小鼠PPARδ基因表达载体pCMV-PPARδ的转化扩增

取含鼠过氧化物酶体增殖物激活受体δ（mPPARδ）基因载体pCMV-PPARδ质粒转化DH5α感受态菌,再接种到含卡那霉素的LB琼脂培养板进行抗性筛选,对挑取的阳性克隆进行LB液体培养基培养。结果转化的DH5α菌在含卡那霉素的琼脂平板上呈克隆样生长,经LB液体培养基培养后提取的pCMV-PPARδ质粒其A260/A280=1.88,浓度为560 ng/μl。提示本研究成功转化并扩增了pCMV-PPARδ质粒,为PPARδ的相关研究提供了高纯度、高浓度的表达载体。     

确证家兔外周血中存在具有多向分化能力的间充质干细胞

本研究确证家兔外周血中存在具有多向分化潜能的间充质干细胞（MSC）。取成年新西兰大白兔,经每日皮下注射粒细胞集落刺激因子30μg/kg动员6d后采集外周血样品,用Ficoll密度梯度离心和贴壁培养法分离纯化外周血间充质干细胞（PBMSC）,镜下观察其生长形态并绘制增殖曲线;流式细胞术分析其表型特征;并分别对培养的PBMSC进行成骨、成软骨及成脂细胞诱导分化能力鉴定。结果表明：①原代培养24h后,可见较多短梭形及多角形贴壁细胞,3-4d后出现集落样生长,传代培养的PBMSC形态均一、呈长梭形漩涡状生长;②PBMSC增殖能力旺盛,培养2d后进入对数生长期,细胞倍增时间为37．4h;③流式细胞术检测显示,培养的PBMSC高表达CD29,不表达CD14;④PBMSC经成骨诱导培养21d后,茜素红染色显示有明显的钙结节形成;经微团无血清软骨培养体系诱导培养21d后,细胞团切片,阿利新蓝染色呈强阳性反应;经成脂诱导培养21d后,油红染色显示诱导细胞胞浆内有大量脂滴。结论：成功从兔外周血中分离培养了PBMSC,在适宜诱导培养条件下具有向成骨、成软骨、成脂分化的能力。     

液氮冷冻兔股骨头坏死模型制备新方法及可靠性评价

目的 建立一种可靠的并可用于治疗和研究新的液氮冷冻法制成的兔股骨头坏死动物模型。方法 采用成年新西兰大白兔21只,无菌条件下手术分离臀肌,切断股骨头圆韧带,显露股骨头。用医用棉签蘸取液氮,对股骨头进行3次冷冻3次复温,制备兔双侧股骨头坏死模型。于术后3、7d及2、4、6、8周进行X线摄片,股骨头大体形态和组织病理学观察。结果 X线摄片结果显示,制模2周时股骨头密度增高;4周时出现密度不均影像;6周时外形出现不规则变化,边缘有透亮区;8周时开始塌陷,关节间隙增大,骺板模糊。股骨头大体形态随时间推移,其受损程度呈加重演变特点。制模3 d的股骨头组织切片可见软骨细胞和骨细胞坏死;2周见骨小梁断裂、排列紊乱;4周见髓腔脂肪细胞坏死,内有新生血管及增生纤维组织;6周时出现匍行附着;而8周可见新骨沉积性生长,骺板处细胞挤压、变形。结论 本实验中建立的液氮冷冻股骨头坏死模型新方法具有创伤性小、贴近人股骨头坏死病理演变规律的优点,为干细胞移植等治疗和研究提供了一种新的模型制备方法。     

基于人PPARα为靶标的药物筛选细胞模型的建立与应用评价

 目的 构建一种新的、具有生物活性检测能力的人过氧化物酶体增殖物激活受体α（hPPARα）配体药物筛选细胞模型。方法 采用Lipofectamine 2000将含人PPARα基因质粒phPPARα-IRES2-EGFP、含人PPRE报告质粒ptk-PPRE×3-luc及内部对照质粒pRL-CMV共转染293T细胞,并对phPPARα-IRES2-EGFP转染效率进行流式细胞仪（FCM）分析;通过双荧光素酶报告基因法（DLR）检测不同浓度、不同时间阳性药物WY14643干预共转染细胞体系的荧光素酶表达活性;实验还换用RXRα激动剂全反式维甲酸（ATRA）干预,以评价该细胞模型反应的特异性;并用贝特类降脂药苯扎贝特、环丙贝特、氯贝丁酯对建立的药物筛选细胞模型进行应用能力评价。结果 FCM检测共转染293T细胞phPPARα-IRES2-EGFP质粒转染效率为68%;DLR检测WY14643干预该hPPARα药物筛选模型获得了理想的量-效、时-效关系结果,且该模型不能通过RXRα配体激动剂ATRA激活。苯扎贝特、环丙贝特、氯贝丁酯干预模型均呈现良好的量-效反应性,且反应强度存在差异（P<0.05）。结论 成功构建了基于hPPARα为靶标的药物筛选细胞模型,为筛选具有生物活性的hPPARα配体激动剂新药提供了一种可靠的新平台。     

家兔小腿三头肌肌构筑研究

目的　探讨具有亚部结构的家兔小腿三头肌的肌构筑特点。方法　肌构筑测量方法进行定量分析。结果　家兔小腿三头肌均为羽状肌 ,腓肠肌外侧头的生理横切面积 (3.97cm2 )分别是腓肠肌内侧头 (2 .5 9cm2 )和比目鱼肌 (1.4 1cm2 )的 1.5倍和 2 .8倍。外侧头的 3个亚部中 ,外侧亚部的生理横切面积与肌重的比值显著大于其余二个亚部 (P <0 .0 5 ) ;而内侧亚部的肌纤维长与生理横切面积的比值显著高于其余两亚部 (P <0 .0 5 )。在小腿三头肌中 ,腓肠肌内侧头的肌纤维长与生理横切面积的比值 (0 .4 4 )最小 ,比目鱼肌的肌纤维长最短 (0 .85cm)。结论　腓肠肌外侧头进一步存在功能分工 ,外侧亚部以产生力量为主 ;而内侧亚部以发挥速度为主。腓肠肌内侧头属力量型肌 ,主要是维持膝在静力和动力状态下的稳定性。比目鱼肌的功能在兔表现不明显     

SD大鼠膈构筑学及肌内神经分布研究

目的探索大鼠膈构筑学特征和肌内神经分布模式,提供比较解剖学资料。方法成年SD大鼠共30只,不拘雌雄。各取10只大鼠分别用于计格法测量膈表面积、肌构筑法测量膈构筑学指数、改良Sihler’s染色法显示膈肌内神经。结果 1大鼠膈为穹窿形扁肌,总的表面积为（23.20±4.12）cm2,肌性部表面积为（20.75±3.84）cm2,肌重为（1.01±0.34）g,其中胸骨部表面积和肌重分别占整个膈的5.39%和3.06%,肋部相应占67.35%和62.08%,腰部占16.70%和34.87%;2胸骨部肌束长（1.568±0.30）cm,肋部前、中、后肌束长分别为（1.971±0.33）cm,（2.578±0.57 cm）,（1.797±0.33）cm,腰部外侧束和内膈脚肌束长为（1.502±0.36）cm和（2.37±0.35）cm;3一侧膈神经入肌后常分为前内侧、外侧和后3条初级支,分别向前内侧、外侧和后方走行,支配胸部、肋部和腰部。后支在腰部还可分为后外侧支和后脚支支配外侧肌束和内膈脚。结论 SD大鼠具有不同于其它动物的构筑学特征和相似的肌内神经分布模式。     

关节置换术后的护理

通过200余例人工关节置换病人的临床观察,我们发现术后护理对手术的成功及病人的予后影响颇大。下面谈一下人工关节置换术后病人护理的体会。 1.观察人工关节有无脱位人工关节脱位常见于髋关节。由于髋臼浅而平,加之术后肌肉、韧带、关节囊的破坏,故易出现脱位。术后要密切观察,一经发现脱位要及时报告医师,尽快采取复位     

国人儿童示指测量性别与年龄特点

有关示指测量,国外文献报告较多,有认为该测量对肢端肥大症的诊断有一定参考价值。国内尚未见有报道。我们曾于1989年调查龙川县缺碘地区儿童骨发育情况时,选择非缺碘地区的480例正常儿童的手腕X线照片为对照,现将这些照片进行示指测量,以期能建立国人示指的有关数据。     

高强度聚焦超声制备兔股骨头坏死模型的可行性研究

目的:探讨高强度聚焦超声新方法制备兔股骨头坏死模型的可行性。方法:采用JC200型聚焦超声治疗系统,以80 w/cm~2强度超声照射家兔双侧股骨头,分别于照射后1、7、14、21 d取材,结合股骨头大体形态和组织石蜡切片H-E染色观察股骨头坏死情况。结果:股骨头外观7 d时可见界限明显的白色坏死区,表面光泽度稍下降;14 d时坏死区表面软骨变黄、皱缩;21 d时囊化、易剥脱。镜下见1 d时坏死区表面软骨可见少量软骨细胞核溶解,髓质可见小静脉扩张充血、血窦充血;7 d时坏死区表面软骨轻微挤压皱缩,软骨下区见骨小粱断裂和空骨陷窝,髓质造血组织明显减少,骨小梁表面成骨细胞消失,坏死骨小梁附近增生纤维组织,出现脂肪小囊,骺板稍变形;14 d时兔股骨头表面软骨变薄,偶可见破损,坏死软骨细胞增多,表面破损程度、骺板变形程度较7 d时加重,修复区可见增生肉芽组织和新生血管,有纤维组织附着于坏死骨小梁;21 d时,股骨头表面软骨破损严重,骺板进一步扭曲变形,坏死区骨小梁破碎、消失,修复区可见纤维组织包绕坏死骨小梁和新生骨小梁。结论:高强度聚焦超声制备的兔股骨头坏死模型效果稳定,具有清晰的病理演变特征,可作为一种制备股骨头坏死模型的新方法。     

大鼠胸深肌肌纤维型的组成及分布

目的探讨SD大鼠胸深肌的肌纤维型组成和分布,借以了解该肌功能。方法采用Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶组织化学染色法并稍做改良,对成年SD大鼠胸深肌冰冻切片进行肌纤维分型研究。结果大鼠胸深肌经肌球蛋白ATP酶组织化学染色后可明确分出2型肌纤维,即明亮色白的Ⅰ型纤维(慢缩纤维)和幽暗深褐的Ⅱ型纤维(快缩纤维),并且,两种纤维在肌内呈棋盘样均匀分布;图像分析仪下计数Ⅱ型纤维达到65%±6%,而Ⅰ纤维仅占35%±5%,前者明显高于后者(P<0.01)。结论大鼠胸深肌以Ⅱ型纤维为主,属于力量和速度型肌。