氘代替代物结合UPLC-MS/MS同步检测去卵巢大鼠血浆中22种内源性大麻素

该文旨在建立一种超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同步检测去卵巢大鼠血浆中22种内源性大麻素类物质的新方法。首先血浆样品经固相小柱(SPE柱)萃取,然后利用UPLC-MS/MS进行检测。采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以0.1%乙酸溶液为流动相A,乙腈-异丙醇(9∶1)溶液为流动相B,进行梯度洗脱,采用正离子多反应离子监测模式,以氘代试剂作为对照品的替代物计算回收率,同步定量22种内源性大麻素。其中,22种内源性大麻素类物质的线性相关系数均大于0.99,定量限(LOQs)为0.089 6~1.965 2 nmol·L~(-1);5个氘代替代物的相对回收率为11.40%~129.9%;重复性考察结果显示,RSD均小于8.0%。所建立的方法,可以用于去卵巢大鼠血浆样品中PGF2αEA,AEA等多种内源性大麻素类物质的定性与定量分析,验证了该方法的可行性及实用性。总之,该方法灵敏度高、重复性好、实用性强,可以用于大鼠血浆样品脂质代谢组学研究。     

超高效液相色谱串联质谱法测定中药何首乌中10种真菌毒素的含量

目的:建立超高效液相色谱串联-质谱同时测定何首乌中10种真菌毒素的方法.方法:样品经70％甲醇提取,再经亲水亲脂平衡(HLB)柱净化处理后进样分析.样品采用Welch Ultimate XB C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.5μm)进行分离,流动相为甲醇(A)-0.1％甲酸(含5 mmol/L乙酸铵)(B...     

硫磺熏蒸对亳菊化学成分的影响

该实验采用HPLC-ESI-MSⁿ对硫磺熏蒸与晒干的亳菊进行定性比较,共指认了32个化合物。同时,采用HPLC技术对绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、木犀草素、芹菜素、香叶木素及金合欢素7个化合物进行定量比较,研究结果发现硫熏前后亳菊在化学组成上无较大差别,但是在含量上存在显著差异,硫熏后,黄酮苷类及奎宁酸类成分的含量降低,而黄酮苷元的含量升高;进一步对硫熏与晒干亳菊进行主成分分析(PCA)及偏小二乘聚类判别模式分析(PLS-DA),PCA分析结果显示,6批亳菊样品聚成2组,分别为晒干组和硫熏组;通过PLS-DA分析提取出对硫熏前后亳菊分组贡献率大于1(VIP> 1)的3个成分,分别为芹菜素、木犀草素和异绿原酸A。该实验结果表明硫熏对亳菊化学成分具有显著影响。     

HPLC同时测定山豆根中7种生物碱及3种黄酮的含量

建立HPLC同时测定山豆根中7种生物碱(金雀花碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、N-甲基金雀花碱、槐醇、苦参碱和槐果碱)及3种黄酮(三叶豆紫檀苷、芒柄花素和马卡因)含量的方法。采用Welch XtimateTMC18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.01 mol·L-1醋酸铵(氨水调p H 8.0)溶液(B)进行梯度洗脱:0~20 min,4%~14%A;20~30 min,14%~25%A;30~45 min,25%~40%A;45~65 min,40%~55%A;65~75 min,55%A;流速1.0 m L·min-1,柱温30℃,检测波长225 nm。方法学验证结果显示,10种成分的分离度良好,且在各自浓度范围内呈现出良好的线性关系,r≥0.999 7,平均回收率在98.60%~102.6%,RSD为0.60%~3.7%(n=6),该方法简便、准确,重复性良好。含量测定结果显示,7种生物碱和3种黄酮成分在不同样品中的含量具有显著性差异。由此表明,不同批次的山豆根药材,其内在质量存在较大差异。该法可用于山豆根药材的多成分同步测定,同时可以为山豆根的全面质量评价和质量控制提供科学依据。     

近10年中药外用制剂质量标准研究进展

中药外用剂制是指不经口服、注射给药 ,直接用于皮肤、粘膜或腔道的中药制剂。随着现代技术的不断发展 ,中药外用制剂发挥着越来越大的作用 ,其质量标准研究也随之增多 ,其中测定制剂中有效成分的含量是控制其质量的重要手段。《中国药典》1 985年版收载中药外用制剂 2 9种 ,1 990版收载 3 1种 ,1 995年版则收载 3 9种 ,其中 5种制剂列有含量测定方法。 2 0 0 0版收载外用中药制剂 43种[2 ] ,其中有薄层色谱鉴别的 2 2个制剂 ,有含量测定的 9种制剂。本文总结了自 1 988年以来我国中药外用制剂质量标准研究进展情况。1　中药外用制剂的定性研究定性就是利用某种方法手段来鉴别中药成分 ,以控制成药的质量。它主要包括性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别等。本文主要介绍理化鉴别。主要方法有 :一般化学反应鉴别、薄层色谱法、气相色谱法、分光光度法。除此之外 ,应用薄层扫描法 ,液相色谱法对中药制剂进行鉴别也有报道。本文收集的定性鉴别方面的文献以薄层色谱法居多 ,它不仅快速、准确 ,而且价格便宜 ,故多被采用 (见表 1 )。另外 ,还有利用薄层扫描、紫外分光光度法、气相色谱法等进行定性鉴别。表 1...     

三黄喷雾剂中黄芩、栀子提取物的大孔吸附树脂纯化工艺

目的:研究大孔吸附树脂纯化三黄喷雾剂中黄芩的工艺条件。方法:采用HPLC测定黄芩苷含量,以黄芩苷的吸附率、解吸率为考察指标,优选大孔吸附树脂最佳纯化工艺条件。结果:最佳大孔吸附树脂型号为SP-825;上样液浓度为0.2 g·mL-1,径高比为1∶7,最大上样量为2 BV,洗脱剂为70%乙醇,洗脱流速为3 BV·h-1,洗脱剂用量为6 BV。结论:SP-825型大孔吸附树脂纯化黄芩、栀子提取物的最佳工艺稳定、可行。     

基于可靠HPLC定量方法的β-烟酰胺单核苷酸降解动力学研究

为探讨β-烟酰胺单核苷酸(β-nicotinamide mononucleotide,NMN)的稳定性特征,为NMN的生产制备和相关产品研发提供数据支撑,该研究建立简单基质下NMN的HPLC含量测定方法,探讨NMN在不同化学、物理学和生物学条件下的降解行为、降解产物和降解动力学特征。HPLC方法的色谱柱为Welch Xtimate AQ-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长266 nm,柱温30℃,流速1.0 mL·min^-1,进样量5μL,流动相甲醇(A)-10 mmol·L^-1甲酸铵水溶液(B),梯度洗脱(0~6.7 min,0~4%A;6.7~13 min,4%~18%A;13~14.2 min,18%A;14.2~15 min,18%~0 A;15~22 min,0 A)。该方法下NMN与潜在杂质和降解产物分离度良好,线性范围广,分析时间短,耐用性好,准确度高,平均加样回收率为98.71%(RSD 1.2%),仪器精密度良好(RSD 0.26%),在考察范围内的线性良好(R²≥0.9999),可以应用于简单基质下NMN的含量测定。NMN水溶液降解过程符合表观一级反应,降解速率主要受高温和pH影响,在低温、中性或弱酸弱碱环境较为稳定;强酸、强碱可加速其降解,降解速率受胃蛋白酶和胰蛋白酶影响小。在室温水溶液中符合动力学方程lg C_t=0.0057t+4.8172,t_0.9和t_1/2分别为95.58、860.26 h。结果提示:pH、温度是NMN在水溶液中稳定性的主要影响因素,低温、防潮和弱酸性环境更有利于NMN及其制品的贮存、应用。     

一测多评法与外标法测定双黄连制剂中黄酮类成分含量的比较分析

 目的 分别采用一测多评法（QAMS）与外标法（ESM）测定双黄连制剂中4种黄酮类成分的含量,以证明一测多评法在复方中应用的可靠性。方法 采用RP-HPLC,色谱柱：Xtimate^TM C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相：甲醇(A)-0.2%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长274 nm。结果 一测多评法的计算值和外标法的实测值无显著差异。结论 “一测多评”法可作为一个新的质量评价模式用于双黄连制剂中黄酮类成分的质量评价。     

夏枯草种子与奇亚籽、兰香子的性状、膨胀度和化学组成比较

目的：为了充分挖掘夏枯草药用部位果穗在采收加工、储存和运输过程中脱落的夏枯草种子的利用价值,对其进行性状、膨胀度和化学组成研究,并与市售的奇亚籽和兰香子进行比较。方法：性状采用直接观察法;膨胀度按照2020年版《中华人民共和国药典》(四部)通则2101方法测定;采用超高效液相色谱法(UPLC)测定其中6种酚酸类成分(丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸)的含量,流动相乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～7 min,2%～8%A;7～13 min,8%A;13～14 min,8%～17%A;14～30 min,17%A),检测波长280 nm;采用正己烷提取脂溶性成分,利用气相色谱-质谱法(GC-MS)鉴定其中的脂肪酸,并对5种含量较高的棕榈酸、油酸、硬脂酸、亚油酸和α-亚麻酸进行含量测定,DB-35MS毛细管柱(0.25 mm×60 m,0.25μm),进样温度250℃,载气为高纯氦气,流速1.0 mL·min^-1,分流比50∶1;采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,GC-MS鉴定其挥发性成分组成,WM-5MS毛细管柱(0.25 mm×...     

苍术油定性定量方法

目的:制定苍术油定性定量方法。方法:采用薄层色谱法对苍术挥发油进行TLC鉴别;气相色谱法测定苍术挥发油中β-桉叶醇的含量。以正十六烷为内标物,HP-5弹性石英毛细管柱。结果:β-桉叶醇在6～14μg范围线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.8%。结论:苍术的TLC鉴别具有专属性;β-桉叶醇的测定方法稳定,重复性好,可作为苍术油原料质量控制方法。