灌注法构建小肠黏膜全层去细胞外基质

背景：对于解剖层次复杂的细胞外基质,单纯浸泡法则很难达到理想的去细胞效果.目的：观察灌注法去细胞技术制备小肠黏膜全层去细胞外基质的效果. 方法：采用灌注法去细胞技术,经成年雄性新西兰大白兔小肠黏膜上动脉灌注去离子剂后处理获得小肠黏膜全层去细胞外基质.采用MTT法检测小肠黏膜全层去细胞外基质浸提液（实验组）或含体积分数20%小牛血清的DMEM（对照组）与1月龄新西兰大白兔骨髓间充质干细胞共培养后的细胞相对增殖率. 结果与结论：①大体观察：小肠黏膜上动脉经灌注30 min后变得苍白透明,经2 h灌注后肠段变得苍白剔透,清楚可见脉管纹理.②组织学与扫描电镜观察：灌注法构建的小肠黏膜全层去细胞外基质的去细胞程度均匀,胶原纤维未受损,孔隙多,孔隙率为（86.72±2.98）%.③M TT 检测实验：培养2,4,7 d,实验组细胞A值明显高于对照组细胞A值（P〈0.05）,且实验组细胞相对增殖率均〉1.表明采用灌注法构建小肠黏膜全层去细胞外基质可操作性强,安全性好,且小肠黏膜全层去细胞外基质对骨髓间充质干细胞无毒性,并有一定的促生长作用.     

南方红豆杉外植体母株来源与培养基成分对愈伤组织生长和紫杉醇的影响

目的建立和优化获得量大而高紫杉醇愈伤组织的培养技术和方法。方法以山西陵川县野生和在西安栽培的南方红豆杉为材料,就最佳母株、外植体种类、基本培养基、植物激素种类及浓度对愈伤组织诱导、生长和紫杉醇的影响等因素进行了系统研究。结果幼茎外植体因诱导的愈伤组织时间早、频率高而最佳;培养基Y 5:M S 2,4-D 4.0 m g/L K IN 1.0 m g/L或B 5Ⅲ:B 5 2,4-D 3.0 m g/L K IN 0.1 m g/L Phe 0.1 m o l/L为最佳诱导愈伤培养基,其诱导频率高达100%。继代培养基中质量浓度2,4-D(0.5~3 m g/L)促进愈伤组织增殖;高质量浓度(8 m g/L)则有抑制作用。当2,4-D质量浓度适宜时,愈伤组织在B 5培养基上较在M S培养基上褐化轻、生长快。HPLC分析表明紫杉醇最高的继代培养基为M SⅢ,其紫杉醇质量分数高达干重的0.004%;野生母株幼芽来源的愈伤组织,其紫杉醇普遍高于栽培母株幼茎来源的愈伤组织。结论以5月份野生红豆杉幼茎为外植体,以Y 5或B 5Ⅲ为诱导培养基和继代培养基,继代8~10代,每代培养30~35 d;用M SⅢ培养基再培养1~2代,收获愈伤组织或细胞培养物,并从中提取紫杉醇是获得大量高紫杉醇愈伤组织的较佳培养程序。     

鼻内镜治疗老年慢性鼻窦炎疗效评估

目的 评估鼻内镜治疗老年慢性鼻窦炎的临床疗效;分析并讨论围手术期处理要点.方法 选取2011年1月至2016年1月于成都医学院第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科住院治疗,且临床资料记录完整的慢性鼻窦炎患者200例为研究对象,根据年龄分为老年患者106例(观察组) 和中青年患者94例(对照组),所有患者均接受鼻内镜手术治疗,分析两组患者合并基础疾病的情况;比较两组患者手术情况、临床疗效、鼻部功能恢复时间、手术并发症发生情况及术后复发率等情况.结果 观察组合并基础疾病比例为63.21%(67/106),明显高于对照组的22.34%(21/94),差异有统计学意义(P<0.05);观察组和对照组在临床治疗总有效率、平均鼻部功能恢复时间、并发症发生情况、随访3年复发率方面比较,差异均无统计学意义(92.45% vs 94.68%,8.97 d vs 8.36 d,7.55% vs 6.38%, 10.38% vs 9.57%,P>0.05);两组患者术中100~300 mL出血量例数比较,差异有统计学意义(17 vs 4,x2=1.352, P<0.05).结论 功能性鼻内镜手术是治疗老年慢性鼻窦炎的一种安全、有效的方法,加强围手术期处理对保证手术安全、顺利进行,控制术中出血至关重要.     

负压封闭引流技术在创伤序贯救治中的应用

目的 分析负压封闭引流技术在不同创面序贯救治中的应用情况,探讨负压封闭引流对血压、血液指标的影响,为规范化开展负压封闭引流技术提供临床应用依据。 方法 选取2009年5月-2015年11月成都医学院第一附属医院烧伤整形科收治的35例创伤所致皮肤软组织缺损、无法一期手术封闭的患者,采用"简单清创-负压封闭引流-二期手术"的序贯治疗方式,进行治疗。根据具体伤情变化制定负压封闭引流时间,每3~7 d更换敷料,观察创面改善进展;根据具体创伤情况制定二期皮肤或皮瓣移植手术方式,同时进行血压、血液学指标的监测。 结果 所有创面在简单清创并负压封闭引流后逐渐形成新鲜肉芽,无脓性渗出,创面面积逐渐缩小;29例患者经过1次皮肤或皮瓣移植手术后治愈,6例患者经过2次皮肤或皮瓣移植手术治愈;1例负压吸引面积达10%的患者在清创-负压封闭引流术后血红蛋白由117 g/L降至61 g/L,给予对症支持处理,保持负压封闭引流,随后患者血红蛋白逐渐上升,经负压封闭引流2周、植皮术后3周,创面愈合。 结论 "简单清创-负压封闭引流-二期手术"的序贯救治方案为皮肤软组织缺损、无法一期手术封闭的创伤患者提供了一项简便可行、疗效确切的治疗方法,避免伤口感染,促进创面愈合;对于负压封闭引流面积达10%的患者,首次清创可能会影响血液学指标变化,但处于可控范围之内,负压吸引过程对血液指标以及血压的影响不大。      

重组沙门菌表达结核分枝杆菌ESAT-6及其特异性免疫应答分析

Objective To determine the immune responses induced by recombinant Salmonella ty-phimurium expressing the secreting antigen ESAT-6 of Mycobacterium tuberculosis. Methods ESAT-6 cod-ing gene was cloned and identified by PCR and sequencing. Prokaryotic expression plasmid pYA33-esat car-rying the ESAT-6 coding sequence was constructed firstly and electro-transformed into an attenuated strain X4550 of Salmonella typhimurium, the recombinant bacteria was named as X4550(33-esat). C57BL/6 mice were immunized intranasally (I. N) with 108 CFU recombinant bacteria at day 0 and 18. Cells from spleen, lung, mesenteric lymph node (MLN) and Peyer's patch (PP) were collected from mice after second immu-nization, and the specific IFN-γ-secreting cells and IL-4-secreting cells were detected by ELISPOT assay u-sing ESAT-6 peptide as stimulus. Furthermore, CTL effects were in vivo evaluated by CFSE assay. Results The results showed that cellular immune responses specific for ESAT-6 could be detected by ELISPOT assay. In lung and PP cells, immune responses against ESAT-6 were biased toward Th1 type, the frequency of IFN-γ-secreting cells was much higher than that of IL-4-secreting cells. In splenocytes and MLN cells, the anti-gen specific immune responses acted as Thl and Th2 balance, the frequency of IFN-γ-secreting cells was close to that of IL-4-secreting cells. CFSE assay indicated that recombinant bacteria could induce the high level of CTL effects specific for ESAT-6 peptide. Conclusion These results suggested that recombinant Sal-monella typhimurium X4550(33-esat) not only can induce cellular immune responses, but also can elicit specific CTL responses after I. N immunization. It also provided the useful information for the control of infec-tious disease of tuberculosis.     

应用D7S820基因座研究中国8个地区汉族人群的亲缘关系

收集D7S820基因座的8个不同地区汉族的相关遗传资料。应用亲缘系数(I)和遗传距离(D)研究八个汉族群体间的遗传关系，并根据遗传距离绘制遗传树。结果显示，成都、贵州和浙江汉族为一群，西安、太原、河北和长白山汉族为一群，而北京汉族为独立的一群。     

急性创伤性凝血病:分子机制及诊疗进展

在世界范围内,创伤是引起人类死亡的第二大原因。虽然建立了区域性急救体系并且在创伤治疗方面有所提高,但是病死率仍居高不下。创伤所致的凝血障碍约占创伤后死因的40%。创伤性凝血病的发病机制复杂,涉及多个系统。目前认为,急性创伤性凝血病并非简单的消耗性凝血障碍,而是凝血系统、纤溶系统、组织灌注、炎症反应及血管内皮功能动态平衡的紊乱。因此,凝血障碍应以血小板及内皮细胞为核心的细胞分子模型解释而不是过去的血浆模型。现对创伤性凝血病的发病机制作一总结。