五味子丙素调控Nrf2信号通路改善对乙酰氨基酚诱导的小鼠肝损伤北大核心CSCD

过量的对乙酰氨基酚(APAP)在体内会被细胞色素P450系统转化为有毒代谢物NAPQI而消耗谷胱甘肽(gluta-thione,GSH),当GSH耗竭后,NAPQI与蛋白质共价结合,诱发线粒体功能障碍和氧化应激导致肝毒性.五味子丙素(schisan-drin C,SinC)是一种从五味子中分离出来的联苯并环辛二烯衍生物,具有保肝效应,但其对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的肝损伤是否具有保护作用及作用机制尚不明确.因此,该研究通过腹腔注射APAP(400 mg·kg^(-1))诱导小鼠发生急性肝损伤构建动物模型,旨在通过动物实验探究SinC对APAP所致肝损伤的影响及其作用机制,同时为中医药防治APAP过量导致的肝损伤提供潜在的候选药物.在APAP诱导的小鼠肝损伤模型中,五味子丙素可改善肝脏组织病理学病变,显著降低谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性,增加GSH和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量以及降低总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平.进一步分析表明,五味子丙素降低了肝组织中CYP2E1蛋白和mRNA水平,并增加了NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)及其下游靶标(包括HO-1、NQO1和GCLC)的表达.结果表明,五味子丙素可能通过降低CYP2E1的表达,抑制细胞凋亡,改善炎症反应,激活Nrf2信号通路,抑制氧化应激,从而改善APAP导致的肝损伤.     

基于相关可视化的壮骨关节丸特异质肝损伤与27种细胞因子的相关性分析

目的采用相关可视化的方法,探讨壮骨关节丸(Zhuangguguanjie Wan,ZGW)特异质肝损伤指标丙氨酸转氨酶(ALT)与27种细胞因子的相关性。方法 SD大鼠禁食12 h后,ig给予ZGW 3.8 g/kg,2 h后尾iv 2.8 mg/kg的脂多糖(LPS),给予LPS 10 h后水合氯醛麻醉大鼠,下腔静脉取血,采集肝组织样本。检测血清中ALT活力及肝脏组织27种细胞因子水平。R 3.2.4软件分析ALT与27种细胞因子及27种细胞因子之间的相关性。结果 ALT与巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-lα)和血管内皮生长因子(VEGF)之间具有较强的正相关性,白细胞介素-18(IL-18)、趋化因子-10(IP-10)、IL-1α和IL-1β之间具有很强的相关性,嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)或调节活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(RANTES)各自具有独立性。结论 ZGW特异质肝损伤与MIP-1α和VEGF之间具有较强的正相关性,为ZGW临床安全用药及风险防控提供新的实验证据。     

舒肝宁注射液体外抗纤维化作用实验研究

目的:研究舒肝宁注射液对人肝星状细胞LX2(HSC-LX2)细胞生长的影响,探讨其抗纤维化机制.方法:使用舒肝宁注射液处理HSC-LX2细胞,用细胞计数试剂盒-8(CCK8)法测定细胞的吸光度值,计算细胞增殖率.荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法和免疫印迹法分别检测Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白和转化生长因子-β(TGF-...     

木犀草素对对乙酰氨基酚诱导的L02肝细胞损伤的保护作用

探讨木犀草素(luteolin,Lut)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的L02肝细胞损伤的保护作用。CCK-8法检测Lut对L02细胞活性的影响;筛选APAP诱导L02细胞损伤的浓度及作用时间;细胞形态学、CCK-8实验和流式细胞术检测分析Lut对APAP诱导的L02细胞凋亡的影响;比色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)及超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-PCR检测凋亡相关基因Bax,Bcl-2,caspase-3的表达。结果显示Lut在2.5~40μmol·L~(-1)不影响L02细胞活性;12 mmol·L-1APAP作用于L02细胞12 h可用于建立肝细胞损伤模型。与模型组相比,Lut组细胞状态明显改善,胞体增大,贴壁能力恢复明显;细胞凋亡率明显下降;MDA含量显著下降(P0.05或P0.01),GSH和SOD活性显著提高(P0.05或P0.01),同时能够上调Bcl-2及下调Bax,caspase-3 mRNA的表达(P0.05或P0.01)。该实验证明了Lut对APAP诱导的L02细胞损伤有保护作用,其机制可能与其减轻氧化应激反应和抑制细胞凋亡有关。     

铁棍山药促进巨噬细胞吞噬细菌的高内涵分析方法研究

目的建立巨噬细胞系RAW 264.7对绿色荧光蛋白标记的大肠杆菌(GFP-E.coli)吞噬活性的高内涵分析方法,评价铁棍山药在体外对巨噬细胞增殖和吞噬活性的促进作用。方法采用CCK-8法测定铁棍山药作用于RAW 264.7巨噬细胞的增殖活性。采用高内涵技术,建立铁棍山药调节巨噬细胞RAW 264.7吞噬细菌活性的评价方法。结果通过考察给药时间、细菌加入量、细菌刺激时间等因素,确定所建立方法的最佳方案为给药12 h、细菌加入量为50倍、细菌刺激时间1.5 h;方法重复性考察RSD值为2.31%。与不加药组相比,在铁棍山药质量浓度为0.156~1.25 mg/m L都能促进巨噬细胞的增殖,以及单个细胞的平均吞噬率;在1.25 mg/m L时铁棍山药促进巨噬细胞的增殖及吞噬活性的能力最强。结论首次建立铁棍山药促进巨噬细胞吞噬活性的高内涵分析方法,该方法具有准确、直观、高通量等优势;铁棍山药在体外既能促进巨噬细胞增殖,又能提高单个细胞的吞噬能力,为进一步分析山药等补益类中药的免疫活性及增强免疫机制的研究提供新思路和新方法。     

基于《中草药相关肝损伤临床诊疗指南》的中药肝损伤诊断实例

近年,中草药相关肝损伤(herb-induced liver injury,HILI)问题备受关注,HILI因具有联合用药复杂、组成成分多样及体质、遗传、基础疾病等特点,导致其临床诊断比西药肝损伤诊断更加困难。中华中医药学会在2016年发布国内外首个专门针对HILI的诊疗技术标准——《中草药相关肝损伤临床诊断指南》(以下简称《指南》)。为便于广大临床医师特别是肝病专科医师在诊断HILI时对《指南》的操作应用,该文将不同诊断结果的病例诊断流程予以解析。     

六味五灵片联合常规药物治疗慢性乙型肝炎肝纤维化及肝硬化有效性和安全性的Meta分析

该文评价六味五灵片联合常规药物治疗慢性乙型肝炎肝纤维化及肝硬化的临床疗效和安全性。通过计算机检索中国知网(CNKI)、万方(Wanfang)、维普(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)、PubMed、EMbase、Cochrane Library数据库,全面检索六味五灵片联合常规药物治疗慢性乙型肝炎肝纤维化及肝硬化有效性及安全性的随机对照试验(RCTs),检索时间从建库至2021年2月,将检索到的所有文献由2位评价员独立筛选文献、资料提取和质量评价,运用Review Manager 5.4软件进行Meta分析。最终纳入18项RCTs,2168例患者,其中试验组1106例,对照组1062例。Meta分析结果显示,与单用常规药物相比,联用六味五灵片能够降低血清肝纤维化四项[透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原蛋白(procollagen typeⅢ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen,Ⅳ-C)]水平,改善患者肝功能,降低患者血清总胆红素(total bilirubin,TBiL)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,提高患者乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)转阴率及临床有效率。安全性方面,2组均未出现严重不良反应。结果表明,六味五灵片联合抗病毒或其他常规保肝药物治疗可以改善肝功能及肝硬化,减轻肝纤维化,安全性高。但受文献质量和数量的影响,还需进行多中心、大样本、高质量的RCTs进行验证。     

基于文本知识库的肝损伤药物不良反应大数据智能识别研究

目的 本研究基于药物不良反应(ADR)文本知识库的探索性构建,尝试建立肝损伤相关ADR的大数据智能识别方法。方法 以“药物性肝损伤”“药源性肝损伤”“肝功能异常”等为关键词,检索时间为2012年1月1日—2016年12月31日,检索并随机抽取药品不良反应监测系统数据库中5%(4152份)肝损伤相关ADR病例报告。结合医师临床再评价,分为“否定病例”“疑似病例”“确定病例”。在此基础上,进行关键要素的识别(不良反应名称、生化指标、临床症状),采用关键要素与临床再评价的相关性分析,以及ROC曲线确定评分阈值等构建肝损伤相关ADR智能识别方法,并采用交叉验证的方法评价该智能识别方法的效能。结果 肝损伤相关ADR评价识别公式为：总分(M)=症状分数+指标分数+不良反应名称分数,“否定病例”与“疑似病例”“确定病例”在M=5分区分度最好(AUC=0.97),敏感度为99.57%,特异度为84.61%;“确定病例”与“疑似病例”“否定病例”在M=12分区分度最好(AUC=0.938),敏感度为87.93%,特异度为85.98%。结论 该方法将为肝损伤相关ADR大数据智能识别评价提供参考和依据,有望...     

整合证据链、Roussel Uclaf因果关系评价法、结构化专家观点程序对药物性肝损伤的诊断效用分析

目的从西药肝损伤和中药肝损伤2个维度对目前诊断药物性肝损伤的3种常用诊断方法进行临床适用性分析,并比较其特征及差异。方法前瞻性队列研究纳入2015年1月—2020年12月入住解放军总医院第五医学中心的非中西药联合应用的急性药物性肝损伤住院患者289例为研究对象,其中,中药肝损伤187例,西药肝损伤102例。分别应用整合证据链（IEC）、Roussel Uclaf因果关系评价法（RUCAM）、结构化专家观点程序（SEOP）3种诊断方法对289例患者进行诊断,收集患者急性起病时的一般资料、潜伏期、详细服药情况、实验室指标ALT、AST、GGT、ALP、TBil等。统计分析3种诊断方法分别对西药肝损伤和中药肝损伤病例诊断结果评定的一致性和各自适用性。计量资料组间比较采用Kruskal-Wallis H检验,计数资料组间比较采用χ²检验。结果西药肝损伤与中药肝损伤的临床肝损伤类型均以肝细胞型为主（81.4%、74.3%）,实验室指标表现为有更高的ALT和AST水平。应用IEC、RUCAM、SEOP分别对西药肝损伤病例进行诊断,临床诊断率依次为65.7%、100%、63.7...     

妊娠女性药物相关肝损伤风险的识别及分析

目的 通过对妊娠女性药物相关肝损伤不良反应(ADR)特征识别与分析,警示其潜在用药风险。方法 收集中草药肝损伤云系统(hilicloud.net)中2012年1月1日—2016年12月31日妊娠女性药物相关肝损伤ADR报告进行回顾性研究,分析其主要临床特征及用药规律,并采用报告比值比(ROR)对相关药物进行相对风险分析。计量资料组间比较采用t检验。结果 妊娠女性药物相关肝损伤报告的高频药物有甲氨蝶呤、米非司酮、利托君等,主要用于终止异位妊娠及葡萄胎等疾病的治疗。药物相关肝损伤相对风险分析发现,妊娠女性使用甲氨蝶呤(ROR=37.52,95%CI:31.35～44.89)、黄体酮(ROR=7.33,95%CI:2.75～19.59)、地屈孕酮(ROR=6.58,95%CI:2.20～19.69)与肝损伤风险相关性较强,其中妊娠女性(ROR=37.52,95%CI:31.35～44.89)使用甲氨蝶呤比非妊娠女性(ROR=1.71,95%CI:1.47～4.36)使用发生肝损伤的风险相关性强。结论 应重视甲氨蝶呤、黄体酮等药物在妊娠女性人群中发生肝损伤的潜在风险,避免严重不良反应的发生。