小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag的构建及表达验证

目的构建含有生精细胞特异启动子Dazl的真核报告基因表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag,研究生精细胞特异启动子Dazl在生精细胞中的启动效果。方法通过同源重组的方法对腺相关病毒载体AAV-CMV-RFP-Flag进行改造,构建小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag。在体外,转染GC1-spg野生型细胞和HEK-293T细胞,通过免疫荧光、q-PCR、Western blot验证AAV-Dazl-RFP-Flag在体外的表达特异性。在体内,将AAV-Dazl-RFP-Flag进行腺相关病毒(AAV)包装,通过显微注射技术将AAV注射到小鼠睾丸内,通过q-PCR检测AAV-Dazl-RFP-Flag在体内的表达特异性。结果成功构建了AAV-Dazl-RFP-Flag表达载体,并在体内、外水平验证了AAV-Dazl-RFP-Flag的表达。结论小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag可以在生精细胞中特异性表达,为雄性生殖不育的基因治疗提供更高效的载体工具。     

TRH对兔急性颅脑损伤后脑组织自由基反应的影响

目的：探讨促甲状腺素释放激素（TRH）对急性实验性颅脑损伤后脑组织自由基反应的影响。方法：30只家兔随机分为A、B、C3组。A组和B组采用自由落体直接打击法建立兔急性实验性颅脑损伤模型,C组不致伤。A、B2组致伤后0．5h分别给予TRH或等量生理盐水至伤后4h。检测脑组织SOD、LPO,采用干燥重量法测定脑含水量。结果：与B组比较,A组损伤后脑组织中SOD活性增加,LPO含量及脑组织含水量减少（P＜0．05）;A组与B组致伤后5min颅内压均较C组及伤前升高（P＜0．05）,且随时间延长,颅内压递增,但A组给药后颅内压增高速度明显减慢（P＜0．05）。结论：TRH能够显著减轻兔急性实验性颅脑损伤后脑组织自由基反应,减轻脑水肿。     

手术治疗高血压脑出血破入脑室68例

0　引言　高血压病常见 [1 ,2 ] ,脑出血又是常见并发症 [3,4] .1997- 0 5 / 1999- 10共收治高血压脑出血破入脑室 6 8例 .依据形成高颅压的不同原因 ,因病施治 ,个体化治疗 ,治疗效果满意 .1　对象和方法1.1　对象　本组 6 8(男 42 ,女 2 6 )例 ,年龄 38～ 78(平均年龄5 1.2 )岁 .脑内血肿量 <30 m L者 9例 ,31～ 5 0 m L者 13例 ,5 1～ 90 m L者 2 5例 ,>91m L者 2 1例 .血肿破入一侧脑室者18例 ,破入双侧及 脑室者 2 6例 ,脑室铸型者 2 4例 .浅昏迷16例 ,中度昏迷 32例 ,深昏迷 2 0例 .单侧瞳孔散大 31例 ,双侧瞳孔散大 8例 .GCS6 - …     

毛冬青甲素体外给药对花生四烯酸诱导的兔血小板聚集和丙二醛生成的影响

研究了毛冬青甲素体外给药对花生四烯酸诱导兔血小板聚集和聚集液中过氧化脂质含量变化的影响。结果表明,毛冬青甲素在较大样本中可抑制花生四烯酸诱导的血小板聚集和过氧化脂质的生成,两者间具有一定的相关性,表明毛冬青甲素抗血小板作用可能与抑制过氧化脂质有关。由于后者的生成量与花生四烯酸代谢活性产物TxA₂的生成有近似等摩尔增加的关系,故推测毛冬青甲素对TXA₂的合成有阻断作用,这种作用可能为毛冬青甲素抗血小板功能的作用机制。     

治疗炎症性肠病的5-氨基水杨酸口服制剂概述

溃疡性结肠炎 (ulcerative colitis,CD)和节段性回肠炎(Crohn's Disease,CD)统称为炎症性肠病 (inflam matory bow-el disease,IBD) ,是一种较为常见的慢性、反复发作的疾病。其病因尚不明确 ,药物治疗一直是主导方法 ,美沙拉嗪(mesalazine,5 - ASA )是治疗 IBD的主要药物之一。1　 5 - ASA简介5 - ASA又称美沙拉嗪 (mesalazine) ,是一种白色或略带粉红色的针状结晶 ,当它暴露于空气中时易被氧化 ,变黑。它的溶解度受 p H值的影响较大 ,在 p H2 .0～ 5 .5之间 ,其溶解度最低。 5 - ASA主要通过抑制前列腺素的分泌以及白三烯和自…     

重组人肝细胞生长因子β链体外生物学活性的测定

目的　建立一种稳定灵敏的方法用于检测重组人肝细胞生长因子β链 (rhHGF β)对原代培养成年大鼠肝细胞的增生作用。方法　利用噻唑蓝 (MTT)比色方法在多种实验条件下对rhHGF β进行生物学活性检测。结果　对于体外原代培养成年大鼠肝细胞 ,rhHGF β可刺激肝细胞的增生 ,且有剂量依赖效应。 结论　确定了原代培养肝细胞检测rhHGF β生物活性的最佳条件方案     

西拉普利对体外培养系膜细胞和糖尿病大鼠肾皮质胰岛素样生长因子-1表达的影响

目的　探讨血管紧张素转换酶抑制剂西拉普利对体外培养肾小球系膜细胞和糖尿病大鼠肾皮质胰岛素样生长因子 1(IGF 1)表达的影响。方法　于低糖 (5 6mM )和高糖 (30mM)环境中培养人胎肾小球系膜细胞 ,分别加入西拉普利 (10 μM) ,观察其对IGF 1mRNA表达 (RT PCR法 )及纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原分泌 (酶免法和放免法 )的影响。将糖尿病SD大鼠随机分为糖尿病对照组和西拉普利 (1 0mg·kg 1 ·d 1 灌胃 )组 ,分别于第 4和第 8周末检测其肾皮质IGF 1mRNA表达、基质蛋白沉积和尿白蛋白 /肌酐比值等指标。结果　高糖环境下系膜细胞IGF 1mR NA表达增高 ,上清液中基质蛋白含量也显著升高。加入西拉普利后IGF 1mRNA表达量明显降低 ,且基质蛋白含量也显著下降。糖尿病对照组大鼠肾皮质IGF 1mRNA表达明显高于正常对照组 ,西拉普利组IGF 1mRNA表达、尿白蛋白 /肌酐比值和基质蛋白沉积则显著低于糖尿病对照组。结论　西拉普利可抑制高糖环境下IGF 1在系膜细胞和肾皮质的过度表达 ,减少糖尿病大鼠基质蛋白在肾皮质的沉积 ,降低尿白蛋白排泄率 ,提示早期应用血管紧张转换酶抑制剂抑制IGF 1过度表达有益于对糖尿病肾病的防治     

中西医结合治疗结节性囊肿性痤疮58例

痤疮是一种常见的皮肤病。其中结节性、囊肿性痤疮是两种较严重的类型，不仅治疗效果差，且多数患者处理不当，愈后遗留疤痕。笔者自1999年12月～2002年12月采用中西医结合治疗，疗效明显，现报道如下。     

脊肌萎缩症临床及基因诊断研究

３０例脊肌萎缩症（ＳＭＡ），其中Ⅰ型１３例，Ⅱ型１７例。临床表现肢体及躯干进行性对称性肌无力及肌萎缩，合并肋间肌麻痹及肌束震颤。血清肌酸磷酸肌酶（ＣＰＫ）４３～２９０ＩＵ／Ｌ。肌电图（ＥＭＧ）特点：静止状态可见纤颤正向电位，轻收缩时运动单位电位时限增宽，重收缩时为单纯相。肌活检可见萎缩肌纤维及正常肌纤维相间分布，周边可见肥大肌纤维，Ⅰ型病例可见成群或成束状萎缩肌纤维。单链构象多态性（ＳＳＣＰ）检测患儿和父母及无亲缘关系的正常人运动神经元存活基因（ＳＭＮ）外显子７缺失。结果：３０例ＳＭＡ中纯合缺失Ⅰ型１１例，Ⅱ型１３例，总缺失率为８０％。患儿父母及正常人共６８例，其中１例患儿母亲为纯合缺失，其余均无纯合缺失。