甲基汞对发光菌的毒性及锌的拮抗作用

目的：研究甲基汞（MeHg）对明亮发光杆菌的毒性作用及锌（Zn）对MeHg毒性的拮抗作用。 方法：采用发光菌毒性试验法检测MeHg、Zn对发光杆菌的相对发光率的影响。结果：MeHg、Zn单独作用时半数致死浓度（EC₅₀）分别为为0.00248和0.28 mg•L^-1。随着MeHg剂量加大,发光菌相对发光率均降低,并呈剂量依赖性。MeHg、Zn联合作用15和30 min后,呈拮抗作用。 结论：Zn可以抑制MeHg对发光杆菌发光率的影响,拮抗甲基汞的毒性。     

参茸龟芪口服液的毒理学安全性评价

目的：了解参茸龟芪口服液的安全性。方法：小鼠急性经口毒性试验;Ames试验;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验;雄性小鼠精子畸形试验和大鼠30d喂养试验。结果：该口服液急性经口毒性为无毒,3项遗传毒性试验均为阴性结果,30d喂养实验中也无异常发现。结论：参茸龟芪口服液安全无毒。     

ZnMT对甲基汞致小鼠肝细胞DNA损伤的拮抗研究

目的 研究锌金属硫蛋白（ZnMT)对甲基汞致小鼠肝细胞DNA损伤的影响。方法 采用单细胞凝胶电脉（single cell gel electrophoresis,SCGE)技术检测锌诱导机体产生ZnMT及体外给予纯品ZnMT对甲基汞致小鼠肝细胞DNA损伤的影响。结果 体内给予小鼠5mg/kg的锌剂及在培养基中加入终浓度为0.01umol/L的纯品ZnMT均可以减轻甲基汞对小鼠细胞DNA损伤程度,且损伤程度越轻,拮抗作用越明显。结论 ZnMT可以拮抗甲基汞引起小鼠肝细胞DNA的损伤。     

环状RNA在泌尿系恶性肿瘤中的研究进展

环状RNA(circularRNA, circRNA)代表一大类存在于广泛的真核细胞质中的非编码RNA,作为miRNA的分子海绵来调控基因的转录过程。尽管circRNA在泌尿系疾病中的研究还处于初步阶段,但近来研究表明其在泌尿系肿瘤的发生、发展和治疗中发挥着重要作用,有望成为潜在的新型分子标志物和分子靶向治疗的靶点。     

Smac联合顺铂对人肝癌细胞凋亡调控因子影响

目的研究第二线粒体源的半胱天冬酶激活物(Smac)基因联合顺铂对人肝癌细胞SMMC-7721中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-9和细胞色素c(Cyt c)蛋白表达的影响。方法利用脂质体介导的方法将Smac转染入SMMC-7721,G418筛选后采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(western blot)法检测筛选所得SMMC-7721/Smac细胞中Smac mRNA和蛋白的表达,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线;顺铂处理后采用免疫细胞化学法检测细胞中caspase-3、caspase-9和Cyt c蛋白的表达。结果SMMC-7721/Smac细胞中Smac mRNA和蛋白表达均明显增加,12～120 h A₄₉₀值为0.28～0.70,均明显低于同一时间点的SMMC-7721(0.31～1.10)(P<0.05);与SMMC-7721比较,SMMC-7721/Smac细胞中caspase-3和Cyt c蛋白表达均增高,累积光密度值(IOD)分别从19 939/14 924增至28 347/21 017(P<0.05);顺铂作用下,SMMC-7721和SMMC-7721/Smac细胞中caspase-3、caspase-9和Cyt c蛋白表达均增加,且后者更明显;剂量为25μg/mL时,SMMC-7721/Smac的caspase-3、caspase-9的IOD分别从对照的28 347/22 412增至46 696/39 728(P<0.001)。结论Smac稳定过表达联合顺铂可明显增强细胞中凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9和Cyt c表达,从而促进细胞凋亡。     

竹节参HPLC-ELSD指纹图谱和化学成分分析

目的:建立竹节参药材HPLC-ELSD液相指纹图谱,分离纯化鉴定其主要特征峰的单体化合物,客观评价竹节参内在质量差异。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD),梯度洗脱,测定了10批竹节参样品。色谱条件为YMC-pack ODS-AQ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈(A)-0.5%乙酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,20%~40%A;5~20 min,40%~40%A),流速为1.0 mL.min-1,柱温30℃。ELSD检测器:漂移管温度为40℃,氮气释放压力为33 Psi。通过采用反复硅胶柱色谱和半制备HPLC的方法分离纯化竹节参的化学成分,并根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果:建立了10批竹节参样品HPLC-ELSD指纹图谱,分离纯化鉴定了5个主要化学成分,分别为人参皂苷Re,竹节参皂苷Ⅳ,Ⅳa,Ⅴ,Pjs-2。结论:综合竹节参指纹图谱和化学成分分析,能较全面的表征不同产地竹节参内在成分的差异,为竹节参内在质量评价提供依据。     

大叶白麻叶多糖提取及组分分析

目的:从大叶白麻中提取多糖,测定多糖含量并分析其单糖组成.方法:采用热水法提取大叶白麻叶多糖,乙醇沉淀,Sevage法脱蛋白,活性碳脱色,采用蒽酮-硫酸比色法620 nm处测定多糖含量,高效毛细管电泳分析其单糖组分.结果:经蒽酮-硫酸比色法测定大叶白麻叶中多糖含量为叶重的0.97%;经高效毛细管电泳分析发现,大叶白麻含至少有9种单糖,其中含量较多的为半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖.结论:本法分离大叶白麻叶多糖在HPCE上易实现9个单糖基线分离具有灵敏度高的特点.单糖种类丰富,具有较高的研究和开发价值.     

甲基汞、电离辐射对小鼠胸腺DNA合成及适应性反应的影响

为了解环境理化因子作用对机体产生的生物效应,采用³HTdR掺入法研究了甲基汞和不同剂量的电离辐射对小鼠胸腺DNA合成及适应性反应的影响。结果表明:甲基汞可以抑制胸腺细胞DNA合成;低剂量的电离辐射(0.075Gy)对胸腺DNA合成具有一定刺激作用,³HTdR掺入量明显高于对照组;而高剂量的电离辐射(2Gy)对胸腺细胞DNA合成有抑制作用;经低剂量电离辐射预处理后再进行甲基汞染毒时比单独用甲基汞染毒组的损伤减轻,³HTdR掺入量增加;先给予高剂量电离辐射再进行甲基汞染毒比单独用甲基汞染毒组胸腺细胞³HTdR掺入量明显下降。提示低剂量电离辐射可以产生兴奋刺激作用,对DNA损伤产生保护作用。其机理有待于进一步研究。     

不同工艺提取的竹节参皂苷粗提物毒性及其抗炎作用初步研究

目的比较不同工艺提取的竹节参皂苷粗提物的毒性及抗炎效果。方法采用不同工艺分别制备竹节参皂苷粗提物样品1、样品2、样品3、样品4、样品5、样品6,然后用不同工艺、不同浓度的样品处理RAW264.7细胞,显微镜下观察细胞形态,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,一氧化氮(NO)试剂盒检测RAW264.7细胞NO释放量。结果不同样品作用于RAW264.7细胞毒性从小到大依次为:样品4样品6样品5样品2样品1样品3。不同样品对脂多糖刺激的RAW264.7细胞NO释放抑制效果依次为:样品4样品5样品2样品6样品1样品3。结论 6种不同提取工艺得到的竹节参皂苷粗提物中,泡沫分离法提取的竹节参皂苷粗提物毒性最小,抗炎效果最好。     

人CD20胞外区与噬菌体pⅢ融合基因在E．coil中的可溶性表达

目的：克隆人CD20胞外区基因(cdw)和丝状噬茵体(M13KD7)G3蛋白N端结构域(pⅢN1)基因，并在大肠杆菌中进行高效融合表达。方法：利用逆转录PCR和PCR方法分别克隆CD20胞外区基因和pⅢN1基因，然后将二者融合克隆入pTIG-Trx表达载体，在大肠杆菌中进行可溶性表达。结果：可溶性表达产物占细菌可溶性蛋白的约25％，表达产物可被抗CD20分子的单克隆抗体识别。结论：成功地表达并鉴定了人CD20胞外区蛋白，为利用噬菌体抗体库进行抗CD20抗体的筛选奠定了基础。