不同尿酸浓度对人骨髓间充质干细胞成神经分化的影响

背景：尿酸作为一种内源性的抗氧化剂,其抗氧化、抗 DNA 损害作用及发挥神经元保护作用近年受到关注。 目的：观察不同浓度尿酸对骨髓间充质干细胞成神经分化的影响。方法：体外分离、纯化、培养骨髓间充质干细胞,观察细胞形态,取扩增3代的骨髓间充质干细胞,分别用含0（对照组）、0.2,0.4,0.8 mmol/L浓度尿酸的预诱导液诱导24 h,再用含0（对照组）、0.2,0.4,0.8 mmol/L浓度尿酸的诱导液诱导1 h后行尼氏体染色,2 h后,用免疫组织化学法检测细胞内巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶的表达。 结果与结论：骨髓间充质干细胞经诱导后,细胞胞体收缩,形成突起并形成连接。细胞胞质中存在蓝色颗粒状的尼氏体,含不同浓度尿酸的诱导组神经元特异性烯醇化酶阳性率均较对照组明显升高（P ＜0.05）,而且随着尿酸浓度增加,神经元特异性烯醇化酶阳性表达率逐渐增加（P ＜0.05）。含不同浓度尿酸的诱导组巢蛋白阳性表达率较对照组降低（P＜0.05）,诱导4 h后,细胞脱落明显。在体外一定时间内,尿酸能够促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化,且具有一定的浓度依赖性。     

尿酸下调人骨髓间充质干细胞体外诱导为成骨细胞过程中11β-HSD1的表达

目的探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)向成骨细胞分化过程中,尿酸对其成骨能力以及对11β-羟化类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)表达及功能的影响。方法全骨髓体外分离培养健康成年人骨髓间充质干细胞,用细胞形态学及细胞表面标志物对其进行鉴定,培养hBMSCs至第3代后分别以完全培养基(含体积分数10%FBS、1%双抗、89%低糖DMEM)为空白对照组、以成骨培养基(含10-8mol/L地塞米松、50mg/L维生素C、10-2mol/Lβ-甘油磷酸钠的完全培养基)和尿酸干预成骨培养基(分别含0.2、0.4、0.8mmol/L尿酸的成骨培养基)为条件对照组进行培养和诱导。培养诱导14d后,倒置显微镜下观察细胞形态,用碱性磷酸酶染色和茜素红染色进行成骨细胞鉴定,用11β-HSD1免疫细胞化学染色、RT-PCR技术检测各组11β-HSD1 mRNA的表达。结果分离培养的细胞表面标志物CD44表达阳性,CD34表达阴性。成骨培养基和各尿酸干预成骨培养基诱导的细胞碱性磷酸酶染色和茜素红染色均为阳性,钙结节数量随尿酸浓度增高逐渐增多(P0.05)。免疫细胞化学染色结果显示各组细胞胞质均可见棕黄色阳性染色颗粒.病理图象分析软件测定11β-HSD1含量结果显示随尿酸浓度增高,成骨能力增加,光密度值逐渐减少(P0.05)。RT-PCR结果显示各组细胞均有11β-HSD1 mRNA表达,随尿酸浓度增高和成骨能力的增加,11β-HSD1 mRNA表达逐渐减少(P0.05)。结论尿酸能促进hBMSCs向成骨细胞增生和分化,具有浓度依赖性和时间依赖性,尿酸通过下调11β-HSD1 mRNA的表达促进hBMSCs向成骨细胞分化。     

互联网+背景下社区居家医养结合养老服务模式的发展

目前我国传统养老模式的服务范围仅限于一般的家庭照料和服务,难以满足老年人多样化的养老服务需求,因此本文在探讨现行社区居家医养结合模式存在的不足之处的基础上,分析如何利用互联网+构建社区居家医养结合养老服务模式,从互联网+的角度科学地整合医疗资源和养老资源,同时结合国内人口老龄化现状及发展趋势,为进一步建立和完善互联网+社区居家医养结合养老服务模式提出相关建议和措施,供参考。     

单中心儿童肺高血压病因组成和住院转归分析

目的　观察分析单中心儿童肺高血压（PH）病因组成和不同类型PH患儿住院转归及影响因素。方法　选取2016年1月至2018年12月在湖南省儿童医院确诊并接受治疗的PH患儿共1157例，根据患儿病历资料及出院诊断，对其PH病因按照2015年发布的《儿童肺动脉高压诊断与治疗专家共识》进行分类。收集并记录其住院期间相关临床资料。结果　本研究中肺动脉高压（PAH）患儿共1099例（94.9%），以先天性心脏病相关性PAH（APAH-CHD）、新生儿持续肺动脉高压（PPHN）为主，分别占84.7%、8.0%。特发性PAH死亡3例，放弃治疗6例，手术1例，余5例好转出院。APAH-CHD中以手术后出院676例（68.9%）。要求出院45例（4.6%），其中放弃治疗出院及死亡80例（8.2%）；服用波生坦共52例，有2例联用西地那非。PPHN患儿因其他器官手术后出院6例（6.5%），好转出院66例（70.9%），放弃出院及死亡14例（15.1%）。左心疾病所致PH好转18例，行左心疾病矫治手术11例（40.7%），放弃及死亡病例7例（25.9%）。呼吸系统疾病PH 27例，1例死亡，3例放弃治疗。未知因素所致PH 2例放弃出院，死亡1例，1例行姑息手术出院。结论　儿童PH分类以APAH-CHD及PPHN为主，特发性PAH、左心疾病相关PH的患儿预后差。     

Effect of different concentrations of uric acid on the neural differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells

背景：尿酸作为一种内源性的抗氧化剂,其抗氧化、抗DNA损害作用及发挥神经元保护作用近年受到关注。目的：观察不同浓度尿酸对骨髓间充质干细胞成神经分化的影响。方法：体外分离、纯化、培养骨髓间充质干细胞,观察细胞形态,取扩增3代的骨髓间充质干细胞,分别用含0(对照组)、0.2,0.4,0.8 mmol/L浓度尿酸的预诱导液诱导24 h,再用含0(对照组)、0.2,0.4,0.8 mmol/L浓度尿酸的诱导液诱导1 h后行尼氏体染色,2 h后,用免疫组织化学法检测细胞内巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶的表达。结果与结论：骨髓间充质干细胞经诱导后,细胞胞体收缩,形成突起并形成连接。细胞胞质中存在蓝色颗粒状的尼氏体,含不同浓度尿酸的诱导组神经元特异性烯醇化酶阳性率均较对照组明显升高(P < 0.05),而且随着尿酸浓度增加,神经元特异性烯醇化酶阳性表达率逐渐增加(P < 0.05)。含不同浓度尿酸的诱导组巢蛋白阳性表达率较对照组降低(P < 0.05),诱导4 h后,细胞脱落明显。在体外一定时间内,尿酸能够促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化,且具有一定的浓度依赖性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

肉苁蓉主要活性成分松果菊苷在甲醇中转化路径的阐明

松果菊苷(ECH)为中药肉苁蓉的主要活性成分之一,亦为苁蓉总苷胶囊抗血管性痴呆的药效成分。以该化合物为原料药制成的脑清智明片也于日前获得了临床批文。然而,对于该化合物的稳定性研究尚较为薄弱,一定程度上影响了其临床研究和进一步开发。该研究中,笔者首先通过HPLC-DAD检识发现ECH在甲醇中易转化成2个主要产物(P1和P2),进一步通过引入2个2位/6通电子切换阀构建流份自动接收装置,制备产物,并结合1H-NMR和LC-MS/MS分析,准确鉴定产物结构分别为毛蕊花糖苷(P1)和肉苁蓉苷A(P2)。深入分析松果菊苷、毛蕊花糖苷和肉苁蓉苷A的1H-NMR谱图发现三者均能产生对应的顺式异构体(顺式松果菊苷、顺式毛蕊花糖苷和顺式肉苁蓉苷A)。因此,ECH在甲醇中的转化途径主要包括糖苷键水解、甲基化和顺式/反式异构化。该文的结果将为中药肉苁蓉的深入开发和脑清智明片的杂质检测提供准确的信息。同时,该研究建立的流份自动接收装置将为微量杂质的自动化制备及半制备液相目标信号自动化收集提供简单易行的方案。     

胆类中药体内代谢产物甘氨胆酸硫酸盐同分异构体的区分

目的 通过在线能量分辨质谱法（Online ER-MS）快速区分胆类中药在体内的代谢产物甘氨胆酸硫酸盐同分异构体。方法 采用高效液相色谱-质谱法（HPLC-MS）采集3个甘氨胆酸硫酸盐异构体甘氨熊去氧胆酸-3-磺酸盐（GUDCA-3-S）、甘氨鹅去氧胆酸-3-磺酸盐（GCDCA-3-S）、甘氨去氧胆酸-3-磺酸盐（GDCA-3-S）的高分辨多级质谱信息,推导质谱裂解途径并归属各碎片离子,构建候选离子对m/z 528.3→528.3、528.3→448.3、528.3→404.3、528.3→386.3、528.3→330.2、528.3→97.0和528.3→74.0,每个候选离子对进一步衍生1组拟离子对（PITs）,对应1组在–5～–180 eV梯度变化（步长为1 eV）的碰撞能;通过Online ER-MS采集所有拟离子对质谱响应,采用高斯曲线拟合每一组拟离子对的响应值,构建裂解曲线组,进而在同分异构体间比较同一离子对的裂解曲线。结果 3个同分异构体的MS¹和MS²基本一致,难以区分。各组拟离子对的响应值均呈现高斯分布。同一化合物的不同候选离子对呈现出不同的裂解曲线,同分异构体的相同离子对的裂解曲线也存在差异。结论 利用Online ER-MS可以实现甘氨胆酸硫酸盐同分异构体的快速、有效区分,为胆类中药体内药效物质和作用机制的阐明提供参考。     

25例先心病合并心肌致密化不全患儿的围手术期护理体会

本文对25例先心病合并心肌致密化不全患儿的围手术期护理进行总结.主要护理要点有童趣化术前护理干预、麻醉前评估、母亲声音陪伴麻醉复苏、呼吸道管理、并发症观察、营养管理、患儿及家属心理疏导、出院指导、随访.经科学、系统地管理,25例患儿术中及术后未发生并发症,均顺利康复出院.