全文获取类型
收费全文 | 193篇 |
免费 | 10篇 |
国内免费 | 12篇 |
学科分类
医药卫生 | 215篇 |
出版年
2024年 | 4篇 |
2023年 | 4篇 |
2022年 | 11篇 |
2021年 | 3篇 |
2020年 | 8篇 |
2019年 | 5篇 |
2018年 | 9篇 |
2017年 | 2篇 |
2016年 | 3篇 |
2015年 | 4篇 |
2014年 | 5篇 |
2013年 | 8篇 |
2012年 | 8篇 |
2011年 | 18篇 |
2010年 | 5篇 |
2009年 | 11篇 |
2008年 | 16篇 |
2007年 | 13篇 |
2006年 | 13篇 |
2005年 | 4篇 |
2004年 | 4篇 |
2003年 | 19篇 |
2002年 | 21篇 |
2001年 | 3篇 |
2000年 | 6篇 |
1999年 | 1篇 |
1998年 | 1篇 |
1996年 | 2篇 |
1995年 | 3篇 |
1994年 | 1篇 |
排序方式: 共有215条查询结果,搜索用时 0 毫秒
21.
目的 α2-肾上腺素受体(α2-ARs)是G蛋白偶联受体超家族中成员之一,α2-ARs在人体多种生理活动中发挥着极其重要的作用,介导低血压、镇静、催眠、镇痛、麻醉等多种重要的生理应答和药理学效应,其相关配体在医学治疗领域中具有很大潜力。本研究旨在建立以α2A-AR亚型为作用靶点的高选择性药物筛选平台,为该类药物的活性评价提供新研究方法。方法 对大鼠脑α2A-AR进行基因克隆和CHO真核细胞表达,获得阳性重组单克隆细胞株。(1)阳性重组CHO-K1细胞准备:取冻存阳性重组CHO-K1单克隆细胞株及转染空质粒的细胞株复苏,用筛选培养基培养并传代。(2)cAMP浓度标准工作曲线制备:配制cAMP浓度系列分别为0, 0.195, 0.78, 3.1, 12.5, 50和200 pmol·ml-1(B0~B6),同时设非特异管(NSB)和空白对照管(N),酶联免疫法检测各管A450值,以浓度为0的A450值减去NSB的A450值为B0,其余各浓度A450值减去NSB的A450值为B值,以B/B0(%)作为纵坐标,以标准cAMP浓度的常用对数值为横坐标,列出线性回归方程。(3)重组表达受体与激动剂结合后介导胞内cAMP信号反应检测:将培养的8个重组阳性细胞株与1个重组阴性细胞株按5×108 L-1分别接种至96孔板,每孔100 μl,37℃5%CO2培养过夜;每孔加入肾上腺素8 μmol·L-1作为激动剂,37℃5%CO2培养30 min;去掉细胞培养液并用生理盐水洗涤,加入盐酸0.1 mol·L-1作为细胞溶解液,室温下振摇10~20 min以使细胞充分溶解,将细胞溶解样品转入96孔酶联检测板,进行酶联免疫检测胞内cAMP的含量变化情况。结果 (1)阳性重组CHO-K1细胞复苏后,在筛选培养基中生长状况良好,表明α2A-AR在CHO-K1细胞中稳定表达。(2)cAMP浓度测定标准工作曲线制备:以标准cAMP浓度的常用对数值为横坐标,以B/B0(%)作为纵坐标作图得到一条近似直线,线性回归方程为B/B0(%)=-27.6 lg[cAMP]+89.8,r=-0.9776,P<0.01。(3)重组表达受体与激动剂结合后介导胞内cAMP信号反应检测:8个重组阳性细胞株与1个重组阴性细胞株,在激动剂处理前后,细胞内A450变化情况为:重组阴性细胞株cAMP水平无明显变化;8个重组阳性细胞株cAMP水平变化并不一致,其中,5株重组阳性细胞株cAMP水平未见明显变化;2株重组阳性细胞株cAMP水平下调,加入肾上腺素激动剂后的cAMP含量分别为加入肾上腺素激动剂前的74.7%, 59.6%;1株重组阳性细胞株cAMP水平明显下调,加入肾上腺素激动剂后的cAMP含量为加入肾上腺素激动剂前的1.47%。结论 8个α2A-AR受体重组阳性细胞株对肾上腺素激动剂的信号转导反应存在有较大差异。野生型CHO细胞本身不表达α2A-AR受体,人为导入α2A-AR受体基因,重组受体的信号转导活性存在差异,可能是由诸多不确定因素造成的,诸如:细胞自身的活性状态及质粒进入细胞后的整合状态差异;α2A-AR在不同细胞株的表达水平差异;α2A-AR受体表达过程中的修饰加工差异以及真核细胞其他相对复杂的表达调控环节差异等。 相似文献
22.
23.
目的 总结射频消融治疗(RFA)后甲状腺乳头状癌(PTC)病人再手术的治疗体会。方法 回顾性分析中国医科大学附属第一医院甲状腺外科2014年11月至2015年 1月收治的5例经外院RFA治疗后病理检查证实为PTC病人的临床资料。结果 单发癌3例,多发且双叶癌2例,癌直径0.4~3.0cm,平均1.76 cm。行患侧腺叶+峡部切除+患侧中央区淋巴结清扫术2例,全甲状腺切除+患侧中央区淋巴结清扫术1例,全甲状腺切除+双侧中央区淋巴结清扫1例,全甲状腺切除+双侧中央区淋巴结清扫+右侧改良型侧颈区淋巴结清扫1例。术后石蜡病理检查均证实为PTC。中央区淋巴结转移4例,其中颈侧方淋巴结转移1例。术后暂时性甲状旁腺功能低下1例,无其他并发症。结论 应规范RFA适应证。RFA治疗后诊断为PTC的病人,应积极手术治疗,由于RFA治疗后局部粘连和水肿较明显,手术应由有经验的外科医师来施行。 相似文献
24.
目的 研究曲尼司特(Tran)对环孢素A(CsA)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)向间充质转变的影响,并探讨该药抗纤维化的机制.方法 所有用于实验的HK-2细胞株均为8~12代细胞,分为4组:(1)空白对照组,收获细胞,不做任何处理;(2)CsA组,加入4.2μmol/LCsA;(3)CsA+Tran组,预先加入100μmol/L Tran,作用2 h后再加入4.2 μmol/L CsA;(4)Tran组,仅加入100μmol/L Tran.72 h后于共聚焦显微镜下观察各组细胞形态学变化;用免疫荧光法以及免疫印迹法检测各组钙黏蛋白(E-cadherin)、平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)和骨桥蛋白(OPN)的表达.结果 HK-2细胞在正常情况下表现为典型的"鹅卵石"样形态,细胞圆钝,且与邻近的细胞连接较为紧密;空白对照组和Tran组细胞表现为典型的HK-2细胞形态;CsA组细胞变狭长,甚至向周边伸出"伪足"样改变,细胞间连接较为稀疏;CsA+Tran组的细胞形态学改变有明显改善.CsA组细胞E-cadherin荧光表达强度明显弱于对照组,α-SMA、OPN荧光表达强于对照组;CsA+Tran组细胞E-cadherin荧光表达强于CsA组,α-SMA、OPN荧光表达弱于CsA组.免疫印迹检查中,CsA组细胞E-cadherin 的表达明显低于对照组,而α-SMA、OPN的表达明显高于对照组,CsA+Tran组细胞E-cadherin的表达高于CsA组,而α-SMA、OPN的表达低于CsA组.结论 曲尼司特能抑制CsA诱导的HK-2细胞由肾小管上皮向间充质细胞转化的过程,其机制可能与抑制OPN的表达有关.Abstract: Objective To study the effect of tranilast on cyclosporine A (CsA)-induced epithelial-to-mesenchymal transition in human renal tubular epithelial cells, and investigate the mechanism of its antifibrotic effect. Methods Cultured HK-2 cells were divided into four groups: (1)In the control group, cells were treated without any medicine; (2) The cell were treated with CsA (4. 2μmol/L) for 72 h; (3) The cells were treated with a combination of CsA (4. 2 μmol/L) and tranilast (100μmol/L); (4) The cells were treated with tranilast (100 μmol/L) alone for 72 h.Morphological changes of the cells were assessed by phase-contrast microscopy. The immunofluorescence and Western blotting were adopted to detect the expression of E-cadherin, α-SMA and OPN mRNA and proteins respectively. Results Tranilast could markedly ameliorate the morphological changes of HK-2 cells stimulated by CsA. The irmmunofluorescence staining revealed the expression of E-cadherin was markedly decreased in HK-2 cells stimulated with CsA for 72 as compared with the control group, while the expression of α-SMA and OPN was significantly higher in CsA group than the control group. The expression of E-cadherin in the CsA + Tranilast group was higher than the CsA group, while the expression of α-SMA and OPN in the CsA + Tranilast group was lower than the CsA group. Western blotting showed that protein expression level of E-cadherin in CsA group was dramatically lower than that in the control group (P<0. 05), while that of α-SMA and OPN in CsA group was significantly higher than in the control group (P<0.05). The protein expression level of E-cadherin in HK-2 cells in the CsA + Tranilast group was markedly higher than in the CsA group (P<0.05), and that of α-SMA and OPN in CsA + Tranilast group was significantly lower than in the CsA group (P<0. 05). Conclusion Tranilast can block the CsA-induced epithelialto-mesenchymal transition in HK-2 cells probably by suppressing the expression of OPN. 相似文献
25.
开展医学教育学硕士研究生培养方案的研究工作将有助于培养具有专业知识和能力的医学教育学人才,以进一步促进医学教育学专业化与持续性发展。在教育研究实践中,在人才培养目标的指导下,围绕着学生思想政治素质、科学研究能力、理论实践知识学习应用方面建立了较为完善的理论课程体系;并对研究生培养中的实践课程进行了合理设计,对效果的评价... 相似文献
26.
27.
28.
医学生终身学习能力培养,是提升医学生学习成绩的重要工作,也是医科高校人才培养工作的重要项目。立足医学生入学后在思想观念、价值观念、心理状态和职业认知等方面的新变化,以及医学生终身学习能力培养新要求,建立包括培养理念、学习观念、学习方法和重要途径等要素在内的系统性、应用性医学生终身学习能力培养模式,不仅是提高大学生人才培养质量的重要措施,更是对创新型人才储备、学习型社会建设和区域医学教育均衡发展有重要应用价值。 相似文献
29.
黄连素致荨麻疹样药疹一例 总被引:2,自引:0,他引:2
患者女,50岁、工人,因“全身红斑,风疹块,痒一周”而收住入院,患者十天前因腹泻自行服用黄连素(成都制药八厂生产,批号940802)三片(0.1g/片),三天后自觉全身瘙痒,随即出现大小不等的红斑,风团,伴头晕、头痛、恶心呕吐,上腹不适等症状。曾在厂医务所予地塞米松,扑尔敏等药物治疗。病情 相似文献
30.