抗癌基因与胃肠道肿瘤

象其他恶性肿瘤一样，胃肠道肿瘤的发生与演进也是一个多阶段过程，涉及到多种癌基因的激活和抗癌基因的失活，且后者似乎起更为重要的作用。近年抗癌基因的研究取得重要进展，特别是ＡＰＣ、ＭＣＣ、ＤＣＣ和Ｐ＾５３基因及它们及胃肠道肿瘤的关系日益受到重视。本文对这四种基因的结构、功能、蛋白产物、失活机制及在胃肠道肿瘤中的改变和意义作了简要综述。     

新型微弧氧化涂层镁-锌-钙合金支架/自体颗粒骨修复兔临界性骨缺损的研究

目的探讨一种新型微弧氧化(micro-arc oxidation,MAO)涂层镁(Mg)-锌(Zn)-钙(Ca)合金支架/自体颗粒骨修复兔临界性骨缺损(critical size bone defect,CSD)的效果,以及该支架在体内的耐腐蚀性和生物相容性。方法将72只新西兰白兔随机分为3组(n=24),A组为无涂层Mg-Zn-Ca合金支架组;B组为10μm厚MAO涂层Mg-Zn-Ca合金支架组;C组为单纯自体颗粒骨植骨组。所有动物制备双侧尺骨15 mm长CSD模型,A、B组将截取的尺骨制成颗粒骨后填充至支架内修复尺骨缺损,C组采用自体颗粒骨修复。术后2、4、8、12周,行大体观察并记录局部皮下积气量;X线片和Van Gieson染色观察骨缺损愈合情况,根据Lane-Sandhu标准行X线片评分;Micro-CT扫描观察并计算支架降解丢失体积百分比(ΔV)及降解速度(corrosion rate,CR);监测实验过程中血清Mg~(2+)、Ca~(2+)浓度变化,并于术后12周收集肝、脑、肾和脾组织行病理学观察。结果术后2、4、8周B组皮下积气量少于A组,其中2、4周两组间比较差异有统计学意义(P0.05);但术后12周时B组显著多于A组(P0.05)。术后4、8周C组X线片评分显著高于A、B组(P0.05),术后8周时B组显著高于A组(P0.05);术后12周B、C组显著高于A组(P0.05),但B、C组间差异无统计学意义(P0.05),同时B组骨缺损部位新骨塑形明显优于A组。Micro-CT示术后4、8周,B组CR及ΔV均显著低于A组(P0.05)。Van Gieson染色示B组较A组具有更好的生物相容性和促成骨性;血清离子监测结果显示术后各时间点3组血清Mg~(2+)、Ca~(2+)浓度比较,差异均无统计学意义(P0.05);术后12周,3组实验动物肝、脑、肾及脾组织HE染色均未见明显病理改变。结论新型MAO涂层Mg-Zn-Ca合金支架/自体颗粒骨能够有效修复CSD;同时,10μm厚MAO涂层能有效改良Mg-Zn-Ca合金支架的骨修复效果、耐腐蚀性及生物相容性。     

肠道病毒71型山东临沂分离株全基因组序列分析

目的 自1例死亡患儿的标本中分离EV71,并分析其全基因组序列特点,研究其基因序列的改变是否与其神经毒力有关.方法 咽拭子标本采自山东临沂市人民医院1例死亡患儿,在人横纹肌瘤细胞(RD)上分离EV71,分段扩增获得EV71的全序列,用BLAST、Bioedit和MEGA 4进行序列分析.结果 获得1株EV71分离株SDLY107,基因组全长7405 bp,全基因组核苷酸序列与2008年的阜阳株Fuyang.Anhui.P.R.C/17.08/2同源性最高,为98.6%,与原型株BrCr/70的同源性为80.0%,与神经毒型株MS/87的同源性为86.5%.系统进化分析表明,SDLY107与中国大陆的北京株、河南株、广西株、深圳株、兰州株、阜阳株、重庆株、浙江株的亲缘关系较近,按照传统的VP1基因分型方法,可归为C4亚型,是近年来我国大陆流行的主要基因亚型.氨基酸序列分析发现,SDLY107与其他毒株相比,有2个特有的突变(E947D,K1873R).结论 SDLY107分离株属于C4亚型,氨基酸突变E947D和K1873R可能与EV71的致病性有关.

Abstract：

Objective To isolate enterovirus 71 from a death children,and analyze whether the neurovirulence was related to the variation of nucleotide and amino acid. Methods Enterovirus 71 was isolated from throat swabs which were colleted from Shandong Linyi People's Hospital. The full length genome was sequenced by amplification with RT-PCR and sequencing of 9 overlapped gene fragments covering full length of the genomes. The nucleotide and amino acid sequenced was aligned by BLAST, Bioedit and MEGA 4. Results A strain of enterovirus 71 was isolated and named as SDLY107. The full length was 7405 bp. The results of homology analysis of overall nucleotide sequence showed that strain Fuyang. Anhui. P. R. C/17.08/2 had highest homology (98.6%)with strain SDLY107, and the homology was 80.0% between strain SDLY107 with prototype strain BrCr/70,and 86. 5% between strain SDLY107 with nerve strain MS/87. Phylogenetic analysis showed that the phylogeny was close between SDLY107 with some isolated strains from Chinese Mainland, such as Beijing, Henan, Guangxi, Sbenzhen, Lanzhou, Fuyang, Chongqing and Zhejiang strains, which was clustered for C4 subtype. The results of amino acid sequence analysis showed that there were 2 mutations, E947D and K1873R, for strain SDLY107. Conclusion SDLY107 belonged to C4 subtype, amino acid mutations E947D and K1873R of which may be relevant to the pathogenicity of EV71.     

经口内镜幽门肌切开术在治疗胃轻瘫中的应用及研究现状

【摘要】胃轻瘫,也称胃无力、胃麻痹,是一种以胃排空延迟为特征的的临床症候群,显著影响患者的生活质量,而有效的治疗方法非常有限。2013年第一例经口内镜幽门肌切开术(G-POEM)的报道,为治疗顽固性胃轻瘫带来了新的思路。其安全性和有效也在随后的病例系列报道中得到证实。作为一种新兴的经自然孔道腔内内镜手术(NOTES)方法,G-POEM越来越多地被研究与关注。现谨对G-POEM方法及在治疗胃轻瘫中的应用及研究现状做一综述。     

3省农村居民健康知识现状及影响因素研究

目的了解农村居民健康知识现状及其影响因素,并探索提高居民健康知识的思路和方法。方法采用单纯随机抽样方法,以自行设计的自填式问卷为调查工具,对四川、甘肃、陕西3省项目村648名农村居民进行问卷调查。调查内容包括:居民基本情况、健康知识知晓情况和健康教育干预活动参与情况。结果 6道健康知识题均回答正确的居民为243人(37.5%),均回答错误者为19人(2.9%)。女性居民健康知识高得分组者是男性居民的2.161倍,参加讲座、同伴教育、获得宣传材料居民的健康知识高得分组者,分别是没有参加相应健康教育干预活动的2.720、2.147和2.159倍(P<0.01)。结论农村居民健康知识水平有待进一步提高,举办讲座、开展同伴教育、发放宣传材料是有助于居民健康知识水平提高的健康教育干预活动。     

加味三仁汤治疗小儿暑湿型感冒28例

笔者运用加味三仁汤治疗小儿暑湿型感冒28例,取得较好疗效,现报告如下.     

APC蛋白在大肠粘膜、腺瘤及大肠腺癌中的表达

目的：探讨抑癌基因APC蛋白在大肠癌发生及演进的作用。方法：应用免疫组织化学方法分析了大肠腺癌、大肠腺瘤及腺瘤癌变和正常大肠粘膜中APC蛋白的表达。结果：正常粘膜中APC蛋白阳性率为100％（45／45），大肠腺瘤及腺瘤癌变中阳性率分别为80％（20／25）和55．5％（6／11），大肠腺癌中APC蛋白阳性率为44．4％（40／90），经统计分析发现大肠腺癌及腺瘤癌变APC蛋白阳性率显著低于正常粘膜（P＜0．01）,大肠腺癌中APC蛋白阳性率也显著低于大肠腺瘤（P＜0．01），而大肠腺癌与腺瘤癌变之间以及腺瘤与正常粘膜之间的APC蛋白阳性率无显著差别（P＞0．05），APC蛋白表达缺失与腺瘤类型、大小及组织学分级无关，与大肠癌临床病理参数无关。结论：APC蛋白表达缺失可能在大肠癌的早期发生中起重要作用。     

LINC01224靶向miR-125b对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响

摘要：目的?探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01224是否通过调控微小RNA-125b(miR-125b)的表达，从而影响口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖及凋亡。方法?采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测OSCC患者癌组织及癌旁组织中LINC01224的表达水平；体外培养OSCC细胞系CAL-27，将si-NC、si-LINC01224、si-LINC01224与anti-miR-NC、si-LINC01224与anti-miR-125b转染至CAL-27细胞；甲基噻唑基四唑(MTT)试验检测细胞增殖能力；流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡率；双荧光素酶报告试验验证LINC01224与miR-125b的靶向结合关系；western blot检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3前体蛋白(pro-caspase-3)、增殖标记蛋白细胞增殖核抗原67(Ki67)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(clv-caspase-3)、P21蛋白的表达水平。结果?与癌旁组织相比，OSCC患者癌组织中LINC01224的表达水平(1.00±0.05 vs 2.43±0.17)显著升高(t=94.345，P<0.05)，miR-125b的表达水平(0.98±0.06 vs 0.22±0.02)显著降低(t=14.838，P<0.05)；与si-NC组比较，si-LINC01224组细胞存活率[(100.02±6.73)% vs (47.94±4.69)%]显著降低(t=19.047，P<0.05)，G1期细胞比例[(31.03±3.01)% vs (42.29±4.12)%]显著增加(t=6.615，P<0.05)，S期细胞比例[(34.18±3.38)% vs (23.49±2.57)%]显著减少(t=7.553，P<0.05)，细胞凋亡率[(8.10±0.92)% vs (24.17±1.74)%]显著升高(t=24.494，P<0.05)，Ki67、pro-caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05)，P21、clv-caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05)；双荧光素酶报告试验证实LINC01224与miR-125b靶向结合；与si-LINC01224+anti-miR-NC组比较，si-LINC01224+anti-miR-125b组细胞存活率[(48.03±4.57)% vs (90.01±5.59)%]显著升高(t=17.442，P<0.05)，细胞凋亡率[(24.11±1.58)% vs (12.81±1.12)%]显著降低(t=17.504，P<0.05)，G1期细胞比例[(42.27±4.10)% vs (35.09±3.18)%]显著减少(t=4.151，P<0.05)，S期细胞比例[(23.53±2.54)% vs (30.03±2.96)%]显著增加(t=4.999，P<0.05)，pro-caspase-3、Ki67蛋白水平显著升高(P<0.05)，clv-caspase-3、P21蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论?LINC01224能够靶向调控miR-125b的表达，从而促进OSCC细胞增殖及抑制细胞凋亡。     

人结直肠癌肝转移瘤中CD11b~+髓系细胞分选方法的建立与鉴定

目的:从结直肠癌肝转移瘤组织中分选出高纯度的CD11b~+髓系细胞,从而建立从一种组织中获得特异单细胞的方法。方法:采用机械联合酶消化法将实体瘤组织制备成单细胞悬液;利用流式细胞术分选出CD11b~+髓系细胞,并回测细胞纯度;采用免疫细胞化学技术对分选出细胞的特异性进行鉴定;采用吉姆萨和台盼蓝染色对获得细胞进行评价。结果:流式细胞术能从机械联合酶消化法制备的单细胞悬液中分选出高纯度、足够数量的CD11b~+细胞;分选前细胞阳性率与分选后纯度的差异有统计学意义(P0.01),分选后纯度达到实验研究的要求(P0.05);免疫细胞化学技术验证了分选细胞的特异性;分选后的细胞形态完整,活性良好。结论:机械联合酶消化法制备的单细胞悬液,经过流式细胞术分选,能够分选出高纯度、活性良好且形态完整的特异性细胞,操作方法稳定可重复,满足进一步研究的要求。     

胃肠道肿瘤抗癌基因研究进展

随着肿瘤分子生物学研究进展,人们对肿瘤发生演进的过程有了更深入的了解。业已证明正常细胞的生长受原癌基因和抗癌基因的双重调节,两者之间存在着平衡关系。若这种平衡被破坏,便可导致肿瘤的发生。近年来除p53外,许多新的抗癌基因被确定并克隆,如APC,MCC,DCC。目前国外对以上四种基因及它们与胃肠道肿瘤的关系已有不少研究,多数认为在胃肠道肿瘤发生发展过程中这些抗癌基因的失活比原癌基因的激活更为重要。本文收集近期文献对