硫化氢对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察新型气体信号分子硫化氢对肝肿瘤HepG2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法将不同浓度的硫氢化钠体外作用于体外培养的人肝癌细胞HepG2后,显微镜观察HepG2细胞形态改变,四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测肝癌细胞增殖,流式细胞仪检测肝癌细胞周期,DNA片段化检测细胞凋亡及不同浓度蛋白激酶抑制剂下硫氢化钠对细胞的增殖作用。结果在5 mmol/L~10^-4 mmol/L不同浓度硫氢化钠作用下,人肝癌细胞均增殖,其中以1 mmol/L浓度的硫氢化钠效果最明显;细胞周期中以G₁为主。在1 mmol/L NaHS的培养下,受不同浓度的蛋白激酶抑制剂（Tyrphostin 47）预处理后,随着Tyrphostin 47浓度增加,细胞的生长愈受到抑制。结论硫化氢能诱导培养的肝肿瘤细胞生长,其机制可能是通过激活蛋白激酶,诱导细胞周期增殖,其中1 mmol/L浓度促细胞增殖作用最明显。     

原发性甲状腺癌手术经验和体会

目的总结原发性甲状腺癌手术治疗的经验和体会。方法回顾性分析我院1994年4月～2005年4月收治的经手术病理确诊的92例患者临床资料,并结合有关文献分析原发性甲状腺癌(PTC)的癌前病变及手术方式的选择。结果92例原发性甲状腺癌中,乳头状癌85例(92.9%),滤泡状癌和髓样癌各2例,未分化癌1例,非典型腺癌恶变和癌变各1例。伴颈部淋巴结转移20例(21.74%),伴同时性肺转移2例(2.17%),合并结节性甲状腺肿18例(癌变3例),合并桥本氏甲状腺炎7例(癌变2例)。治疗行甲状腺癌根治术76例,甲状腺癌根治术加患侧颈淋巴清扫术14例,甲状腺癌根治术加肺转移灶切除术(肺叶切除术)2例。结论乳头状甲状腺癌治疗首选甲状腺癌根治术,有孤立远处转移灶的可行甲状腺癌根治术加远处转移灶切除术,建议推行全甲状腺切除术加终身服用甲状腺素的治疗方案。     

金元医家窦汉卿与道家关系探讨

为探寻金元医家窦汉卿针灸理论产生的文化因素,笔者对窦氏生平材料进行梳理,以探讨窦氏与道家之间的关系。通过手工检索得到古代历史文献数则,同时对日本回归的明代吴嘉言《医经会元·针灸原枢·窦太师秘传密话针经琼瑶宝鉴》进行分析。结果发现,窦汉卿针灸受到宋初道医《素问亡篇·刺法论》的影响,又得山人宋子华传授《交经八穴》;窦氏与全真派道士樊志应有所交往,但无明确的医学往来记录;《窦太师秘传密话针经琼瑶宝鉴》可能为道医在窦氏针灸基础上的改编汇集之作。窦汉卿与道家之间存在着相互影响、相互借力的双向依存关系。     

腺病毒介导KDR启动子的胸苷激酶基因对血管内皮细胞的靶向杀伤作用

目的: 体外实验评估腺病毒介导KDR启动子-胸苷激酶系统(HSV-tk)杀伤血管内皮细胞的作用. 方法:采用新型AdEasy系统,构建受KDR启动子和巨细胞病毒(CMV)启动子调控并可表达HSV-tk基因的AdKDR-tk和AdCMV-tk,在293细胞中包装、扩增后,体外分别感染表达KDR的人脐静脉血管内皮细胞株(HUVEC)和不表达KDR的人鼻咽癌细胞株CNE-2,用丙氧鸟苷(GCV)处理受染细胞,并以MTT法检测其细胞增殖情况. 结果:病毒滴度均为1×1013 pfu/L. 在感染复数(MOI)为100的条件下,GCV浓度由0增至50 mg/L时感染含AdKDR-tk的HUVEC细胞和CNE-2细胞存活率从(89.4±4.6)%和(91.5±4.4)%分别下降至(22.9±4.7)%和(71.4±2.9)%(P＜0.01),而感染AdCMV-tk的HUVEC细胞和CNE-2细胞存活率从(89.9±6.2)%和(90.8±5.7)%分别下降至(12.8±2.6 )%和(18.8±6.1)%(P＞0.05). 结论:腺病毒介导KDR启动子-胸苷激酶系统具有特异性杀伤血管内皮细胞作用.     

重用生白术组方防治便秘的临床研究进展

对近30年来重用生白术组方预防治疗便秘的临床研究进展作一概述.从文献报道来看,在组方中使用大剂量生白术预防治疗便秘确有一定疗效,对虚证、实证便秘皆可应用,关键在于辨证准确、配伍得当:(1)应用生白术;(2)提倡大剂量,对儿童单用15-30g,对成人用20-200g;(3)辨证常用配伍包括阴虚加生地、升麻,阳虚加肉桂、附子、厚朴、干姜、肉苁蓉等温热之品;(4)大多以水煎服为主,也可泡水代茶饮;(5)短期疗效与长期疗效均好;(6)对长期使用果导、开塞露、大黄、番泻叶等泻药无效,或停药复秘者均有较肯定的疗效;(7)未见腹痛、腹泻及其他明显副作用与不良反应.目前临床研究仍存在较多问题.     

声诺维联合超声辐照增强绿色荧光蛋白质粒转染血管内皮细胞的实验研究

目的探讨造影剂声诺维(SonoVue)联合超声辐照人脐血管内皮细胞(HUVEC)时增强型绿色荧光蛋白报告基因质粒(pEGFP)的瞬时转染效率。方法使用连续多普勒超声辐照方式介导pEGFP转染HUVEC,照射条件为频率1.9MHz,TIS0.8,SATA为80.0mW/cm2,时间持续5min,添加或不添加2%SonoVue,pEGFP浓度为50μg/ml。48h后用流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)瞬时转染表达率,并用台盼蓝染色检测细胞活性(生存率)。结果单纯超声辐照组GFP转染率仅为1.5%±0.2%,SonoVue联合超声辐照组为16.1%±1.9%(P<0.001);两组细胞生存率分别为94.1%±2.3%和91.1%±4.1%(P>0.05)。结论SonoVue联合超声辐照条件可增强pEGFP转染HUVEC的效率,而对细胞活性无明显影响,此方法可用于目的基因转染。     

综合医院中医科门诊5013例患者消化系统症状特点及与心理因素的相关性调查

目的了解中医科门诊患者中具有消化系统症状的人数比率、各症状分布规律及其与心理因素的相关性。方法采用症状自评量表(SCL-90)、症状量表和诊断量表对5 013例首都医科大学附属北京友谊医院中医科门诊就诊患者进行问卷调查,资料采用独立样本t检验进行比较。结果中医科门诊就诊患者消化系统症状的发生率较高,为43.8%;具有消化系统症状的患者中,症状自评量表(SCL-90)总分高于160分者有210人,筛选阳性占调查人群的9.57%;具有消化系统症状的患者的各项因子分的均分均大于无消化系统患者,且差异具有统计学意义(P0.01)。结论综合医院中医科门诊就诊患者中具有消化系统症状的患者占有较大比率;消化系统症状的出现与心理因素有较大的相关性,因此中医科门诊在治疗消化系统症状的同时还应考虑到对于情绪的疏导及情感疾病的治疗。     

重组腺病毒介导的Bcl-2基因转染对缺氧再复氧肠上皮细胞的保护作用

目的探讨复制缺陷型重组腺病毒介导的Bcl-2基因转染对缺氧再复氧损伤肠上皮细胞的保护作用。方法构建能介导Bcl-2基因转染和表达的复制缺陷型重组腺病毒载体(Ad/CMV-Bcl-2),转染体外培养的小肠上皮细胞株(IEC-6),检测其Bcl-2基因表达变化,分别对正常对照组、缺氧复氧组(单纯给予缺氧复氧处理)、Ad-CMV/Bcl-2转染组(AdCMV/Bcl-2腺病毒载体转染48h后再给予缺氧复氧处理)细胞的凋亡率、死亡率及活力进行分析。结果对照组微弱表达,Ad/CMV-Bcl-2转染组细胞Bcl-2基因高表达;经缺氧再复氧处理后,Annexin-V-Flous试剂盒检测死亡细胞明显减少(P0.01),凋亡显著受到抑制(P0.01);采用MTT法证明,Ad/CMV-Bcl-2转染组细胞活力较对照组明显增强(P0.01)。结论复制缺陷型重组腺病毒介导的Bcl-2基因转染可显著减轻缺氧再复氧导致的肠上皮细胞损伤。     

IL-12基因修饰树突状细胞体外诱导免疫杀伤肝癌细胞

树突状细胞(dendritic cell，DC)是体内功能最强的抗原呈递细胞，通过IL-12基因修饰DC可望使其在呈递肿瘤抗原的同时又持续分泌高滴度的IL-12，从而更有效地诱导T淋巴细胞增殖、分化，进一步增强特异性抗肿瘤免疫。我们采用HepG2肝癌细胞株的肿瘤相关抗原(TAA)致敏IL-12基因修饰的DC，观察了其体外诱导自体T淋巴细胞产生特异性抗肝癌免疫的效能。     

高效抗逆转录病毒治疗后HIV感染者/AIDS患者精液质量及HIV RNA水平研究

目的:高效抗逆转录病毒治疗(HAART)可以显著延长HIV感染者的寿命并提高其生活质量,越来越多的男性HIV单阳的夫妻希望完成做父母的愿望,本研究通过检测HAART治疗后男性HIV/AIDS患者精液HIV-1 RNA水平与精液指标,评估潜在传播风险和精液质量,为优生优育提供依据。方法:20例有生育要求且接受HAART超过6个月的男性HIV携带者/AIDS患者,用精子动态图像分析系统检测其精子浓度、存活率、总活力、正常形态精子百分率,用COBAS Amplicor检测精液HIV RNA载量及流式细胞仪技术计数血液CD4+T细胞。结果:20例患者年龄25~40(30.7±5.05)岁,接受HAART治疗6(14.24±12.26)个月以上,治疗前基线CD4+细胞226~965 cells/ul(422.38±200.86),检测时CD4+细胞341~1 058 cells/ul(535.76±212.02)。除1例外精液量均高于正常参考值(≥2 ml);14例患者精子总活力低于正常值(≥40%),18例患者前向运动精子百分率低于正常参考值(≥32%),2例精子浓度低于正常参考值(≥15×106/ml);有5例精子存活率低于正常参考值(58%);有6例正常形态精子百分率≤4%。20例患者外周血HIV-1 RNA均20拷贝/ml,18例精浆HIV-1RNA也20拷贝/ml,但2例20拷贝/ml,分别为4.70×101拷贝/ml和2.2×102拷贝/ml。4例与配偶无保护措施同房超过半年,女方定期查HIV抗体均阴性,其中1例自然怀孕生育,母子HIV-1 RNA均为阴性。结论:HAART治疗后仍有部分患者精液中HIV RNA水平高于血浆中HIV RNA水平,提示精液仍可能存在少量HIV,具有潜在传染风险,因此对男性HIV感染者/AIDS患者常规检查精液HIV-1 RNA可以降低女性感染风险。同时发现,HIV感染者/AIDS患者精子总活力与浓度低于正常参考值,生育能力降低。