清燥救肺汤对肺癌磷酸戊糖能量代谢途径的关键酶G6PD活性及其调控因子的影响

目的:观察清燥救肺汤对肺癌磷酸戊糖能量代谢途径6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)活性及其调控因子的影响,探讨其机制。方法:50只雄性C57BL6J小鼠,通过随机分组,分为模型组、环磷酰胺组、清燥救肺汤高、中、低剂量组,每组10只。右腋下注射Lewis肺癌细胞建立肺癌荷瘤模型,清燥救肺汤高、中、低剂量组分别以11,5.5,2.8 g·kg^-1·d^-1造模前2周开始灌胃给药,环磷酰胺组以50 mg·kg^-1·(2 d)-1腹腔注射给药,模型组以等体积生理盐水灌胃给药,接种后继续给药2周后处死各组小鼠并取瘤组织,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测G6PD活性及小鼠活性氧(ROS)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测癌组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基单位gp91phox和p22phox mRNA的表达。结果:与模型组比较,清燥救肺汤高、中、低剂量组及环磷酰胺组G6PD活性明显降低(P<0.05,P<0.01);清燥救肺汤高、中、低剂量组及环磷酰胺组ROS含量,NADPH氧化酶亚基单位gp91phox,p22phox mRNA表达显著降低(P<0.01)。结论:清燥救肺汤可能通过抑制NADPH氧化酶表达,减少ROS含量,抑制G6PD的表达,发挥抑制肺癌细胞能量代谢及细胞增殖的功效。     

清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌细胞中ACO1,ACL,FFA,CHO的影响

目的：观察清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌细胞顺乌头酸酶(Aconitase closing odor,ACO1)、ATP柠檬酸裂解酶(ATP citrate lyase,ACL)、游离脂肪酸(Free fatty acids,FFA)、胆固醇(Cholesterol,CHO)含量的影响。方法：C57BL/6J雄性小鼠,随机分为5组,分别为清燥救肺汤高剂量组、中剂量组、低剂量组,模型组,环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)组,每组10只,共50只。于小鼠右腋下注射Lewis肺癌细胞建立肺癌荷瘤模型,清燥救肺汤低、中、高剂量组剂量分别为2.75 ,5.5,11g.kg_^-1.d_^-1,先灌胃给药2周然后造模,CTX组以50 mg.kg_^-1.(2d)_^-1进行腹腔注射给药,模型组用等体积的生理盐水进行灌胃给药,接种后继续灌胃给药2周,处死小鼠取瘤组织。酶联免疫吸附测定(Enzyme-linkedimmunesorbent assay,ELISA)检测FFA、CHO的含量；实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测ACL mRNA的表达；蛋白质免疫印记法(Western blot)检测ACO1蛋白表达。结果：与模型组比较,CTX组及清燥救肺汤高、中、低剂量组中肺癌细胞ACO1蛋白表达,ACL mRNA的表达及FFA、CHO含量显著降低(P＜0.05,P＜0.01)。结论：清燥救肺汤可有效抑制荷Lewis肺癌细胞增殖,减少肺癌细胞能量生成,ACO1、ACL、FFA、CHO可能是其药效作用靶点。