Disruption of the KEX1 gene in Pichia pastoris allows expression of full‐length murine and human endostatin

Endostatin is a potent angiogenesis inhibitor. In order to isolate sufficient quantities of soluble protein for in vivo studies in mice, we expressed murine endostatin in Pichia pastoris. Analysis of the expressed protein by mass spectrometry indicated that the protein was truncated. N‐terminal sequence analysis determined that the N‐terminus was intact, suggesting that the C‐terminal lysine was missing. In Saccharomyces cerevisiae, Kex1p can cleave lysine and arginine residues from the C‐terminus of peptides and proteins. We hypothesized that the KEX1 homologue in P. pastoris is responsible for the loss of the C‐terminal lysine of endostatin. To test this hypothesis, we cloned and disrupted the P. pastoris KEX1 gene. Although the overall amino acid identity between the P. pastoris and the S. cerevisae Kex1p is only 36%, the amino acid residues involved in the catalytic activity or close to the active residues are highly conserved. Disruption of the KEX1 reading frame allowed expression of murine and human endostatin with the C‐terminal lysine. The KEX1 disruption strain may be a useful tool for the expression of other proteins with a C‐terminal basic amino acid. Addition of a lysine to the C‐terminus of recombinant proteins may protect the C‐terminus from degradation by other carboxypeptidases. 3·5 kb of the P. pastoris KEX1 gene locus have been deposited in the GeneBank database and are available under Accession No. AF095574. Copyright © 1999 John Wiley & Sons, Ltd.     

沾3区块内源微生物激活及现场试验

分子生物学技术在石油微生物研究过程中凸显了其重要作用。利用物理模拟的手段在高温高压条件下模拟了胜利油田沾3区块的地层条件,并利用分子生物学的方法考察了不同激活剂对内源微生物的激活效果。实验以区块的注入水和产出水为激活对象,以葡萄糖、淀粉、玉米浆干粉、蔗糖作为激活碳源,以微生物激活的可行性作为目标,进行了微生物的激活优化。结果表明,微生物种群在激活以后发生了明显变化,其中葡萄糖为碳源激活效果尤为突出。另外现场单井吞吐试验表明,激活剂注入后含水下降明显,其中沾3-26井含水下降5%,原油日产由3.4t提高到10.4t,产生了明显的驱油效果。     

分布式电网多能互补电源输出电压自动开关控制方法

基于分层控制的输出电压自动开关控制方法与基于极值优化的输出电压自动开关控制方法没有对电网多能互补电源输出电压状态进行诊断,出现控制后无功功率、有功功率到达稳态时间长的问题,导致电源输出电压自动开关控制效果差,为此设计一种405分布式电网多能互补电源输出电压自动开关控制方法.对实时采集的电网输出电压数据进行简单的滑动平均...     

支持用户权限动态变更的可更新属性加密方案

属性加密在实现云数据细粒度安全共享方面具有较大优势.由于云存储中用户访问权限动态变化,当属性或用户私钥撤销时,数据重加密是保证密文前向安全性的有效方法,但相应的计算开销及数据上传下载的通信开销过大.针对上述问题,提出一种支持用户权限动态变更的可更新属性加密方案(updatable attribute-based encryption scheme supporting dynamic change of user rights, SDCUR-UABE).通过在密文策略属性加密中构造属性及用户版本密钥,在撤销用户属性时只需更新用户私钥对应的转换密钥构件;撤销系统属性时需要更新属性版本密钥来实现对密文密钥部分构件的可替换更新;撤销用户私钥时只需更新用户版本密钥.由此避免了基于数据重加密实现密文更新带来的巨大计算开销及通信开销.此外,在方案构造中利用密钥分割实现数据解密外包来降低用户的解密开销.理论分析及实验验证表明：在保证密文前向安全性的前提下,该方案能够有效解决云存储系统中用户权限动态变更时密文更新的计算效率与通信开销问题,同时减轻了用户解密的计算量.     

掺锰硅材料的电流振荡特性

用高温扩散方法制备出补偿Si∶(B,Mn)材料,并研究了这种材料的电流振荡参数与光照和电场之间的关系.结果表明:在一定光照和电场范围内(276～305V/cm),电阻率为104Ω·cm的材料在液氮温度下显示出电流振荡特性;在一定的电场下,电流振荡波形是固定的,不随时间变化;振荡频率随光照强度的增大而线性增大;调制系数随着光强的增强而减弱;振荡的最大值随着光照强度增大而减小,最小值随着光强增大而缓慢增大.     

云环境下支持可更新加密的分布式数据编码存储方案

由于云存储密文的静态性特征,密钥泄露成为影响存储数据安全性的重要因素.数据重加密是应对密钥泄露的有效手段,但相应的计算开销以及上传下载的通信开销增加了用户和存储系统的负担.此外,对基于分布式编码的数据存储而言,密文更新需要在解密密文的基础上进行,密文合并过程同样增加了系统的通信及计算开销.针对上述问题,提出一种云环境下支持可更新加密的分布式数据编码存储方案(distributed data encoding storage scheme supporting updatable encryption, DDES-UE).通过利用密钥同态伪随机函数构造可更新加密方案,可避免密文更新的计算与通信开销过大问题;基于密文分割与改进FMSR编码实现数据分布式存储,保证存储数据的高可用性和各存储节点的直接数据更新.安全性证明及性能分析表明：提出的方案在保证数据存储安全性的同时,能够支持部分存储节点损坏时安全高效的数据可恢复性以及解密数据的完整性验证.与传统的数据重加密相比,DDES-UE能够避免数据重加密及数据上传、下载、解码、合并带来的计算和通信开销,对于构建支持直接数据更新的安全高效云存储系统有重要意义.此外,周期性密钥更新可有效增加攻击者通过获取密钥破解密文的时间成本,从而增强了系统的主动安全防御能力.     

对焊钻杆热处理自动控制系统的研制

针对对焊钻杆热处理工艺实际操作中 ,人工调节中频电源功率进行加热存在温度不准、工艺不稳定的问题 ,研制了对焊钻杆热处理自动控制系统。系统的技术关键是根据红外线测温仪反馈的数值利用计算机自动调节中频电源功率 ,以达到需要的温度目标。简述了系统的功能与流程、硬件配置及结构、计算机控制系统软件的设计与开发。 360根对焊钻杆的热处理实际运行表明 ,系统的自动化程度很高 ,操作简单 ,大大减轻了工人的劳动强度 ,年利润可达 2 4 91万元。     

环氧浇注干式电力变压器的过载运行

在环氧浇注干式电力变压器安全运行的范围内,分别对长期安全过载、短时合理过载和短时折寿过载的３种运行情况进行了分析、计算以及相应的计算机程序设计。