2—氯腺苷与潘生丁联合应用对培养的人白血病细胞株的协同抑制作用

研究２－氯腺苷及其与潘生丁联合应用对人白血病细胞株生长的作用。方法：应用体外细胞培养方法，分别检测药物对ＨＬ－６０及Ｋ５６２肿瘤细胞生长曲线，半数抑制浓度，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入及流式细胞分析的影响。结论：２－ＣｌＡ与Ｄｉｐ联合应用对ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞有协同抑制作用。     

一种新二萜类化合物的体外抗肿瘤研究

目的研究一种新二萜类化合物凤厥内酯Ａ（Ｆ－Ａ）的抗肿瘤活性。方法采用体外培养的人癌细胞株——早幼粒细胞白血病ＨＬ－６０和红白细胞白血病Ｋ５６２作对象，观察Ｆ－Ａ对其抑瘤活性、诱导分化、细胞周期的影响。结果Ｆ－Ａ对ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞２４ｈ的半数抑制浓度ＩＣ５０分别为７．６ｍｇｇ－１和９．１ｍｇｇ－１，在４ｍｇＬ－１时即明显抑制ＨＬ－６０细胞的对数生长；对３Ｈ－ＴｄＲ参入作用在培养４８ｈ后有一定抑制作用；透视电镜显示肿瘤细胞有损伤表现；细胞周期分析显示Ｇ２＋Ｍ期细胞增多；ＮＢＴ还原反应试验阴性。结论Ｆ－Ａ明显抑制ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞生长，抗肿瘤活性强，对细胞周期的影响提示Ｍ期阻滞，研究初步提示Ｆ－Ａ不具细胞诱导分化作用。     

大黄素对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞的影响

目的　观察大黄素(emodin)对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化作用特点及量效关系,并观察大黄素对骨保护蛋白(Osteoprotegerin,OPG)mRNA表达的影响。方法　在新生大鼠颅骨成骨细胞体系中加入不同浓度的大黄素,加药后 1、2、3d用MTT法检测细胞增殖, 3、5、7、9d用PNPP法检测细胞内碱性磷酸酶含量,加药后 7d检测细胞内OPGmRNA表达的量, 24d检测细胞上清中钙和细胞内羟脯氨酸含量。结果　大黄素能促进大鼠颅骨成骨细胞ALP活性,实验中最佳作用浓度为 1×10-6 mol·L-1,最佳作用时间是 7d。大黄素能增加细胞内羟脯氨酸含量,促进OPGmRNA的表达。结论　大黄素可促进成骨细胞分化,增加OPGmRNA的表达。     

大黄素对大鼠体外颅骨成骨细胞的影响

目的观察大黄素对体外大鼠颅骨成骨细胞细胞周期、骨钙素含量、骨结节数目和面积、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法在成骨细胞体系中加入不同浓度的大黄素,应用流式细胞术、放射免疫测定法、茜素红染色法及RTPCR的方法观察大黄素对大鼠颅骨成骨细胞的增殖、骨钙素含量、骨结节数目和面积、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。结果大黄素可刺激成骨细胞分泌骨钙素。低浓度的大黄素可上调Ⅰ型胶原基因的表达,高浓度时则降低Ⅰ型胶原的基因表达。结论大黄素可以刺激成骨细胞分泌骨钙素和增加Ⅰ型胶原mRNA的表达。     

去卵巢大鼠椎骨组织形态计量学、生物力学特点及相关性研究

采用骨组织形态计量学、骨生物力学和骨矿含量测定等方法研究 10 .5月龄至 16月龄 SD大鼠和双侧卵巢去除术后椎骨的骨质量变化以及它们之间的相关关系。雌性 SD大鼠随机分为 6组 :(1) 10 .5月龄基础组 ;(2 )13月龄假手术组 (sham - 1) ;(3) 13月龄去卵巢组 (OVX- 2 ) ;(4) 16月龄假手术组 (sham - 2 ) ;(5 ) 16月龄去卵巢组(OVX- 2 )和 (6 )雌激素治疗组 :去卵巢 10周后给予雌激素治疗 12周 (OVX- 2 +EE)。所有大鼠在处死前 14、13d和4、3d分别皮下注射四环素和钙黄绿素作体内荧光标记。实验终止时取大鼠第 4腰椎行骨组织形态计量学测量 ,第5腰椎体作试件压缩试验 ,试验后的椎体进行骨矿物元素测定。结果发现 10 .5月龄至 16月龄大鼠椎体骨干重、冠状径、骨小梁面积骨小梁厚度有增加趋势 ,骨的破坏荷载 ,破坏应力和弹性模量也有增加趋势 ,以 13月龄为高峰值。去卵巢 10周后 ,上述指标明显下降 ,2 2周后 ,下降更明显。雌激素治疗后上述指标明显改善。相关研究表明 ,骨小梁面积与骨的破坏应力呈正相关 (P<0 .0 5 ) ,而骨的破坏应力又与骨矿 (主要成分 Ca)含量呈正相关 (P<0 .0 1)。去卵巢后 ,骨小梁面积的下降比骨破坏应力的下降更明显 ,出现的时间更早。本研究表明 ,骨组织形态计量学检测和骨生物力学检     

D-半乳糖对不同性别大鼠骨形态计量学的影响

目的　探讨D 半乳糖对大鼠骨形态计量学的影响。方法　 3月龄SD大鼠 4 2只♀♂各半 ,按体重随机分成 5组 ,对照、去势和D 半乳糖低 (5 0mg·kg-1·d-1)、中 (10 0mg·kg-1·d-1)、高 (2 0 0mg·kg-1·d-1)剂量 5个组 ,前两组分别皮下注射生理盐水、后三组分别皮下注射三个不同浓度的D 半乳糖。两个月后心脏取血处死老鼠 ,取出左侧股骨和胫骨 ,胫骨脱水塑料包埋切片 ,用骨形态计量学方法测量骨的静态参数和动态参数 ,股骨称其干重。处死大鼠前用双荧光标记法标记。同时取出卵巢和睾丸制作软组织石蜡切片 ,在显微镜下观察。结果　D 半乳糖对♀大鼠骨没有明显影响 ,但可使♂大鼠骨明显丢失 ,呈现骨质疏松的形态学表现。♂大鼠三个剂量组中 ,与骨量有关的静态参数骨小梁百分率 (%Tb .Ar)分别下降 5 3 5 %、5 3 5 %、4 6 6 % ,骨小梁数目 (Tb .N)分别降低 4 2 9%、4 7 6 %、38 1% ,骨分离度 (TB .Sp)分别升高85 %、15 0 %、6 7 3%。与骨形成有关的动态参数骨骨形成标记百分率 (%L .Pm)分别下降 2 4 1%、5 3 5 %、4 6 6 %。卵巢组织切片未见明显变化 ,睾丸组织曲细精管排列紊乱 ,管腔增大 ,有的甚至基膜溶解。结论　D 半乳糖对大鼠骨形态学的影响有性别差异 ,对♀大鼠没有影响 ,可致♂大鼠骨质疏松 ,可能?     

骨髓间充质干细胞成脂和成骨分化过程中Wnt信号通路的调控效应

背景:骨髓间充质干细胞的成脂肪分化与成骨分化比例的失衡与许多骨疾病密切相关,而近些年发现Wnt信号通路在调控骨髓间充质干细胞的分化方向中起重要作用.目的:通过Wnt信号通路PCR基因芯片观察大鼠骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞和成骨细胞后相关基因表达的变化,寻找Wnt信号通路中调控骨髓间充质干细胞分化的靶基因.方法:采用大鼠第3代骨髓间充质干细胞分别进行成骨诱导和成脂诱导,7 d后用Trizol萃取培养瓶中的细胞总RNA,倒置显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态特征及成骨诱导后和成脂诱导后细胞形态特征.采用Wnt信号通路PCR芯片(大鼠)进行摹因芯片检测,以未诱导组为对照,计算成脂肪诱导,成骨诱导后相关基因上调/下调的比值.结果与结论:①倒置显微镜下观察,传3代后可获得均一性较高的骨髓间充质干细胞,骨髓间充质干细胞经成骨诱导后向成骨细胞方向分化,经成脂诱导后向脂肪细胞方向分化.②与未诱导组相比,骨髓间充质干细胞成脂诱导后Wnt信号通路表达上调的基因(Dkk-1,kremen,FZD1,FZD7)等15个(ratio＞2),下调的基因(sFrp 5,β-catenin,Dvl3,Tcf7)等16个(ratio＜0.5).成骨诱导后,Wnt信号通路表达上调的基因(Dkk1,kmmen,β-catenin,Wnt11)6个,表达下调的基因(sFrp5,sFRP4,Fzd1)等15个.提示WnI信号通路在骨髓间克质干细胞成脂细胞分化和成骨细胞分化中发挥重要作用.     

仙珍骨宝抗泼尼松致大鼠松质骨结构破坏的作用

目的观察仙珍骨宝对糖皮质激素引起松质骨结构破坏的防治作用。方法选用3月龄SD雄性大鼠24只,随机分为对照组、激素组和治疗组。激素组用泼尼松4.5mg/kg灌胃,每周2次。治疗组给予100%仙珍骨宝5ml/kg,每周6次,持续90d。用骨组织形态计量学方法测算胫骨近端骨小梁的静态指标,并在扫描电镜下观察大鼠腰椎松质骨结构的改变。结果与正常组比较,激素组的大鼠胫骨的骨小梁的面积减少72.43%,骨小梁数目减少74.09%。腰椎的骨小梁变少,变细,断裂,连接不紧密,表面常见骨吸收形成的陷窝。治疗组大鼠胫骨骨小梁的面积比激素组增加179.70%,骨小梁数目增多187.60%。腰椎的骨小梁较粗大,排列整齐,连接紧密。结论仙珍骨宝能有效防止糖皮质激素所引起的松质骨三维结构的损害,保持骨的正常力学强度,避免骨折。     

丹参抑制泼尼松大鼠骨质丢失

目的:探讨长期超生理剂量应用泼尼松对大鼠所致的骨质疏松症特点,同时观察中药丹参对其防治作用。方法:24只♂SD大鼠随机分成正常对照组,泼尼松组和丹参组,每组8只。正常对照组给予生理盐水处理,其他组先予泼尼松按2.7 mg/kg ig,随后泼尼松组灌喂生理盐水,丹参治疗组按5.0 g/kg灌喂丹参水提液。每日1次,连续12周。实验结束后用骨组织形态计量学等方法测量股骨的动态参数和静态参数,同时测量尺骨的羟脯胺酸和钙磷含量以及测量股骨的长度和宽度。结果:泼尼松大鼠骨量显著丢失及骨生长受到抑制(P<0.01),而丹参治疗组可明显对抗泼尼松对骨的生长抑制作用。结论:4月龄SD大鼠服用泼尼松12周后可造成骨质疏松症,丹参对其有较好的对抗作用。     

淫羊藿对肾阳虚雄性大鼠股骨骨形态发生蛋白-7表达的实验研究

目的 观察淫羊藿对醋酸泼尼松所致的肾阳虚雄性SD大鼠股骨骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达的影响.方法 3月龄雄性SD大鼠24只,随机分为正常组、肾阳虚模型组、淫羊藿组,灌胃给药90 d后,RT-PCR检测股骨BMP-7 mRNA的表达,免疫组化检测股骨BMP-7的表达.结果 醋酸泼尼松致肾阳虚大鼠股骨BMP-7 mRNA和BMP-7的表达明显下降(P＜0.05),淫羊藿能在mRNA水平(P＜0.05)和蛋白水平上提高股骨BMP-7的表达.结论 淫羊藿可提高股骨中BMP-7的表达来诱导成骨,修复骨损伤.