD分别为1.85%、2.59%。结论该方法简便、快速、准确、重复性好,可用于三七花质量控制。     

人参皂苷Rg3调控Dickkopf相关蛋白3对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探究人参皂苷Rg3对肝癌细胞增殖的影响及其作用机制.方法:以人肝癌细胞系HepG2为研究对象,分为对照组(Control)、人参皂苷Rg3组(G-Rg3)、人参皂苷Rg3+Dickkopf相关蛋白3无关片段组(G-Rg3+DKK3-NC)以及人参皂苷Rg3+Dickkopf相关蛋白siRNA组(G-Rg3+DKK...     

基于关联规则挖掘名老中医王行宽肝心同治胸痹心痛用药规律

目的:挖掘名医王行宽辨治胸痹心痛的用药规律。方法:利用数码相机收集王行宽教授近1年来在湖南中医药大学第一附属医院门诊收治的胸痹心痛患者的医案267份,规范其中出现的中药术语,建立Excel数据库,运用Weka3.6软件,对医案中出现的药味进行描述性统计,采用Apriori算法对药味进行关联分析。结果:1用药讲究通补兼施,"通"予丹参、薤白、三七、柴胡、郁金、瓜蒌皮、法半夏等;"补"予白参、麦冬、白芍、茯神、炙远志、黄芪、茯苓等;2可信度≥0.90的药味关联多为丹参或柴胡与补气阴药、豁痰化瘀药之间的配伍;3可信度≥0.65的同类药味关联中,治心常用白参、五味子、白芍配麦冬,法半夏、黄连配瓜蒌皮等;治肝常予郁金配柴胡,天麻、白蒺藜配钩藤、石决明等。另外,王老治疗胸痹心痛"用药平和",药味几无峻烈之品,药量的运用亦多在常理之中。结论:"肝心同治、通补兼施、用药平和"乃王老临床辨治胸痹心痛的用药规律。     

健康体检中多层螺旋CT冠脉成像的初步观察

目的探讨健康体检中多层螺旋CT冠脉成像(CTCA)对冠脉病变的价值。方法对随机抽取的289例健康体检时进行CTCA的病例作冠脉钙化(CAC)的定性分析,然后分别对CAC阴性者和CAC阳性者的冠脉狭窄情况进行统计分析。结果 289名受检者中77例为CAC阳性,占26.64%;212例为CAC阴性,占73.36%。在CAC阳性者中检出冠脉狭窄57例,占74.03%;CAC阴性者中检出冠脉狭窄21例,占9.91%。结论在健康体检时行胸部CT检查发现CAC阳性者,均应做CTCA检查;对CAC阴性者,如有高血糖、高血压、高血脂、吸烟者或有胸闷史者,也应做CTCA检查,以明确有无非钙化斑块的存在,避免非钙化斑块的漏诊。     

PTEN基因重组慢病毒的构建

目的:构建PTEN基因重组慢病毒,转染真核细胞Ishikawa并检测PTEN基因在真核细胞内的表达.方法:分子克隆重组人PTEN基因与含有CMV启动子和绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体PLIG,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.将重组子PLIG-PTEN和包装质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,感染子宫内膜癌细胞株Ishikawa,观察慢病毒表达载体所携带的GFP基因在细胞内的表达,使用RT-PCR和western-blot检测PIEN基因在细胞内的表达水平.结果:PCR和测序证实,成功克隆慢病毒载体PLIG-PTEN,包装慢病毒,感染真核细胞Ishikawa后48 h,观察到绿色荧光的广泛表述并检测出宿主细胞内表达的PTENmRNA成功表达PTEN蛋白.结论:本实验成功地构建了人PTEN基因慢病毒载体,并观察到PTEN基因在真核细胞中的成功表达.     

糖尿病诊断与分型的最新进展

糖尿病是一种当今世界的流行病 ,其患病率正呈逐年上升趋势。现在全球至少有 1 2亿人患 2型糖尿病。糖尿病是大多数国家中死亡率最高的五大主要疾病之一。而在我国 2型糖尿病的患病率在 1 980年不到0 9% ,1 995年是 2 5 % ,是 1 980年的 3倍左右[1] ,目前 ,我国的糖尿病的发病率已达 3 2 % ,估计到 2 0 1 0年 ,中国糖尿病的患病率将达到 1 4%。以前我国糖尿病的诊断的标准是根据 1 985年世界卫生组织 (ＷＨＯ)制定的诊断标准 ,十几年来 ,随着人们对糖尿病研究的不断深入 ,对糖尿病的病因与病理的越来越多的认识 ,使得很多研究糖尿病的人…     

小分子HSP对缺血—再灌注所致小鼠心肌actin损伤的影响

目的观察小鼠心肌缺血再灌注损伤时主要骨架蛋白actin的损伤性改变,研究心肌组织中两种含量丰富的小分子热休克蛋白(HSP)-αβ-crystallin和HSP25对上述损伤的保护作用,寻找小分子HSP保护心肌损伤的可能靶蛋白.方法采用Langendorff离体小鼠心脏灌流模型,经停灌30min复灌45min导致缺血-再灌注损伤,测定心肌组织匀浆中脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量;运用光镜和电镜观察心肌组织形态学改变;采用免疫双荧光标记技术和激光共聚焦扫描显微镜(confocalmicroscopy)观察心肌细胞中actin的结构变化、αβ-crystallin及HSP25分布的改变及其与actin的相互关系.进一步采用适宜浓度的活性氧H2O2在体外损伤心肌组织总蛋白,损伤后蛋白质经离心取沉淀,分别或联合加入αβ-crysallin、HSP25和HSc70(组成型HSP70)后,通过Westernblot观察其对上述损伤蛋白质中的actin的解聚和复性作用.结果小鼠离体心脏缺血-再灌注损伤后,心肌组织MDA含量明显增多(P＜0.05);与正常对照组相比,光镜及电镜下可见明显的细胞结构破坏和肌原纤维损伤经免疫双荧光标记和激光共聚焦扫描显微镜观察,发现心肌细胞重要骨架蛋白actin的排列发生紊乱和异常"聚集”,αβ-crystallin和HSP25从胞浆向肌丝移位,其中HSP25与受损聚集的actin存在"共分布”的现象.经蛋白质体外损伤和保护实验进一步发现,200mmolH2O2可导致心肌组织蛋白发生变性、聚集及沉淀,而αβ-crystallin和HSP25可使上述蛋白质沉淀物中的actin重新解聚和复性而出现在上清中,且两者间具有协同的效应,当有HSc70存在时,这种协同效应更加明显.讨论及结论本研究首次观察到缺血再灌注可导致心肌组织主要的收缩蛋白和骨架蛋白actin发生排列紊乱和异常"聚集”,这种变化可能是导致缺血再灌注心脏心律失常、舒缩功能降低和细胞结构破坏的分子机制之一.本实验证实,心肌缺血再灌注时αβ-crystallin和HSP25从胞浆向肌丝移位,其中HSP25和actin"聚集物”形成"共分布”关系.此外,本实验通过蛋白质损伤和保护模型,发现两种小分子热休克蛋白对受损的actin具有解聚和复性作用,且小分子HSP之间及小分子HSP与HSc70之间具有协同的效应.上述发现提示小分子HSP可能在保护心肌损伤方面起着重要的作用,actin可能是HSP25保护的主要靶蛋白之一.另外,我们近期实验发现在上述心肌缺血再灌注损伤时αβ-crystallin有与另一细胞骨架蛋白结蛋白(desmin)形成"共分布”的现象.结蛋白是否为αβ-crystallin保护的主要靶蛋白尚待进一步研究.     

儿童单侧腹股沟疝术后发生异时性对侧腹股沟疝的影响因素分析

背景与目的 腹股沟疝手术是儿童常见的外科手术之一,单侧腹股沟疝手术后发生异时性对侧腹股沟疝（MCIH）的概率为2.4%~29.0%,因此一些外科医生建议将对侧未闭的鞘状突进行预防性修复,不仅避免嵌顿疝的发生,同时减少全身麻醉的风险以及二次住院的费用;但是有学者认为,需要4~21次不必要的手术才能预防1次对侧腹股沟疝的发生,这将存在过度医疗,同时增加术中睾丸和输精管相关副损伤的危险。因此,本研究主要探讨儿童单侧腹股沟疝术后发生MCIH的影响因素,为单侧腹股沟疝儿童术后MCIH的预防和干预提供依据。方法 回顾性分析2019年1月─2023年9月蚌埠医科大学第二附属医院普通外科102例儿童单侧腹股沟疝患者的临床资料。结果 102例儿童单侧腹股沟疝术后出现MCIH患者共14例（13.7%）。MCIH组和非MCIH组在首次发病年龄、是否为低体质量儿、是否为早产儿方面差异有统计学意义（均P<0.05）。ROC曲线分析结果显示,MCIH首发年龄的截断值为3.5岁。单因素与多因素Logistic回归分析显示,首次发病年龄≤3岁（OR=10.382,95% CI=1.591~67.736,P=0.014）及出生时低体质量（OR=16.480,95% CI=2.714~100.056,P=0.002）是发生MCIH的独立危险因素。结论 首次发病年龄≤3岁及出生时低体质量是儿童单侧腹股沟疝术后MCIH发病的独立危险因素。对于首次发病年龄≤3岁及出生时低体质量,手术方式应选用腹腔镜疝囊高位结扎术以观察对侧是否存在鞘状突未闭,对于未闭的鞘状突进行预防性的结扎,预防MCIH的发生。     

团队为基础的学习方法在普外科教学中的应用

目的研究以团队为基础的学习方法在普外科肝胆胰脾疾病教学中的应用。方法选取学校2016级临床医学专业学生共84名,采用整体抽样的方法,分为实验组和对照组,每组各42名学生。对比两组学生专业理论知识、实践操作技能考核成绩、自我导向学习能力以及评判性思维能力情况。结果实验组学生实践操作技能及专业理论知识考核成绩均优于对照组,组间差异有统计学意义(P <0.05)。两组学生在学习策略、学习行为、人际关系技能及在寻求真相、分析能力、开放思想、认知成熟度、自信心方面的差异有统计学意义(P <0.05),在学习意识、学习评价及系统化能力及求知欲方面的差异无统计学意义(P> 0.05)。结论以团队为基础的学习方法在提高教学效果,储备高素质医学人才,培养学生综合能力等方面发挥积极的作用,对提高学生的整体素质是非常有益的。     

miR-628-3p对胃癌细胞HGC-27增殖和迁移能力的影响

目的 初步探究miR-628-3p对胃癌细胞系HGC-27增殖和迁移能力的影响.方法 qRT-PCR检测人正常胃黏膜细胞GES-1及HGC-27细胞miR-628-3p的表达水平.转染miR-628-3p模拟物后MTT法检测HGC-27细胞增殖,Transwell小室实验检测HGC-27细胞迁移能力,Western b...